国家教育部博士点基金(20113250110003)
- 作品数：8 被引量：23H指数：4
- 相关作者：刘宗平顾建红付应霄刘学忠仝锡帅更多>>
- 相关机构：扬州大学蚌埠医学院江苏农牧科技职业学院更多>>
- 发文基金：国家教育部博士点基金国家自然科学基金江苏省高校优势学科建设工程资助项目更多>>
- 相关领域：农业科学生物学更多>>
- 整合素及其调控破骨细胞相关信号机制研究进展被引量：6
- 2013年
- 整合素是一类细胞膜表面跨膜蛋白,在介导细胞黏附并参与细胞内外信号传递的过程中具有重要意义。破骨细胞在骨重建与骨吸收的动态平衡中起关键调控作用,尤其是封闭带中的整合素αvβ3是影响骨吸收的主要黏附分子,对破骨细胞内外Ca2+及下游信号的调控起关键作用。论文对整合素的结构、分类、功能及其调控破骨细胞相关信号的机制进行了阐述。
- 仝锡帅顾建红刘宗平
- 关键词：整合素破骨细胞信号转导
- RAW264.7细胞分化为破骨细胞的凋亡观察被引量：4
- 2015年
- 采用M-csF＋RANKL联合诱导RAW264．7细胞分化为破骨样细胞（OCL），观察培养过程中的凋亡现象，了解其生长规律。在诱导培养的第5～9天，通过TRAP染色、检测TRAP基因表达水平、细胞骨架与胞核染色方法分析OCL凋亡状况。结果表明：体外培养成熟OCL短时间内即发生凋亡，表现为TRAP阳性细胞数减少，TRAP基因表达水平降低，细胞骨架结构破坏、胞核形态改变。
- 付应霄顾建红王怡袁燕刘学忠卞建春刘宗平
- 关键词：RAW264.7细胞破骨样细胞凋亡
- 骨保护素对鸭胚破骨细胞分化与活化的影响
- 2013年
- 为研究骨保护素(Osteoprogerin,OPG)对体外培养鸭胚破骨细胞(Osteoclast,OC)分化与活化的影响,收集23日胚龄鸭胚骨髓细胞,体外培养过程中分组加入0 ng/mL(A组)、30 ng/mL(B组)、100 ng/mL(C组)OPG进行处理。通过抗酒石酸酸性磷酸酶染色(Tartrate-resistant acid phosphatase,TRAP),骨吸收陷窝分析技术,检测TRAP阳性细胞数量及OC的骨吸收活性。结果显示,3个试验组TRAP阳性细胞数、OC的骨吸收活性均在OPG处理7 d后达到最高水平。与A组相比,OPG处理组OC数目及其骨吸收活性均显著减弱(P<0.05),每个时间段骨吸收陷窝净增长面积与OC数目变化趋势一致。表明OPG能够抑制OC细胞前体分化,促进成熟OC发生凋亡,抑制成熟OC的骨吸收活性。
- 丁小丽付应霄顾建红王怡刘宗平
- 关键词：骨保护素抗酒石酸酸性磷酸酶骨吸收活性
- 鸡破骨细胞分离和培养方法的改进被引量：1
- 2014年
- 为获得大量有活力的鸡破骨细胞(Osteoclast,OC),本试验选取18日龄鸡胚,从长骨中提取骨髓细胞,用胰酶消化,40%和70%的percoll梯度离心分离骨髓间质细胞。在此基础上,用60 ng/mL核因子κB受体活化因子配体(RANKL)、50 ng/mL巨噬细胞集落刺激因子(M-CSF)诱导培养。采用抗酒石酸酸性磷酸酶(TRAP)染色、骨吸收陷窝以及标志性蛋白TRAP、基质金属蛋白酶9(MMP-9)、组织蛋白酶K检测鉴定破骨细胞。结果显示,诱导后的TRAP阳性细胞剧增,TRAP、MMP-9和组织蛋白酶K蛋白表达极显著上调,可在牛骨上形成大量的骨吸收陷窝。研究表明,该方法是一种快速、实用、高效的鸡破骨细胞分离培养技术。
- 宋瑞龙仝锡帅程来洋高倩张家铭王东顾建红朱家桥袁燕刘学忠刘宗平
- 关键词：破骨细胞纯化
- 鸭胚与小鼠的破骨细胞特性比较被引量：1
- 2015年
- 本文分别采集鸭胚与小鼠的破骨细胞(osteoclast,OC),通过检测TRAP阳性细胞数及骨吸收陷窝面积,比较鸭胚与小鼠的OC形态、数目及活性。结果表明,鸭胚OC形状不规则、体积较大、核多且主要分布于胞质,而小鼠OC形状较规则、体积小、核多且大多分布于细胞边缘;随机选取视野中,鸭胚与小鼠OC数差异不显著;而鸭胚OC骨吸收陷窝面积显著大于小鼠OC骨吸收陷窝面积(P<0.05)。表明鸭胚与小鼠OC均具有OC的普遍特征,但两者在骨吸收活性方面存在差异。
- 付应霄顾建红王怡袁燕刘学忠卞建春刘宗平
- 关键词：鸭胚小鼠破骨细胞
- 无血清培养基诱导破骨样细胞分化
- 2014年
- 探索了无血清培养基对RAW264.7细胞诱导破骨样细胞(osteoclast-like-cell,OCL)分化的影响。结果显示,无血清条件下,M-CSF+RANKL能够诱导RAW264.7细胞分化产生TRAP阳性OCL,F-actin及Hoechst33258染色观察到OCL骨架结构完整、核规则,具有骨吸收活性。这表明在无血清条件下RAW264.7细胞可诱导分化产生OCL,但其存活时间短,此外,M-CSF在其分化过程中具有不可替代的作用。
- 付应霄顾建红袁燕刘学忠卞建春刘宗平
- 关键词：无血清培养破骨样细胞
- 骨保护素对破骨细胞活性的影响被引量：8
- 2013年
- 旨在探讨骨保护素(osteoprotegerin,OPG)对破骨细胞(osteoclast,OC)活性的影响。采用小鼠原代OC模型,在体外培养的基础上添加不同浓度OPG,通过TRAP阳性细胞计数、细胞骨架F-actin染色、骨吸收功能检测等手段,观察OPG对体外培养OC的作用。结果发现,OPG能够直接作用于OC,减少其数量,破坏其F-actin环,减弱其骨吸收活性,且随OPG浓度的增加,对OC的影响更加明显。结果表明,OPG能够减少OC数量并抑制其骨吸收活性,呈现剂量效应。
- 付应霄顾建红赵鸿雁刘伟仝锡帅刘学忠卞建春刘宗平
- 关键词：骨保护素破骨细胞活性
- 2种方法诱导形成的破骨细胞特性比较被引量：5
- 2013年
- 采集ICR小鼠骨髓单核细胞在体外培养过程中加入25.0μg/L M-CSF+50.0μg/L RANKL诱导形成破骨细胞,同时选择RAW264.7细胞培养过程中添加100.0μg/L RANKL诱导分化为破骨细胞。通过检测抗酒石酸碱性磷酸酶(Tartrate resistant acid phosphatase,TRAP)染色阳性数及骨吸收陷窝,比较小鼠骨髓单核细胞和RAW264.7细胞株诱导形成的破骨细胞活性。结果显示,小鼠骨髓诱导的细胞TRAP阳性数显著低于RAW264.7细胞株(P<0.05),而小鼠骨髓诱导的破骨细胞所形成骨吸收陷窝的面积显著大于RAW264.7细胞株(P<0.05)。结果表明,2种方法均可诱导形成具有典型特征的破骨细胞,骨髓单核细胞诱导形成的破骨细胞活性更强,但破骨细胞的数量和纯度明显低于RAW264.7细胞株。
- 付应霄顾建红王世涛王怡赵鸿雁刘伟仝锡帅刘宗平
- 关键词：破骨细胞
