国家自然科学基金(81171617)
- 作品数：5 被引量：77H指数：5
- 相关作者：徐东平刘妍李韦杰戴久增韩佳琪更多>>
- 相关机构：北京大学解放军302医院解放军第三0二医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金艾滋病和病毒性肝炎等重大传染病防治专项国家科技重大专项更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 54例慢性乙型肝炎患者肝组织乙型肝炎病毒共价闭合环状DNA与血清HBsAg定量检测结果分析被引量：35
- 2011年
- 目的检测慢性乙型肝炎患者肝组织HBV共价闭合环状DNA（cccDNA）和血清HBsAg，分析两种定量指标之间及其与血清HBVDNA载量的相关性。方法应用PSAD消化＋滚环扩增＋跨缺口实时荧光PCR方法，定量检测54例慢性乙型肝炎患者甲醛固定石蜡包埋肝组织HBVcccDNA水平；用化学发光试剂定量检测患者血清HBsAg。用Pearson检验及直线回归分析方法对数据进行分析。结果患者肝组织HBVcccDNA与血清HBsAg定量水平之间呈正相关（r=0．459，P〈0．01），但与血清HBVDNA载量相关性无统计学意义；血清HBsAg定量水平与血清HBVDNA载量呈正相关（r=0．328，P〈0．05），与病毒复制效率呈负相关（r=－0．373，P〈0．05）。结论慢性乙型肝炎患者肝组织HBVcccDNA载量与血清HBsAg定量水平相关，结合血清HBVDNA定量检测，可以更全面的反映HBV的复制水平，评价抗病毒疗效。
- 李韦杰李伯安赵景民韩佳琪刘妍江玲毛远丽鲁凤民徐东平
- 关键词：肝炎病毒共价闭合环状DNA肝炎抗原乙型
- 核苷(酸)类似物治疗慢性乙型肝炎患者HBV基因耐药变异影响因素分析被引量：14
- 2013年
- 目的研究核苷(酸)类似物抗HBV治疗中病毒聚合酶基因区耐药突变的相关因素。方法从我院行HBV聚合酶基因区序列测定的患者中,选择持续单一或联合应用核苷(酸)类似物治疗的慢性乙型肝炎(乙肝)和乙肝肝硬化患者,分析其宿主、病毒和药物等对HBV基因耐药变异的影响,包括性别、年龄、诊断、HBV基因型、HBeAg、HBVDNA水平、ALT、AST、TBIL及药物(包括拉米夫定、阿德福韦酯、恩替卡韦、拉米夫定┼阿德福韦酯联合治疗)。结果分析结果显示,年龄、血清HBVDNA水平、HBeAg(-)和核苷(酸)类似物种类是影响病毒聚合酶基因区突变的相关因素。结论年龄>40岁且HBeAg(-)的血清高病毒载量的慢性乙肝患者,在临床上病毒耐药发生率较高。对于核苷(酸)初治的慢性乙肝患者,恩替卡韦单药治疗与拉米夫定┼阿德福韦酯联合治疗耐药发生率相似,显著低于拉米夫定单药和阿德福韦酯单药治疗。
- 赵攀戴久增柳芳芳姚增涛李乐辛绍杰徐东平
- 关键词：核苷类突变
- 结合基因型耐药突变检测与表型耐药分析探索乙肝病毒耐药的新认识被引量：16
- 2012年
- 核苷(酸)类似物是临床上治疗慢性乙型肝炎病毒(HBV)感染最常用的药物,但长期应用可引发病毒耐药,导致治疗失败。基因变异检测及表型耐药分析是发现和鉴定HBV耐药的基本方法,前者主要是应用基因测序或线性反向探针杂交等方法,检出已知的病毒耐药相关突变,后者则是在体外细胞水平确定携带有变异基因的HBV毒株对病毒复制力及核苷(酸)类药物敏感性的影响,是鉴定复杂与特殊HBV耐药变异的基本手段。我们通过技术创新,建立了敏感、特异、经济、高效的HBV基因型检测方法,进而建立了可靠的HBV复制力和表型耐药分析方法,广泛应用于临床样本分析,实现了对HBV耐药的早期发现及对新的非典型HBV耐药相关突变株的鉴定。我们近期在核苷(酸)类似物耐药和应答不佳的患者中检测到多种特殊和复杂HBV耐药相关突变,并结合临床资料,进一步对代表性变异株进行病毒复制力和表型耐药分析,取得了多项重要发现:①从大样本中检出和鉴定了多种多重耐药HBV变异株,并发现联合用药可协同抑制多重耐药HBV变异株的体外复制;②HBV rtL229替换可作为补偿变异,恢复拉米夫定耐药变异株rtM204I的病毒复制力;③rtM204Q是一种新的拉米夫定耐药相关突变;④rtA181C+rtL180M+rtM204V与恩替卡韦耐药相关;⑤同一耐药患者血清HBV虽检出耐药变异,但外周血单个核淋巴细胞(PBMCs)中的HBV cccDNA仍以原始野生株为优势种群,提示PBMCs为体内HBV野生株的"存储库",参与HBV肝外感染。上述发现对深入揭示HBV耐药变异的临床特点和发生机制,辅助临床合理制定并优化抗病毒治疗方案具有重要作用。
- 徐东平刘妍
- 关键词：突变表型
- 抗HBV药物靶位的研究进展被引量：7
- 2013年
- 目前临床上应用的抗HBV治疗药物主要有两类:干扰素和核苷(酸)类似物,前者不良反应较大,后者存在病毒耐药问题。抗HBV药物最大的问题是大多数患者在长期治疗后仍不能彻底清除病毒。因此,研发针对HBV不同靶位的新药对慢性HBV感染性疾病的治疗意义重大。本文就抗HBV药物靶位的研究进展进行综述。
- 姚伟明徐东平
- 关键词：乙型肝炎病毒抗病毒药治疗学
- 血清病毒检出核苷(酸)类似物耐药突变的慢性乙肝患者PBMCs中HBV cccDNA基因突变特点分析被引量：6
- 2012年
- 目的分析经核苷(酸)类似物治疗并已在血清病毒中产生耐药基因突变的慢性乙肝患者外周血单个核细胞(PBMCs)中HBV共价闭合环状DNA(cccDNA)反转录酶(RT)区的基因突变特点。方法收集2010年7月-2011年8月于解放军302医院住院的慢性乙肝患者30例,均经6个月以上的核苷(酸)类似物抗病毒治疗并已在血清中检测到耐药相关突变。采集与血清检测同一时间点的全血标本30份并分离PBMCs,提取总DNA,以不降解质粒的ATP依赖的DNA酶(PSAD)消化+滚环扩增+跨缺口PCR方法扩增HBV cccDNA的RT区,分析9个位点的核苷(酸)类似物耐药相关变异。结果 30份样本中,16例检出HBV cccDNA,检出率为53.3%,PBMCs中HBV cccDNA检出率与HBeAg阳性率、血清ALT水平及血清HBVDNA载量均无显著相关性。在16例HBV cccDNA检出者中,B基因型5例,占31.3%,C基因型11例,占68.8%,与血清HBV基因分型结果一致。但是,与血清HBV均检出耐药突变株不同,16例PBMCs cccDNA中检出的病毒均是无核苷(酸)类似物耐药相关突变的野生株。结论在经核苷(酸)类似物治疗的慢性乙肝患者血清中HBV DNA产生耐药突变的情况下,PBMCs中HBV cccDNA仍以原始野生株为优势种群,推测PBMCs可能是体内HBV野生株的"存储库"。
- 李忠斌任晓强刘妍许智慧李韦杰戴久增李乐邵清陈国凤徐东平
- 关键词：突变
