国家自然科学基金(81001241)
- 作品数：6 被引量：34H指数：3
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- 铝和ApoEe4等位基因对神经母细胞瘤细胞磷酸化tau蛋白和Aβ表达的影响被引量：1
- 2017年
- 目的用人源性神经母细胞瘤细胞株（SH-SY5Y）研究环境因素铝和遗传因素ApoEε4等位基因单独及联合作用对细胞磷酸化tau蛋白和Aβ表达的影响。方法选取SH-SY5Y细胞进行AlCl3染毒和ApoEε4转染处理，实验分组分为对照组、400 μmol/L AlCl3组、ApoEε4转染组、400 μmol/LAlCl3＋ApoEε4转染组。AlCl3染毒（或）和ApoEε4转染48 h后，采用CCK-8试剂盒测定细胞活力；用ELISA试剂盒测定细胞总tau蛋白、p-tau181、p-tau231、p-tau396和Aβ。结果400 μmol/L AlCl3组、ApoEε4转染组、400 μmol/L AlCl3＋ApoEε4转染组细胞活力明显著低于对照组，差异有统计学意义（P〈0.05），且AlCl3和ApoEε4存在交互作用（P〈0.05），表现为协同效应。tau蛋白和Aβ测试结果显示400 μmol/L AlCl3组、ApoEε4转染组、400 μmol/L AlCl3＋ApoEε4转染组tau5、p-tau181、231、396、Aβ含量均明显高于对照组，差异有统计学意义（P〈0.05），且AlCl3和ApoE ε4存在交互作用（P〈0.05），表现为协同效应。结论环境因素铝和遗传因素ApoE ε4等位基因均可促使细胞总tau、磷酸化tau蛋白表达升高，Aβ沉积增多，且两因素共同存在具有协同效应。
- 路小婷王昊贾志建李秋营牛侨
- 关键词：铝神经母细胞瘤
- CHIP和Hsp70在三氯化铝致N2a细胞tau蛋白异常磷酸化中的作用被引量：2
- 2018年
- [目的]探究热休克蛋白70羧基末端结合蛋白(CHIP)和热休克蛋白70(Hsp70)在三氯化铝致小鼠神经母细胞瘤细胞(N2a细胞)tau蛋白异常磷酸化中的作用。[方法]以低、中、高剂量三氯化铝溶液(铝离子浓度分别为0.5、1.0、2.0 mmol/L)染毒N2a细胞,以不含三氯化铝溶液染毒者作为对照组,染毒48 h后显微镜下观察细胞形态,CCK-8法检测细胞活力,用Western blot法测定细胞tau-5蛋白、磷酸化蛋白(pThr181、pThr231、pSer262、pSer396)以及CHIP和Hsp70蛋白表达情况。[结果]随着染毒剂量增加,细胞数量逐渐减少,突触回缩,胞体变圆。中、高剂量组细胞活力百分比[(91.37±0.03)%和(78.45±0.10)%]明显低于对照组[(100.00±0.00)%](P<0.05,P<0.01)。高剂量组tau-5蛋白表达水平明显高于对照组(P<0.01);中、高剂量组pThr231蛋白表达水平明显高于对照组(P<0.01);各染毒组pSer396蛋白表达水平明显高于对照组(P<0.05或P<0.01);各组pThr181、pSer262蛋白表达水平的差异无统计学意义(P>0.05)。各染毒组CHIP、Hsp70表达水平均高于对照组(P<0.05或P<0.01)。[结论]三氯化铝可以导致N2a细胞pThr231、pSer396表达增高,其作用机制可能与CHIP和Hsp70表达变化有关。
- 崔双杰巨晓芬潘宝龙张玲路小婷
- 关键词：CHIPHSP70TAU蛋白磷酸化
- 职业性铝接触工人轻度认知功能障碍及分型研究被引量：13
- 2014年
- [目的]通过现况调查研究铝职业接触人群的认知功能变化,筛检轻度认知功能障碍(MCI)患者并分型,探讨铝致MCI亚型分布特点。[方法]选择某铝厂电解工人及铝矿工人等共172例职业性铝接触工人,采用简易精神状态量表(MMSE)、画钟试验(CDT)、数字广度测验(DS)、物体记忆测验(FOM)、言语流畅性测验(RVR)等问卷测试工人的认知功能。采用石墨炉原子吸收分光光度法检测血铝含量。[结果]以工人血铝含量均数(41.86μg/L)为界点将研究对象分为高血铝组[(72.45±9.25)μg/L]与低血铝组[(19.90±10.65)μg/L],各组人数分别为70例、102例。高血铝组MMSE、CDT、DP、FOM及RVR实验得分明显低于低血铝组,差异均有统计学意义(P<0.05)。高血铝组MCI检出率(28.6%)明显高于低血铝组(14.7%),差异有统计学意义(P<0.05)。高血铝组MCI患者中遗忘型轻度认知功能障碍(aMCI)18例,低血铝组aMCI 8例,高血铝组aMCI占MCI的构成比(90.0%)明显高于低血铝组(53.3%),差异有统计学意义(P<0.05)。logistic回归分析显示,工人年龄、铝接触工龄及血铝含量等因素是aMCI主要影响因素。[结论]长期职业性铝接触是MCI发病的危险因素,且职业性铝接触引起的MCI亚型以aMCI为主。
- 宋斐翡杨晓娟殷金珠胡佳丽贾晓芳王昊李瑞牛侨路小婷
- 关键词：轻度认知功能障碍影响因素
- 三氯化铝对SH—SY5Y细胞tau蛋白异常磷酸化作用被引量：11
- 2013年
- 目的探讨三氯化铝对SH-SY5Y细胞及tau蛋白异常磷酸化水平的影响。方法选取SH—SY5Y细胞进行三氯化铝染毒，实验分为对照组、200、400和800p．mol／LAl3＋染毒组，染毒48h后观察细胞形态学变化，采用CCK-8法测定细胞活性，并提取细胞蛋白，采用蛋白免疫印迹法（Western blot）检测细胞蛋白P—tau181、231、262、396和tau5的表达情况。结果随着染铝浓度增加细胞数目减少，突触回缩，细胞活性测定结果显示，800μmol／LAl3＋组细胞活性明显低于对照组，差异有统计学意义（P〈0．05）；Western-Blot结果显示200、400和800μmol／LAl3＋组P-tau181、231、396和tau5蛋白的表达均明显高于对照组，差异有统计学意义（P〈0．05），800μmol／LAl3＋组P-tau262蛋白表达明显高于对照组，差异亦有统计学意义（P〈0．05）。结论在本实验条件下，三氯化铝对SH-SY5Y细胞有毒性作用，低浓度就可引起tau181、231、396和tau5表达异常。
- 王昊路小婷贾志健牛侨
- 关键词：铝TAU蛋白磷酸化神经毒性
- 铝接触对电解工人认知功能的影响及其影响因素被引量：15
- 2013年
- 目的通过现况调查阐明铝接触对电解工人认知功能的影响及其轻度认知功能障碍（MCI）的患病情况，并探讨其影响因素。方法选取某电解铝厂电解车间66名退休工人作为接触组，对照组工人来自同一地区的某面粉厂退休工人70名，采用简短精神状态量表（MMSE）筛选MCI患者；采用电感耦合等离子质谱法（ICP-MAS）测定血铝含量；应用多元统计学方法探讨MMSE得分的影响因素，血铝水平与MCI患病率的关联性。结果铝接触组工人的血铝水平（25．18±2．65）μg／L明显高于对照组（9．97±2．83）μg／L差异有统计学意义（P〈0．01）。MMSE问卷测试结果显示，铝接触组工人的总分（26．13±2．57）明显低于对照组（27．89±1．91），差异有统计学意义（P〈0．05），其中铝接触组时间和地点定向力、短时记忆、计算力及语言能力得分明显低于对照组，差异有统计学意义（P〈0．05）。铝接触组的MCI检出率（18．2％）明显高于对照组的MCI检出率（5．7％），差异有统计学意义（P〈0．01）；MMSE问卷得分的主要影响因素是性别、年龄、文化程度和血铝水平。Logistic回归分析显示MCI检出率与血铝明显正相关（OR=1．168，P〈0．01）。结论长期铝接触可引起工人的认知功能障碍，可能是MCI发病的危险因素之一；高龄、男性和文化水平低、血铝水平高可能是认知功能障碍的危险因素。
- 路小婷梁瑞峰贾志建王昊宋斐翡李秋营牛侨
- 关键词：铝MCIMMSE
- CaMK-Ⅱ和PP2A在AlCl3致SH-SY5Y细胞tau蛋白异常磷酸化中的调控作用
- 2020年
- 目的探讨钙调蛋白激酶-Ⅱ(CaMK-Ⅱ)和蛋白磷酸酶-2A(PP2A)在AlCl3致人源性神经母细胞瘤细胞株(SH-SY5Y)细胞tau蛋白异常磷酸化中的调控作用。方法选取SH-SY5Y细胞进行AlCl3染毒和CaMK-Ⅱ拮抗剂KN93、PP2A激动剂鞘氨醇干预,实验分为对照组,AlCl3低、中、高染毒组(200、400和800μmol/L Al3+),KN93干预组(800μmol/L Al3++0.5μmol/L KN93)和鞘氨醇干预组(800μmol/L Al3++5 nmol/L鞘氨醇),染毒和干预48 h后,采用CCK-8法测定细胞活力,ELISA方法测定CaMK-Ⅱ、PP2A的含量,Western-Blot检测细胞总tau(tau5)及Thr-181、Thr-231、Ser-262、Ser-396磷酸化水平。结果细胞活力测定结果显示:与对照组相比,AlCl3中、高染毒组细胞活力降低(P<0.05);与AlCl3高染毒组相比,KN93干预组和鞘氨醇干预组细胞活力增高(P<0.05),且鞘氨醇干预组细胞活力与对照组相比差异无统计学意义。ELISA实验结果显示:与对照组相比,AlCl3低、中、高染毒组CaMK-Ⅱ含量增高(P<0.05),PP2A含量降低(P<0.05);与AlCl3高染毒组相比,KN93干预组和鞘氨醇干预组CaMK-Ⅱ含量降低(P<0.05),PP2A含量增高(P<0.05)。Western-Blot结果显示:与对照组相比,AlCl3低、中、高染毒组tau5和Thr-181、Thr-231、Ser-396磷酸化水平增高(P<0.05),AlCl3高染毒组Ser-262磷酸化水平增高(P<0.05);与AlCl3高染毒组相比,KN93干预组和鞘氨醇干预组tau5和Thr-181、Thr-231、Ser-262、Ser-396磷酸化水平降低(P<0.05),且KN93干预组Ser-262磷酸化水平,鞘氨醇干预组Thr-181、Thr-231、Ser-396磷酸化水平与对照组相比差异无统计学意义。结论AlCl3可引起SH-SY5Y细胞Thr-181、Thr-231、Ser262、Ser-396磷酸化水平异常增高,其机制与CaMK-Ⅱ和PP2A的变化有关;CaMK-Ⅱ主要调控Ser-262磷酸化水平,PP2A主要调控Thr-181、Thr-231、Ser-396磷酸化水平,提示AlCl3致SH-SY5Y细胞tau蛋白异常磷酸化与PP2A密切相关。
- 路小婷崔双杰张云玮徐诗梦巨晓芬牛侨
- 关键词：磷酸化蛋白
