引进国际先进农业科技计划(2006-4-C01-03)
- 作品数：1 被引量：3H指数：1
- 相关作者：王文棋蒋湘宁盖颖陆海更多>>
- 相关机构：北京林业大学更多>>
- 发文基金：引进国际先进农业科技计划国家自然科学基金国家重点基础研究发展计划更多>>
- 相关领域：生物学更多>>
- DNA重组酶Cre介导载体间基因的重组转移被引量：3
- 2007年
- DNA重组酶Cre可以识别LoxP位点,使含有LoxP位点的DNA分子发生重组:2个同向LoxP之间的DNA片段被删除,2个环状DNA分子被整合为一个大分子.基于Cre酶的这些作用特性,构建了一套载体间基因的重组转移体系,在Cre酶的作用下,gfp基因被从基因供体pTLG上切除下来,然后转移到基因受体pET-LoxP上,从而快速、简便地完成了gfp基因高效表达载体pET-gfp的构建.gfp基因在大肠杆菌BL21(DE3)中被诱导表达,使菌落产生了可视的绿色荧光.通过对荧光菌落的计数分析,比较了环状基因供体pTLG和线性基因供体pTLG对有效重组率的影响.使繁琐的传统载体构建变为简单的酶促反应,极大地简化了载体构建步骤,为Cre酶在基因克隆和亚克隆中的应用提供了很好的研究基础.
- 王文棋盖颖陆海李义蒋湘宁
- 关键词：GFP基因
