国家高技术研究发展计划(2006AA02Z469)
- 作品数：8 被引量：35H指数：4
- 相关作者：高连如张宁坤陈宇王丽华杨明更多>>
- 相关机构：中国人民解放军海军总医院南京军区杭州疗养院中国医学科学院北京协和医学院更多>>
- 发文基金：国家高技术研究发展计划更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 间充质干细胞修复心肌的旁分泌效应机制被引量：1
- 2010年
- 张润峰高连如
- 关键词：间充质干细胞旁分泌心肌修复
- 脐带华通胶间充质干细胞向Flk1阳性细胞分化的研究
- 2012年
- 目的:诱导脐带华通胶间充质干细胞向Flk1阳性细胞分化。方法:胶原酶法分离培养脐带华通胶间充质干细胞,第3代细胞以含2-巯基乙醇的分化培养基培养,应用RT-PCR和流式细胞仪从mRNA和蛋白水平检测Flk1阳性细胞分化水平。结果:脐带华通胶间充质干细胞Flk1mRNA及蛋白表达极低,分化培养基培养后表达上调,48h达高峰(P<0.05),之后表达降低。结论:2-巯基乙醇可诱导脐带华通胶间充质干细胞向Flk1阳性细胞分化,为从中分选Flk1阳性细胞进行进一步研究提供了依据。
- 陈海英高连如张宁坤杨明王志国
- 关键词：脐带间充质干细胞FLK12-巯基乙醇
- 脐带Wharton’s jelly源间充质干细胞——细胞治疗理想选择被引量：2
- 2012年
- 脐带Wharton’s jelly源间充质干细胞(WJ-MSCs)是原始的间充质干细胞,具有较强的自我更新及多向分化潜能,无致肿瘤性,同时具有较低的免疫原性,在临床前期多种疾病的防治中具有较好的作用。由于其取材方便,应用无伦理争议,是细胞治疗修复组织损伤的理想选择。文章就WJ-MSCs的性质及应用等做一综述。
- 陈海英高连如张宁坤韩明哲
- 关键词：脐带细胞治疗
- 干细胞移植治疗缺血性心脏病的进展及其作用机制被引量：11
- 2007年
- 学术背景:心肌梗死后,尽管现有的内外科治疗手段可以改善冠状动脉供血、挽救缺血心肌,但对已坏死的心肌或无功能心肌尚无良好治疗措施。细胞作为构成心脏结构、执行心脏功能的物质基础,尽管存在争议,但大量研究资料表明干细胞移植治疗是安全有效的。目的:文章试图就目前成体干细胞在缺血性心脏病治疗的临床研究进展做一综述,客观评价成体干细胞治疗缺血性心脏病的安全性、有效性,阐述成体干细胞改善心功能的可能机制,介绍当今临床研究方向。检索策略:由该论文的研究人员应用计算机检索Pubmed数据库1996/2007成体干细胞与缺血性心脏病方面的文献,检索词"adultstemcells,ischemialheartdisease,cardiomyocytes",并限定文章语言种类为English。同时计算机检索中国期刊全文数据库1996/2007的相关文献,检索词"成年干细胞,心肌细胞,缺血性心脏病",并限定文章语言种类为中文。共检索到1303篇文献,对资料进行初审,纳入标准:①文章所述内容应与缺血性心脏病干细胞移植密切相关。②同一领域选择近期发表或在权威杂志上发表的文章。排除标准:①重复性研究。②Meta分析。文献评价:文献的来源主要是通过对干细胞移植治疗缺血性心脏病现状及其作用机制进行汇总分析。1303篇文献中,动物实验和在体、离体、细胞学实验626篇,综述、述评、讲座类文献345篇,临床研究45篇,选用其中的46篇作为本文参考文献。资料综合:①干细胞为一群具有自我更新、多向分化潜能的原始细胞,分为胚胎干细胞和成体干细胞。虽然研究表明胚胎干细胞较成体干细胞具有更强的增殖和分化潜能,但由于其涉及伦理道德、来源困难等原因,限制了它的使用。②就目前已完成的包括不同类型的成体细胞(如骨髓单个核细胞、内皮祖细胞、CD133+细胞、骨髓间充质干细胞、成肌细胞等)移植�
- 高连如
- 关键词：干细胞移植缺血性心脏病
- 干细胞技术及其在心血管疾病治疗中的临床应用
- 2011年
- 心肌细胞不具有再生能力,当心肌损伤后无法通过自身的增殖、分化进行修复,而是由纤维瘢痕组织代替,因而失去自律收缩的能力。用干细胞修复损伤的心肌细胞是目前理想的策略和方法。本文综述了干细胞的类型、培养技术以及干细胞技术在心血管疾病中的应用前景。
- 张宁坤高连如
- 关键词：干细胞心血管疾病
- 不同消化方式对脐带华通胶间充质干细胞提取的影响被引量：5
- 2011年
- 目的探讨使用不同酶浓度、消化不同时间及不同浓度胎牛血清的培养基稀释对消化脐带华通胶后提取培养间充质干细胞的影响。方法无菌条件下取出正常剖腹产胎儿脐带,剔除动脉、静脉及外膜,取其之间的胶状物,剪成1 mm3及更小的块状,分别加入0.1%和0.2%的Ⅱ型胶原酶,分为A、B两组,37℃水浴消化。每一组消化时间分别为4、81、2、16、202、4、28、323、6、40 h共10个消化时间点,每一个消化时间点又分为两组,分别为A1、A2组和B1、B2组。消化后的黏稠细胞悬液用完全DMEM稀释,并加入特级胎牛血清至浓度为10%(A1、B1)和20%(A2、B2),充分混匀。悬液移至75 cm2培养瓶,15 ml/瓶,37℃、5%CO2、饱和湿度培养,3 d换液。通过细胞计数观察原代细胞贴壁生长的最早时间和80%细胞铺满瓶底的时间和生长活力。结果 0.2%的Ⅱ型胶原酶消化脐带华通胶在消化时间为20h,且稀释血清浓度为20%时,获得的细胞悬液在培养36 h即有细胞贴壁,培养6 d细胞贴壁达到80%,其余各组细胞生长情况各不相等,均弱于此组。其中消化时间在8 h以内和32 h以上时不论使用多少的酶浓度和稀释时使用多少的血清浓度,细胞均不生长。结论在使用胶原酶消化脐带华通胶提取间充质干细胞的过程中,使用0.2%Ⅱ型胶原酶、消化16～24 h、稀释培养时加入至20%的血清对干细胞的提取效果最佳。
- 张宁坤陈宇高连如王丽华庄恒成李俊凤刘丽娟王志国杨晔
- 关键词：胶原酶间充质干细胞
- 脐带华通胶间充质干细胞的分离培养及鉴定被引量：13
- 2010年
- 目的探讨人脐带华通胶间充质干细胞体外分离、培养方法,并通过成脂成骨诱导及表面标记物的检测进行鉴定。方法剔除脐带动脉、静脉和外膜,取遗留的华通胶组织,将其剪成细小的碎块,用浓度为0.2%的Ⅱ型胶原酶消化,提取脐带华通胶间充质干细胞,流式细胞仪检测细胞表面抗原CD44、CD90、CD105、CD73、HLA-ABC、CD34、CD45及HLA-DR,成骨细胞、成脂细胞分化诱导。结果脐带华通胶经胶原酶消化后,可提取大量间充质干细胞,流式细胞仪检测脐带华通胶干细胞不表达造血干细胞的表面特征,而表达间充质干细胞的标志,例如CD44、CD90、CD105及CD73,并且干细胞HLA-ABC阳性表达,CD34、CD45及HLA-DR呈阴性。组织化学染色显示茜素红、碱性磷酸酶及油红染色强阳性。结论该方法可较好地分离脐带华通胶间充质干细胞,将为实验研究和临床应用提供一种新的干细胞来源。
- 陈宇张宁坤杨明沈燕华王丽华高连如
- 关键词：脐带间充质干细胞
- 冠心病生物学治疗进展被引量：5
- 2010年
- 冠心病是危害人群健康的重大疾病，近年来发病率逐渐上升。目前药物治疗对病变严重的心肌缺血效果有限，而介入治疗（PCI）和心脏冠脉搭桥（CABG）治疗后手术部位或冠状动脉其他部位可发生再狭窄，均不能根治冠心病。因此寻找新的治疗途径，已经成为临床研究的重要课题。
- 张润峰高连如
- 关键词：冠心病生物学治疗基因转移干细胞移植
