美国国家科学基金(NSF-MCB0548525)
- 作品数：4 被引量：5H指数：2
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- 拟南芥Ran2小GTP结合蛋白抗血清的制备及其FITC荧光标记被引量：2
- 2007年
- 将原核表达、纯化的Ran2蛋白对新西兰兔进行免疫制备抗血清,ELISA测定其效价为1∶51 200。免疫印迹分析表明,原核表达、纯化的Ran2和拟南芥可溶性蛋白杂交带均在26 ku处。FITC荧光标记抗体检测Ran2绿色杂交带主要出现在细胞分裂间期的核膜上。
- 马立安江涛张忠明
- 关键词：抗血清免疫印迹
- 用酵母双杂交系统筛选与拟南芥成膜素相关蛋白(PhrIP1)相互作用的蛋白质
- 2007年
- 用酵母双杂交系统,以pEG202-PhrIP1为诱饵筛选拟南芥AD-cDNA文库,寻找与成膜素相关蛋白(PhrIP1)相互作用的蛋白质。结果表明,在5×106个转化子中得到6个阳性克隆,经测序及体外蛋白质相互作用证实,得到与PhrIP1相互作用的2个靶蛋白,即Ran2小GTP结合蛋白和CIPK6钙调节激酶。
- 马立安王芳张忠明
- 关键词：酵母双杂交系统
- 拟南芥PhrIP1基因超表达、GFP和RNAi载体的构建被引量：1
- 2007年
- 根据编码拟南芥成膜素相关蛋白(PhrIP1)基因cDNA全序列设计超表达引物,以1～1000bp之间序列设计GFP引物和序列内部第24～240bp之间序列设计RNAi引物,以pMD18-T-PhrIP1为模板,用PCR方法分别扩增出1.8kb、1.0kb和0.216kb的片段,分别克隆至双元表达载体、GFP载体和RNAi载体上,得到了植物超表达载体pBI-PhrIP1、GFP载体pMON-GFP-PhrIP1和RNAi载体Hellsgate2-PhrIP1。用电转化法,将这些重组质粒导入农杆菌GV3101菌株中,PCR扩增结果表明所构建的植物超表达载体pBI-PhrIP1、GFP融合载体pMON-GFP-PhrIP1和RNAi载体Hellsgate2-PhrIP1已导入农杆菌。
- 马立安张忠明
- 关键词：RNAI载体电转化法
- 拟南芥Ran小GTP结合蛋白在细胞有丝分裂中的定位被引量：3
- 2008年
- 分别采用RT-PCR和直接荧光免疫方法分析Ran2 mRNA在拟南芥不同组织器官中的表达及Ran2的亚细胞定位。结果表明,Ran2基因在拟南芥根、茎、叶和花中均有表达;Ran2蛋白在细胞分裂间期主要定位于核膜周边,在后期定位于赤道板上和纺锤体上,末期又回到子细胞核膜周边。
- 马立安江涛张忠明
- 关键词：亚细胞定位
