国家高技术研究发展计划(2006AA02Z416)
- 作品数：2 被引量：2H指数：1
- 相关作者：邹丽云万瑛张荣华熊锐华李景怡更多>>
- 相关机构：第三军医大学西南医院第三军医大学更多>>
- 发文基金：国家高技术研究发展计划更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- β2M-绿色荧光蛋白在MHC-Ⅰ肽亲和力实验中的应用被引量：2
- 2009年
- 目的构建并表达β2微球蛋白-绿色荧光蛋白融合蛋白,并应用该蛋白建立一种全新的MHC-Ⅰ肽亲和力实验方法。方法构建β2M-ZsGreen-6×His标签的融合蛋白真核表达质粒,转染293FT细胞表达,并以镍亲和层析法纯化,将该融合蛋白与表位肽共同与T2细胞反应,通过流式细胞术检测T2细胞标记绿色荧光的情况鉴定表位。结果构建了β2微球蛋白-绿色荧光蛋白真核表达质粒并表达、纯化得到融合蛋白,该蛋白可应用于亲和力实验,进行表位鉴定。结论β2微球蛋白-绿色荧光融合蛋白应用于亲和力实验鉴定CTL表位方法可行,步骤简便,适用于大通量表位鉴定。
- 熊锐华王昊亮邹丽云李景怡张晋宇张荣华万瑛
- 关键词：绿色荧光蛋白融合蛋白T细胞表位
- MHC-Ⅰ荧光四聚体载体的构建及其真核表达
- 2009年
- 目的构建MHC-Ⅰ荧光四聚体真核表达质粒,并表达、纯化该蛋白,以更简便地检测特异性T细胞。方法运用分子克隆技术,构建sKb-ZsGreen-6× His标签的融合蛋白真核表达质粒,转染293FT细胞表达,并以镍亲和层析法纯化。结果经酶切及测序鉴定证实成功构建了MHC-Ⅰ荧光四聚体真核表达质粒并完成表达、纯化,并经SDS-PAGE电泳证实。结论得到了纯化的MHC-Ⅰ荧光四聚体,并经流式细胞术证实其与β2-微球蛋白、OVA肽结合后能被B3Z细胞识别,为特异性T细胞检测提供了一种更方便的方法。
- 熊锐华李景怡邹丽云张晋宇万瑛张荣华
- 关键词：四聚体真核表达
