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国家高技术研究发展计划(2012AA10A409-5)

作品数：25 被引量：176H指数：10
相关作者：成永旭吴旭干何杰杨志刚姚琴琴更多>>
相关机构：上海海洋大学安徽华亿农牧科技发展有限公司盘锦光合蟹业有限公司更多>>
发文基金：国家高技术研究发展计划国家自然科学基金科技部科技型中小企业技术创新项目更多>>
相关领域：农业科学生物学更多>>

文献类型

  • 25篇期刊文章
  • 1篇学位论文

领域

  • 23篇农业科学
  • 6篇生物学

主题

  • 22篇中华绒螯
  • 22篇中华绒螯蟹
  • 22篇绒螯蟹
  • 9篇养殖
  • 7篇基因
  • 6篇克隆
  • 5篇扣蟹
  • 5篇基因克隆
  • 4篇养殖性能
  • 4篇脂肪酸去饱和...
  • 3篇野生
  • 3篇幼蟹
  • 3篇河蟹
  • 3篇成蟹
  • 3篇池塘
  • 3篇池塘养殖
  • 2篇淡水
  • 2篇形态学
  • 2篇性腺
  • 2篇性腺发育

机构

  • 25篇上海海洋大学
  • 1篇淮阴师范学院
  • 1篇上海交通大学
  • 1篇盘锦光合蟹业...
  • 1篇安徽华亿农牧...

作者

  • 25篇成永旭
  • 14篇何杰
  • 14篇吴旭干
  • 10篇姚琴琴
  • 10篇杨志刚
  • 7篇刘青
  • 6篇王瑶
  • 5篇姜晓东
  • 5篇刘皓
  • 4篇郭子好
  • 4篇刘启彬
  • 4篇马明君
  • 4篇杨青
  • 4篇赵恒亮
  • 3篇杨筱珍
  • 3篇王春
  • 3篇龙晓文
  • 3篇董鹏生
  • 2篇曾奇韬
  • 1篇丁怀宇

传媒

  • 6篇水产学报
  • 5篇中国水产科学
  • 4篇生物学杂志
  • 3篇上海海洋大学...
  • 2篇生物技术通报
  • 1篇动物学杂志
  • 1篇科学养鱼
  • 1篇淡水渔业
  • 1篇广东农业科学
  • 1篇渔业科学进展

年份

  • 2篇2017
  • 10篇2016
  • 8篇2015
  • 3篇2014
  • 3篇2013
共 25 条 记 录，以下是 1-10
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排序方式：
中华绒螯蟹EcR基因全长cDNA克隆及表达分析被引量：9
2014年
为了研究蜕皮激素受体（EcR）在中华绒螯蟹蜕皮和性腺发育过程中的作用,本实验采用逆转录聚合酶链反应（RT-PCR）以及cDNA末端快速扩增（RACE）技术,克隆了中华绒螯蟹EcR基因全长cDNA序列。运用实时荧光定量PCR（qRT-PCR）方法,分析该基因在不同组织、蜕皮过程及卵巢发育阶段的表达特征,并研究了甲基法尼酯（MF）对卵巢中EcR的调控作用。结果显示,中华绒螯蟹EcR cDNA全长2 156 bp,编码422个氨基酸,其序列与招潮蟹相似性最高,为89%。荧光定量PCR结果显示,EcR在Y器官中表达量最高;在卵巢和肌肉中少量表达;在肝胰腺、鳃、心脏、胃、肠、胸神经节和脑神经节中微量表达。在中华绒螯蟹不同蜕皮时期中,Y器官中EcR表达量在D期和E期的表达量最高;肝胰腺中EcR表达量从AB期到D期有上升的趋势,到E期有所降低;肌肉中EcR表达量在AB期最高;鳃中EcR表达量在D期最高。在中华绒螯蟹卵巢发育过程中,EcR在卵巢发育Ⅰ-Ⅳ期的表达量有上升趋势,到Ⅴ期表达量降低;体外注射实验中,MF1（注射1μg）组的EcR表达量与对照组和生理盐水组无显著差异,而MF2（注射2μg）组的EcR表达量显著上升;离体培养实验中,MF1组（10^-8mol/L）和MF2组（10^-7mol/L）显著高于对照组和生理盐水组。研究表明,EcR基因在中华绒螯蟹蜕皮和卵巢发育过程有重要作用,MF可以调控EcR基因在卵巢中的表达。
王瑶杨志刚沈城姚琴琴曾奇韬刘启彬成永旭
关键词：中华绒螯蟹基因克隆蜕皮卵巢发育
低盐度海水和淡水对中华绒螯蟹性腺发育及交配行为的影响被引量：11
2013年
研究了低盐度海水(盐度为15)和淡水(盐度为0)对中华绒螯蟹(Eriocheir sinensis,以下简称河蟹)性腺发育及交配行为的影响,并比较了河蟹交配和产卵前后的性腺指数及肝胰腺指数的变化。实验分为4组,分别为低盐度海水雌蟹组、淡水雌蟹组、低盐度海水雄蟹组和淡水雄蟹组。结果表明,(1)各组河蟹的成活率均在80%左右,无显著差异(P>0.05);(2)实验第15天、30天和45天时,低盐度海水雌蟹组的卵巢指数显著高于淡水雌蟹组(P<0.05),低盐度海水雄蟹组的性腺指数也略高于淡水雄蟹组,但差异不显著(P>0.05);(3)实验第30天时,低盐度海水雌蟹组的肝胰腺指数显著低于淡水雌蟹组(P<0.05),其余采样时间两组雌体间或两组雄体间的肝胰腺指数差异不显著(P>0.05),实验期间,两组雌体的肝胰腺指数均显著下降(P<0.05);(4)实验第45天,低盐度海水雌蟹组和雄蟹组实验个体全部能够交配,有66.7%的低盐度海水雌蟹组的个体交配后2 d内产卵,淡水雄蟹组有部分个体在低盐度海水中有发情行为;(5)低盐度海水组,雌蟹产卵后和雄蟹交配后的性腺指数均显著下降(P<0.05),但肝胰腺指数下降不显著(P>0.05)。
吴旭干赵亚婷何杰黄庆黄志峰刘皓成永旭
关键词：中华绒螯蟹低盐度海水淡水性腺发育交配行为
3种不同饵料对越冬后再摄食至第一次蜕壳前中华绒螯蟹幼蟹能量密度和营养积累研究被引量：5
2016年
以3种不同饵料饲喂越冬后再摄食至第一次蜕壳前的中华绒螯蟹幼蟹,测试全个体能量密度、肝胰腺总脂和粗蛋白含量、肌肉总脂和粗蛋白含量。结果显示,个体能量密度呈先上升、后下降的走势,且配合饲料组幼蟹再摄食早期显著高于再摄食前和临近蜕壳前(P<0.05);临近蜕壳前与再摄食前的能量密度均无显著性差异(P>0.05);大规格幼蟹的能量密度始终高于小规格幼蟹,差异不显著(P>0.05);不同饵料组同规格幼蟹的能量密度,玉米组高于鲫鱼肉组和饲料组,且大规格差异显著(P<0.05)。肝胰腺总脂和粗蛋白含量未出现显著性差异(P>0.05)。小规格幼蟹肌肉总脂和粗蛋白均呈显著下降走势(P<0.05),而大规格幼蟹肌肉总脂无显著变化(P>0.05),肌肉粗蛋白含量显著升高(P<0.05)。
王福辰王春马明君成永旭
关键词：中华绒螯蟹幼蟹能量密度
中华绒螯蟹一龄性早熟和二龄成熟家系扣蟹阶段生长和早熟的比较研究被引量：18
2016年
河蟹一龄性早熟是扣蟹养殖过程中的一个重要问题,通过构建一龄性早熟和二龄正常性成熟河蟹家系,综合评估了两种家系子一代在扣蟹养殖阶段的生长、早熟率、成活率、产量、早熟蟹和正常扣蟹的平均体质量及其规格分布等参数,结果显示：（1）除215日龄雄体甲壳长外,一龄早熟家系扣蟹在155和215日龄的体质量、甲壳长、甲壳宽、增重率（WGR）和特定生长率（SGR）均显著低于二龄成熟家系（P〈0.05）;（2）整体上两种家系子代的成活率和产量均无显著差异,尽管一龄早熟家系子代雄体的早熟率略高于二龄成熟家系,但是两者的差异不显著,一龄早熟家系子代雌体无一龄早熟现象,二龄成熟家系子代雌体的早熟率是其雄体的两倍;（3）两种家系后代中正常扣蟹各规格比例基本呈正态分布,雌雄体主要集中于3~6 g和6~9 g两个体质量范围,无论雌体还是雄体,二龄成熟家系的大规格扣蟹（体质量〉6 g）比例较高,一龄早熟家系的小规格扣蟹（体质量〈6 g）比例较高。综上,河蟹二龄成熟家系子代在扣蟹阶段的生长性能优于一龄早熟家系子代,两者的一龄性早熟情况也有所不同,需要进一步研究河蟹一龄性早熟的生理机制和性别差异。
董鹏生刘青吴旭干何杰常国亮丁怀宇王幼鹏成永旭
关键词：中华绒螯蟹性早熟扣蟹养殖性能
中华绒螯蟹FAD6-b基因的全长克隆及原核表达分析被引量：3
2016年
根据已登录的中华绒螯蟹一种Δ6去饱和酶基因(Accession Number:JX946434)及菁夜蛾去饱和酶基因(Accession Number:KJ622055.1)的保守区设计引物,通过逆转录PCR以及RACE技术克隆了中华绒螯蟹另一种Δ6去饱和酶基因FAD6-b的全长序列。经序列分析,中华绒螯蟹FAD6-b cDNA全长为2 310 bp,其中开放阅读框(ORF)为1 326 bp,共编码442个氨基酸(Accession Number:KP876058),理论分子量为50.86 ku,理论等电点为8.47,FAD6-b基因的氨基酸序列与已公布的一条中华绒螯蟹Δ6去饱和酶基因的一致性为76%。原核表达载体构建及其表达实验表明,中华绒螯蟹FAD6-b基因成功重组到原核表达载体pCold-TF DNA中,重组质粒pCold TF-fad6b在大肠杆菌BL21(DE3)pLysS中进行表达,经SDS-PAGE电泳分析表明,IPTG诱导后的重组菌出现了单一的蛋白条带,且大小与预期(105.86 ku)一致,可溶性分析显示目的蛋白主要存在于蛋白上清液中。对重组蛋白进行纯化,蛋白纯化液经电泳检测后显示出特异性单一条带,进一步证明了pCold TF-fad6b的成功构建和表达。目的蛋白经Western-blotting检测,结果表明获得的重组蛋白与6×His抗体进行了特异性结合,显示出良好的免疫学活性。
杨志刚姚琴琴成永旭施秋燕杨青何杰马明君王瑶常东
关键词：中华绒螯蟹基因克隆原核表达
中华绒螯蟹幼蟹蜕皮周期中肝胰腺和肌肉脂类的动态变化被引量：11
2014年
以越冬后即将进入蜕皮的中华绒螯蟹幼蟹为实验对象,采用生化分析方法,研究其蜕皮周期肝胰腺及肌肉脂类的动态变化。本实验将其幼蟹蜕皮周期分为蜕皮前期(D期)、蜕皮期(E期)、蜕皮后期(AB期)和蜕皮间期(C1期和C2期)。结果发现,(1)蜕皮各期肝胰腺总脂含量变化显著,呈现为"高-低-高"的趋势,其中D期最高,AB期最低,C1、C2期开始回升;而肌肉总脂含量变化趋势与肝胰腺相反,为先上升后再下降趋势,在D期最低,AB期含量最高。(2)肝胰腺脂类中以甘油三酰(TG)为主,其次是磷脂(PL);而肌肉脂类主要是PL,其次是TG和胆固醇(CHO)。肝胰腺中TG含量为先下降后上升趋势,其中C1期含量最低,肝胰腺中的PL含量变化趋势与TC相反,AB期含量最高;肌肉中TG含量在E期最高,而此期的PL含量最低。(3)肝胰腺和肌肉的主要脂肪酸为C16∶0、C18∶1n9、C18∶1n7、C18∶2n6(LOA)、C20∶5n3(EPA)和C22∶6n3(DHA)(相对含量>4%)。蜕皮周期内,肝胰腺中的饱和脂肪酸(SFA)、单不饱和脂肪酸(MUFA)和高度不饱和脂肪酸(HUFA)均表现为下降趋势,其中D期肝胰腺中的DHA和EPA含量最高;肌肉中的SFA和MUFA呈现为先上升后下降趋势,而肌肉中的PUFA和HUFA表现为先下降后上升趋势。研究表明,中华绒螯蟹幼蟹蜕皮周期中,肝胰腺和肌肉中的脂类成分发生了显著变化,肝胰腺中脂类可能是其蜕皮期间的主要能量来源物质之一。
马明君王春吴旭干何杰龙晓文李国祥汤北伟成永旭
关键词：中华绒螯蟹幼蟹肝胰腺肌肉
中华绒螯蟹ELOVL6 cDNA全长克隆及其表达分析被引量：6
2016年
为了探究中华绒螯蟹自身脂肪酸合成能力,采用RACE技术,克隆获得中华绒螯蟹ELOVL6 c DNA序列全长(Gen Bank accession:KT779219)。该序列全长2247 bp,包括235、873和1139 bp的5'非编码区(5'-UTR)、开放阅读框(ORF)和3'非编码区(3'-UTR),编码290个氨基酸(AA),具有ELOVL家族的全部特征:6个跨膜区、高度保守的组氨酸簇HXXHH、多个保守区以及内质网滞留信号KXKXX。分析发育树表明,ELOVL2与ELOVL5聚为一支,ELOVL6聚为另一支,其中中华绒螯蟹ELOVL6与其他节肢动物ELOVL6聚为一支,与凡纳滨对虾聚为一小支。采用异源表达方法研究ELOVL6编码的蛋白质对脂肪酸的作用,GC-MS结果显示,转基因的酵母培养物C16:0和C16:1n-7含量下降,而C18:0和C18:1n-9的含量升高,同时有新产物C18:1n-7产生。通过荧光定量PCR(q PCR)技术研究ELOVL6基因在中华绒螯蟹不同组织及不同脂肪源喂养下的表达情况,显示该基因在肠道、胃、心脏、肝胰腺、胸神经节、肌肉、眼柄、鳃和脑神经节9个组织均有表达,其中在肝胰腺中表达量最高,显著高于其他组织;在不同脂肪源饲喂的结果中,肝胰腺、肌肉、卵巢和精巢4个组织中均有表达,并且各组织在全鱼油组饲喂下表达量最低,其中用全豆油组饲喂后,肝胰腺中的表达情况显著升高,明显高于全鱼油组和鱼油豆油混合组。以上结果综合表明,中华绒螯蟹中ELOVL6能够催化C16的饱和及C16的单不饱和脂肪酸延长,同时受到饲料中不同脂肪源的一定影响,这为探究中华绒螯蟹PUFA合成途径及脂肪酸调控机制提供了依据。
施秋燕杨志刚姚琴琴成永旭杨青魏帮鸿
关键词：中华绒螯蟹基因克隆异源表达
中华绒螯蟹二龄早熟和晚熟群体选育第三代在扣蟹阶段的养殖性能评价被引量：6
2016年
采用群体选育、养殖实验和定期采样的方法,比较了中华绒螯蟹二龄早熟和晚熟选育群体第三代（G3）和非选育群体在扣蟹阶段的生长、成活率、平均体质量、体质量分布比例和产量,结果显示：（1）二龄早熟雌体在7-8月和9-10月的增重率（WGR）及特定增长率（SGR）显著高于二龄晚熟雌体（P〈0.05）;无论雌体还是雄体,二龄晚熟群体在7-10月总体生长速度显著低于对照组（P〈0.05）,整个实验期间3群体的生长速度大小顺序为：对照组〉早熟G3〉晚熟G3（P〉0.05）;（2）二龄早熟和晚熟群体G3在扣蟹阶段的成活率接近,但二龄晚熟群体的成活率显著高于对照组扣蟹;二龄早熟群体G3最终扣蟹平均体质量显著高于晚熟扣蟹,对照组居于两者之间,3组扣蟹产量高低顺序为：早熟G3〉晚熟G3〉对照组;（3）就扣蟹体质量分布而言,3群体扣蟹体质量主要集中于小于3 g和3~6 g这两个体质量范围内,晚熟G3在小于3 g和3~6 g两个体质量范围内比例最高。综上,二龄早熟群体G3在扣蟹阶段具有生长速度快、扣蟹平均体质量大和单产高的优点,二龄晚熟群体G3在扣蟹阶段的成活率显著高于对照组,两选育群体G3在扣蟹养殖上均具有一定的优良性状。
王亚威姜晓东吴旭干何杰刘青王幼鹏成永旭
关键词：中华绒螯蟹遗传选育养殖性能
池塘养殖中华绒螯蟹扣蟹附肢自切规律的研究被引量：4
2015年
对中华绒螯蟹扣蟹培育池塘中幼蟹的自切规律进行了调查研究,结果显示：1）池塘养殖幼蟹的自切率较高,达29.2%,但无性别差异;根据体重将幼蟹分成4种规格（大：6～8 g;中：4～6 g;小：2～4 g;极小：0～2 g）,就不同规格扣蟹而言,中等规格扣蟹的自切率相对较高,但4者之间差异不显著（P〉0.05）。2）大多数个体自切一条（50%～60%）或2条附肢（25%～35%）,自切3个或3个附肢以上的比例较低,自切5条附肢比例仅为2%。3）附肢自切通常发生在幼蟹身体的其中一侧,身体两侧同时自切的概率较低（12%～15%）。4）各肢型受到自切的概率不同,后3对附肢的自切率显著高于第1第2对附肢（P〈0.05）,自切螯足的概率最低。5）整体上,扣蟹雌雄个体的自切规律基本一致,不存在显著的性别差异（P〉0.05）。
赵恒亮何杰吴旭干龙晓文刘皓成永旭
关键词：中华绒螯蟹幼蟹自切
中华绒螯蟹两种微卫星DNA分型方法的应用比较被引量：5
2015年
为对比荧光标记毛细管电泳和聚丙烯酰胺凝胶电泳在微卫星等位基因分型上的效果,试验选择6对微卫星引物,对60个中华绒螯蟹个体基因组DNA进行PCR扩增,荧光标记法共检测出等位基因129个,平均每个位点21.5个等位变异,聚丙烯酰胺凝胶电泳共检测出等位基因174个,平均每个位点29个等位变异。对位点Esin67的PCR产物分别进行重复检测,发现荧光标记法的重复率为100%,而聚丙烯酰胺凝电泳法两次结果存在较大差异,证实了荧光标记法检测的可靠性显著高于聚丙烯酰胺凝胶电泳。对两种方法的检测效率和经济成本的分析表明,荧光标记法虽然成本较高,但效率高于聚丙烯酰胺凝胶电泳法。建立单重PCR的多重毛细管电泳技术是提高效率、降低成本的有效途径。
刘皓刘青吴旭干何杰董鹏生成永旭
关键词：中华绒螯蟹微卫星PAGE荧光标记
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