海南省教育厅科研基金(HjKj200403)
- 作品数：3 被引量：18H指数：3
- 相关作者：叶妙水郭建春张桂和胡新文钟克亚更多>>
- 相关机构：中国热带农业科学院海南大学桃江县农业局更多>>
- 发文基金：海南省教育厅科研基金海南省自然科学基金更多>>
- 相关领域：生物学更多>>
- 北美海蓬子盐胁迫条件下抑制差减文库构建与分析被引量：3
- 2007年
- 北美海蓬子(Salicornia Bigelovii Torr.)是一种耐盐性极强的真盐生植物,在200mmol/L的Na+浓度下生长,其高度和含汁量是5mmol/LNa+浓度下生长的2倍和2.5倍。为了研究北美海蓬子耐盐的机理和分离耐盐新基因,我们构建了在盐胁迫条件下北美海蓬子基因表达差异的SSH文库。以北美海蓬子种子播种于0mmol/LNaCl MS液体培养基上幼苗(0号材料)的总RNA为Driver,200mmol/LNaCl诱导24h幼苗(2号材料)的总RNA为Tester,运用SMART PCR cDNA合成技术分别合成全长cDNA。将两种cDNA群体进行抑制差减杂交,用T/A法分别构建了盐胁迫相关基因的正向差减文库(205个克隆子)和反向差减文库(235个克隆子)。通过PCR和反式NorthernDot-Blot消除假阳性和重复克隆子,得到在盐胁迫下特异表达的阳性克隆85个。对测序结果正常的81个克隆进行BLASTn分析,其中有70个cDNA序列与已经报道的其它物种的核酸序列具有较高的同源性;另外11个cDNA序列未找到有较高相似性的已知序列。81个cDNA序列中没有与北美海蓬子中已报道的核酸序列有较高的相似性,因此,所有81个克隆序列都是北美海蓬子中的新基因。
- 李吉涛龙建琪叶妙水张桂和郭建春
- 关键词：盐胁迫
- 转海蓬子Na^+/H^+逆向运输蛋白基因番茄的耐盐性研究被引量：4
- 2007年
- 以转海蓬子Na+/H+逆向运输蛋白基因(Nhap)的番茄(Lycopersicon esculentum Mill.)阳性植株和对照植株为材料,测定叶片相对含水量、质膜透性、K+/Na+比值和叶绿素含量4项耐盐指标.结果表明:在盐胁迫条件下,转基因植株的相对含水量、K+/Na+比值和叶绿素含量明显高于对照植株,而叶片质膜透性明显低于对照植株,说明Nhap基因已经在番茄转化植株体内表达,提高了转基因植株的耐盐性.
- 张桂和郭建春叶妙水
- 关键词：转基因番茄耐盐指标
- 北美海蓬子Na^+/H^+逆向运输蛋白基因的克隆及拟南芥转化分析被引量：11
- 2007年
- Na+/H+逆向运输蛋白在植物耐盐性方面起着极为重要的作用。根据在不同植物中功能相同的同源基因保守序列设计引物,通过RT-PCR方法从真盐生植物北美海蓬子(Salicornia Bigelovii Torr.)中克隆出包括有1683bp的完整编码区在内的2591bp(GenBank登陆号为DQ157454)的Na+/H+逆向运输蛋白基因(SbNHX1)cDNA序列。将该基因编码区序列构建到植物表达载体pVKH-35S-pA上,并通过农杆菌介导转化到模式植物拟南芥(Arabidopsis thaliana)中,得到T3代转入单基因种子。200mmol/L的NaCl胁迫培养结果显示,转基因拟南芥在200mmol/L的NaCl胁迫条件下生长状况好于野生型植株,植物表现有一定的耐盐性。
- 肖前谷叶妙水钟克亚胡新文郭建春
- 关键词：北美海蓬子转基因拟南芥耐盐性
