国家自然科学基金(30271155)
- 作品数：18 被引量：99H指数：7
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- 硒对氟致人肝细胞脂质过氧化、DNA损伤及凋亡的影响被引量：13
- 2004年
- [目的 ]研究硒对氟致离体培养人肝细胞脂质过氧化、DNA损伤及诱导凋亡的作用。 [方法 ]体外培养的正常人肝细胞分别接触 80 μg/ml氟化钠和 /或 1.73 μg/ml亚硒酸钠 12h后 ,检测细胞脂质过氧化物 (LPO)水平、还原型谷胱甘肽 (GSH)含量、细胞DNA损伤率、凋亡率和细胞周期构成比的情况。 [结果 ]氟组肝细胞LPO( 2 .88± 0 .5 9)nmolMDA/mg·prot、DNA损伤率 5 9.0 %、凋亡率 15 .5 6%± 2 .0 6%和S期细胞数 4.82 %± 0 .45 % ,均明显高于对照组 ,而GSH含量 ( 4 .2 3± 0 .78) μg/mg .prot则明显低于对照组 ;硒通过增加细胞GSH含量 ,降低LPO水平、DNA损伤率、凋亡率和S期细胞数而拮抗氟产生的毒性作用。 [结论 ]一定剂量的硒可拮抗氟所诱导的脂质过氧化、DNA损伤与细胞凋亡。
- 王爱国夏涛褚启龙陈学敏杨克敌
- 关键词：硒氟肝细胞脂质过氧化DNA损伤
- 氟对人胚肝细胞氧化应激、DNA损伤及凋亡的影响被引量：2
- 2003年
- 目的 研究氟对人胚肝细胞 (L 0 2细胞 )氧化应激、DNA损伤及诱导凋亡的作用。方法 体外培养的L 0 2细胞接触 40、 80、 160 μg/ml氟化钠 2 4h ,检测L 0 2细胞脂质过氧化物 (LPO)水平 ,还原型谷胱甘肽 (GSH )含量 ,DNA损伤率 ,细胞凋亡率和周期构成比的情况。结果 氟可使L 0 2细胞LPO水平升高 ,GSH含量下降 ,并且二者均与氟浓度呈明显的剂量 效应关系 ;氟可使L 0 2细胞DNA损伤率、凋亡率和S期细胞数明显升高 ,高剂量氟组DNA损伤率和凋亡率与低剂量氟组之间存在显著性差异。结论 氟可致L 0 2细胞出现氧化应激 ,引起DNA损伤 ,诱导细胞凋亡 。
- 王爱国邓淑凯夏涛禇启龙张明刘方陈学敏杨克敌
- 关键词：氟人胚肝细胞氧化应激DNA损伤氟中毒
- 氟致人肝细胞DNA损伤与细胞凋亡关系的研究被引量：4
- 2009年
- 目的研究氟致人肝细胞DNA损伤与细胞凋亡之间的关系。方法采用40、80、160μg/ml氟化钠对培养的人肝细胞进行染毒,12h后用单细胞凝胶电泳技术(SCGE)和流式细胞术(FCM)检测氟化物对人肝细胞DNA损伤和细胞凋亡情况。结果各氟染毒组人肝细胞DNA损伤程度明显高于对照组,并且随着染氟剂量的增高而增大;中、高剂量氟组人肝细胞凋亡百分率均明显高于对照组。同时,高剂量氟组与低剂量氟组之间细胞DNA损伤程度和凋亡率的差异亦有统计学意义。结论氟可导致人肝细胞DNA损伤,诱导细胞凋亡,一定浓度范围内的氟所导致的DNA损伤与细胞凋亡之间呈现明显的正相关关系。
- 褚启龙哈建利王爱国
- 关键词：氟人肝细胞DNA损伤细胞凋亡
- 苯巴比妥对双氯芬酸钠毒性和代谢的影响
- 2004年
- 目的 研究苯巴比妥对双氯芬酸钠毒性和代谢的影响。方法 用夹层细胞培养的方法 ,将双氯芬酸钠暴露于大鼠肝细胞或经苯巴比妥预处理后的肝细胞 ,测定培养液中肝细胞酶渗出量、细胞色素P4 5 0 3A(CYP 3A)活性和双氯芬酸钠代谢产物的含量。结果 肝细胞基础CYP 3A活性随培养时间的延长而逐渐降低 ,CYP 3A的这种下降趋势可被细胞色素P4 5 0诱导剂如苯巴比妥所改变。培养液中乳酸脱氢酶 (LDH) ,丙氨酸转氨酶 (ADLT)和天冬氨酸转氨酶 (AST)水平及双氯芬酸钠代谢产物 4’ -OH -DF和 5 -OH -DF的含量随双氯芬酸钠暴露浓度的增加而增加 ,各暴露组之间以及暴露组与对照组之间未见显著性差异。但肝细胞经苯巴比妥预处理后 ,再暴露于双氯芬酸钠中 ,培养液中 4’ -OH -DF和 5 -OH -DF浓度以及LDH水平均明显增加。结论 随着肝细胞内CYP 3A活性的增强 。
- 王爱国邓淑凯夏涛袁晶余日安陈学敏杨克敌
- 关键词：双氯芬酸钠苯巴比妥细胞色素P450
- 氟对人胎肝细胞细胞周期、凋亡及p53表达的影响被引量：4
- 2004年
- 目的 研究氟对人胎肝细胞 (L 0 2细胞 )细胞周期、凋亡及p5 3表达的影响。方法 体外培养的人胎肝细胞接触 4 0、 80、 16 0 μg/ml氟化钠 2 4h后 ,MTT法检测L 0 2细胞存活率 ,流式细胞术检测细胞凋亡率和周期构成比 ,Westernblot检测P5 3蛋白的表达水平。结果 高剂量氟染毒组细胞存活率显著低于对照组 (P <0 0 1) ;各染氟组S期细胞数与对照组相比均明显增多 (P <0 0 1) ,中、高剂量氟染毒组细胞凋亡率和p5 3蛋白表达量均显著高于对照组 (P <0 0 1)。结论 氟可使L 0 2细胞S期细胞数增多 ,诱导人胎肝细胞凋亡和 p5 3表达 ,并呈剂量 效应关系。
- 李晓燕禇启龙夏涛刘俊玲陈学敏杨克敌王爱国
- 关键词：人胎肝细胞P53表达细胞凋亡率细胞周期染毒
- 氟对人胚肝细胞DNA损伤及凋亡的影响被引量：10
- 2004年
- 目的 探讨氟对人胚肝细胞 (L - 0 2细胞 )DNA损伤及诱导凋亡的作用。方法 采用 4 0 ,80 ,16 0 μg/ml氟化钠对培养的人胚肝细胞进行染毒 ,2 4h后用单细胞凝胶电泳技术 (SCGE)和流式细胞术 (FCM)检测氟化物对人胚肝细胞DNA损伤和细胞凋亡情况。结果 氟组人胚肝细胞DNA损伤率明显高于对照组 ,Ridit值分别为 0 5 82 ,0 815 ,0 892 ;中、高剂量氟组人胚肝细胞凋亡百分率 (9 2 93± 1 171) ,(11 72 7± 1 196 )均明显高于对照组 (5 343± 1 6 2 0 )。同时 ,高剂量氟组与低剂量氟组之间细胞DNA损伤率和凋亡率的差异也存在显著性差异 (P <0 0 5 )。结论 氟化物具有引起人胚肝细胞DNA损伤和细胞凋亡的作用 ,并呈现一定的剂量 -效应关系。
- 王爱国夏涛褚启龙刘方张明杨克敌
- 关键词：氟DNA损伤细胞凋亡
- 硒对氟致L-02细胞DNA损伤和凋亡的影响被引量：3
- 2007年
- 目的探讨硒对氟导致的L-02细胞DNA损伤和凋亡的影响。方法采用80μg/ml氟化钠和/或1.73μg/ml亚硒酸钠对培养的L-02细胞进行染毒,24 h后采用单细胞凝胶电泳技术(SCGE)检测各组L-02细胞DNA损伤情况;用流式细胞术(FCM)检测各组L-02细胞凋亡率。结果氟组L-02细胞DNA损伤率和凋亡率明显高于对照组、硒组和氟硒组(P<0.01);而对照组L-02细胞DNA损伤率和凋亡率与硒组和氟硒组之间无显著性差异(P>0.05)。结论氟可导致L-02细胞DNA损伤,诱导细胞凋亡,适量硒可拮抗氟导致的L-02细胞DNA损伤和细胞凋亡作用。
- 褚启龙哈建利王爱国
- 关键词：硒氟L-02细胞DNA损伤氟中毒
- 三种细胞培养模型的效果评价被引量：1
- 2003年
- 原代大鼠肝细胞经不同体外细胞培养模型培养后 ,对肝细胞的酶渗出量、白蛋白分泌水平和细胞色素P450 1A(CYP 1A)活性进行了分析。结果显示 :在三种培养模型中 ,培养液的LDH水平随培养时间的延长而逐渐降低 ,但在单层培养 (MC)的第 5天 ,LDH水平明显升高 ,而夹层培养 (SC)的LDH在第 8天后没有检出 ,AST和ALT水平在整个培养过程中无明显变化。在生物反应器中 (bioreactor) ,肝细胞基础CYP1A活性可维持 2周以上 ,培养液中白蛋白的含量以生物反应器最高 ,其次是SC和MC。随着培养时间的延长 ,MC和SC中肝细胞CYP 1A活性逐渐降低 ,且MC肝细胞CYP 1A活性的下降速度比SC快。这种现象可被细胞色素P450 (P450 )的诱导剂如奥美拉唑和 3 甲基胆蒽 (3 MC)部分改变 ,MC肝细胞的诱导作用总是比SC肝细胞强。结果证实每一个体外细胞培养模型都有各自的优缺点 。
- 王爱国夏涛袁晶陈学敏Andreas K Nuessler
- 关键词：生物反应器细胞培养模型
- 氟对人胚肝细胞P53表达的影响
- 2007年
- [目的]探讨氟对人胚肝细胞(L-02细胞)P53表达的影响。[方法]对体外培养的人胚肝细胞染毒氟化钠40、80、160μg/ml24h后,分别采用MTT试验、蛋白印迹技术(Westernblot)和逆转录-聚合酶链式反应(RT-PCR)方法检测人胚肝细胞存活率、P53蛋白和mRNA水平。[结果]高浓度氟组细胞存活率显著低于对照组(P<0.01);中、高浓度氟组细胞P53蛋白水平均显著高于对照组(P<0.01),且随氟浓度增加而升高;低浓度氟组与对照组差异没有显著性(P>0.05);各氟染毒组P53mRNA的表达量均显著高于对照组(P<0.01),低、中浓度氟组P53mRNA表达量随染氟浓度的增高而增加;高浓度氟组的P53mRNA表达量虽然与对照组有显著性差异(P<0.01),但相对于中浓度氟组来说,已呈现出下降的趋势,与低浓度氟组水平相当。[结论]高氟可使人胚肝细胞的存活率下降,并诱导P53表达,但P53mRNA和P53蛋白的变化趋势并不完全一致。
- 褚启龙哈建利夏涛刘俊玲张明杨克敌王爱国
- 关键词：氟人胚肝细胞P53基因基因表达
- 氟致人胎肝细胞氧化应激与细胞凋亡关系的研究被引量：24
- 2004年
- 目的研究氟致人胎肝细胞氧化应激和细胞凋亡之间的关系。方法体外培养的人胎肝细胞接触不同浓度的氟化钠24h后,检测人胎肝细胞凋亡百分率、细胞周期构成比、脂质过氧化物(LPO)、还原型谷胱甘肽(GSH)和培养液中LPO水平以及乳酸脱氢酶(LDH)、丙氨酸转氨酶(ALT)和天冬氨酸转氨酶(AST)的活性。结果氟染毒组培养液中LDH和AST活性均显著高于对照组;细胞内和上清液中LPO水平升高,细胞内GSH则明显下降,并且二者均与氟浓度呈现明显的剂量-效应关系;氟可使人胎肝细胞凋亡百分率明显升高,S期细胞数增多。结论氟可致人胎肝细胞氧化应激,诱导细胞凋亡,一定浓度范围内的氟所诱导的氧化应激与细胞凋亡之间呈现明显的正相关关系。
- 褚启龙王爱国夏涛张明刘方刘宏凯杨克敌
- 关键词：人胎肝细胞氧化应激细胞凋亡脂质过氧化氟中毒细胞周期
