江苏省科技厅基金(BL2012009)
- 作品数：8 被引量：25H指数：4
- 相关作者：杨晓玉崔毓桂刘嘉茵张炜许争峰更多>>
- 相关机构：南京医科大学江苏省人民医院南京医科大学附属南京妇幼保健院更多>>
- 发文基金：江苏省科技厅基金国家自然科学基金江苏省卫生厅资助项目更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- SET蛋白对精母细胞株(GC-2 spd)增殖和组蛋白乙酰化的影响
- 2017年
- 目的:观察SET蛋白对GC-2 spd精母细胞株增殖和组蛋白乙酰化的影响,探讨SET蛋白调节精子形成的作用。方法:体外培养GC-2 spd细胞,通过精母细胞标志物乳酸脱氢酶C(LDHC)和睾丸特异激酶1(TESK1)鉴定。琼脂糖珠免疫共沉淀试剂盒检测SET蛋白与组蛋白H4的结合。分别转染空载腺病毒(Ad H1-si RNA/NS,对照组)和SET干涉腺病毒(Ad H1-si RNA/SET,干涉组),比较细胞增殖情况,荧光显微镜观察GC-2spd细胞中SET蛋白的表达;用实时定量逆转录聚合酶链反应(Real time RT-PCR)和蛋白质印迹(Western blot)检测m RNA以及蛋白的表达。结果:免疫荧光显示精母细胞株GC-2 spd阳性表达LDHC和TESK1;SET蛋白表达于GC-2细胞的胞核和胞质中,免疫共沉淀提示SET蛋白与组蛋白H4结合。转染SET干涉腺病毒后,核内和胞质中SET蛋白表达明显降低(P<0.01)。与对照组相比,干涉组细胞增殖明显降低,组蛋白H4乙酰化水平明显增高(P<0.05);但组蛋白乙酰化酶(HATs)和去乙酰化酶(HDACs)m RNA表达水平差异无统计学意义(P>0.05)。结论:精母细胞核内和胞浆中均表达SET蛋白;SET蛋白降调,则抑制GC-2spd细胞增殖。SET蛋白可能通过与组蛋白H4相互作用调节其乙酰化,参与调节精子形成。
- 张蓓朱倩许波群徐文丹杨晓玉高超高莉刘嘉茵崔毓桂
- 关键词：精子发生精母细胞组蛋白类组蛋白乙酰化
- 成人型多囊肾并发男性不育症行胚胎植入前遗传学诊断的结局分析被引量：4
- 2018年
- 目的:成人型多囊肾(ADPKD)是最常见的遗传性肾脏疾病,ADPKD可引起少弱精子症和无精子症,从而导致男性不育症。本文回顾性分析了ADPKD并发男性不育症行胚胎植入前遗传学诊断(PGD)的治疗结局。方法:回顾性分析了2015年4月至2017年2月行PGD治疗的7例ADPKD并发男性不育症夫妇的临床资料,6例为少弱精子症,1例为梗阻性无精子症。7例患者均为PKD1基因杂合突变。ICSI后培养囊胚至第5或6天行卵裂球活检,采用Sureplex扩增试剂盒进行单细胞全基因组扩增,首先进行单体型连锁分析和Sanger测序,未致病的胚胎再进行全基因组低覆盖度测序行染色体拷贝数分析。选择非致病且整倍体的囊胚进行移植。结果:7例患者共行7个PGD周期,26枚囊胚中,12枚为未致病的整倍体囊胚。7例患者冻胚移植后6例临床妊娠,其中5例顺产(4例单胎,1例双胎),自然流产1例。结论:ADPKD并发男性不育症经PGD后可以实现较高的妊娠率与活产率,又可以避免子代再患ADPKD。本结论对于可以自然妊娠的ADPKD患者也有一定的借鉴意义。
- 杨晓玉李涛刘小军沈鉴东崔毓桂张癸荣刘嘉茵
- 关键词：成人型多囊肾男性不育症胚胎植入前诊断
- 过氧化物还原酶4在睾丸热应激时的保护作用被引量：1
- 2020年
- 目的:以过氧化物还原酶4(PRDX4)基因全敲除(PRDX4-/y)小鼠为模型,研究PRDX4在睾丸热应激时的保护作用. 方法:采用CRISPR/Cas 9技术对C57BL/6小鼠进行PRDX4基因全敲除,以野生型小鼠为对照,各24只.生长至性成熟(9周),PRDX4-/y和野生型组各12只小鼠睾丸43℃水浴热应激15 min,1次/d,连续3d;每组以25℃水浴作为热应激处理的对照.处理前、处理后1d和处理恢复5周后,各组均分别处死4只小鼠,取双侧睾丸组织,采用HE染色观察组织学变化、TUNEL法检测细胞凋亡率、Western印迹检测PRDX4表达水平、免疫组化染色观察氧化应激因子(HNE和8-OHdG)表达水平. 结果:与野生型小鼠比较,PRDX4基因全敲除小鼠的睾丸组织学、细胞凋亡和氧化应激因子表达差异不显著(P>0.05).43℃水浴热应激处理后PRDX4-/y小鼠[(38.65±2.57)%]和野生型小鼠[(13.21±1.434)%]生精细胞凋亡均显著升高(P<0.01),PRDX4-/y小鼠生精细胞凋亡率增加2倍,5周后生精功能恢复较野生型差.热应激处理后,PRDX4-/y,小鼠睾丸8-OHdG(38.25±1.19)较野生型小鼠(24.30±1.65)表达水平显著增加(P<0.01),而两组HNE的表达水平无显著差异(P>0.05);恢复5周后,PRDX4-/y小鼠生精细胞凋亡仍显著高于野生型小鼠[(3.09±0.16)%vs(1.45±0.11)%,(P<0.01)],PRDX4-/y小鼠睾丸生精细胞HNE的表达水平也高于对照组(28.57±0.56 vs 19±1.35,P<0.01),8-OHdG的表达水平也仍较对照组升高,但差异无显著性. 结论:PRDX4在睾丸处于应激状态时具有重要的保护性作用,并促进睾丸生精功能恢复.
- 马薇薇胡梦婷高莉高超覃莲菊刘嘉茵孟艳崔毓桂
- 关键词：基因敲除氧化应激生精细胞凋亡小鼠
- 高雄激素促进人胚胎干细胞向男性原始生殖细胞分化的研究被引量：2
- 2020年
- 目的:多囊卵巢综合征(PCOS)母亲孕早期的高雄激素可能影响其男性子代成年后的生育力。本研究利用人胚胎干细胞(hESCs)体外分化的实验模型,观察不同浓度睾酮对hESCs向早期雄性生殖细胞分化的影响,探讨孕早期高雄激素暴露对男性子代原始生殖细胞储备及成年后生育力的潜在影响。方法:2μmol/L视黄酸(RA)体外诱导hESCs(46,XY)向雄性生殖细胞分化,同时添加0 mol/L、3×10^-7 mol/L、5×10^-7 mol/L、15×10^-7 mol/L、45×10^-7 mol/L、135×10^-7 mol/L睾酮,在分化的第0、4、7、14天收集细胞样品,分析不同分化阶段雄性生殖细胞特异基因的表达,比较分化进程、分化效率。结果:不同浓度睾酮处理的hESCs,同一分化阶段细胞形态无差异。原始生殖细胞的标志基因DAZL的表达峰值出现在分化的第4天,15×10^-7 mol/L、45×10^-7 mol/L、135×10^-7 mol/L睾酮处理组的DAZL的表达量与3×10^-7 mol/L睾酮处理组对比明显增加(P﹤0.01)。减数分裂期早期生殖细胞特异基因SCP3的表达在分化的第4天开始上调,45×10^-7 mol/L睾酮处理组与3×10^-7 mol/L、5×10^-7 mol/L睾酮处理组比较,SCP3的表达均明显上调(P﹤0.01);SCP3的表达在分化的第7天达到峰值,15×10^-7 mol/L、45×10^-7 mol/L、135×10^-7 mol/L睾酮处理组与3×10^-7 mol/L睾酮处理组相比,SCP3明显高表达(P﹤0.01)。免疫荧光、流式细胞分析结果显示,各组间分化第4天DAZL、分化第7天SCP3及VASA的表达量随着睾酮浓度升高而有升高趋势。分化第4天,雄激素受体(AR)的表达开始升高,并且可维持至分化第14天;在相同分化阶段,睾酮较高浓度组hESCs的AR表达量高于睾酮较低浓度组(但P>0.05)。结论:hESCs向早期雄性生殖细胞分化过程中高雄激素处理,诱导雄激素受体的提前表达,使hESCs向早期雄性生殖细胞分化提前,可能导致PCOS患者男性子代雄性原始生殖细胞储备不足,进而影响其成年后的生育力。hESCs可作
- 曹孟刘菡文宁松刘嘉茵覃莲菊崔毓桂
- 关键词：多囊卵巢综合征高雄激素人胚胎干细胞生殖细胞男性不育
- 41例男性特发性低促性腺激素性性腺功能减退症的临床分析被引量：5
- 2014年
- 目的：探讨男性特发性低促性腺激素性性腺功能减退症（IHH）的临床特征和治疗。方法：2011年3月—2013年3月在南京医科大学第一附属医院生殖医学科男科就诊的IHH导致的41例男性不育患者中,13例为kallmann综合征,7例有隐睾病史。41例患者中,35例接受人绒毛膜促性腺激素（h CG）联合人绝经促性腺素（HMG）治疗,给予h CG、HMG治疗3~24个月;6例拒绝接受此研究方案。结果：治疗后,35例患者均感觉体力改善,性欲增强,同时第二性征得到不同程度的发育。27例患者疗程超过6个月,且双侧睾丸总体积、卵泡刺激素和睾酮水平均较治疗前显著上升,差异有统计学意义[（7.1±2.9）m L vs.（9.1±3.9）m L,（1.2±0.8）IU/L vs.（2.0±0.8）IU/L,（1.1±0.8）nmol/L vs.（12.5±2.7）nmol/L,均P〈0.05]。35例接受治疗的患者中分别有4,7,5例在治疗第3,6,9个月出现精子,共16例,其中11例患者的配偶在治疗过程中自然妊娠。结论：男性IHH的临床特征为睾丸功能低下,h CG联合HMG是有效的治疗方法,可明显改善患者临床症状并恢复部分生育能力。
- 杨晓玉刘金勇舒黎张炜刘嘉茵崔毓桂
- 关键词：性腺功能减退症
- 甲型血友病胚胎植入前遗传学诊断成功一例被引量：1
- 2014年
- 1临床资 育龄夫妇（女方29岁）因甲型血友病（HaemophiliaA）生育风险，于2011年11月1日到南京医科大学第一附属医院生殖医学科门诊咨询。女方弟弟患有甲型血友病，基因检测发现F8 c.3385 C＞T半合子突变，女方及其母亲为F8 c.3385 C＞T杂合突变携带者，家系图及突变位点见图1。
- 沈鉴东孙雪萍吴畏蔡令波崔毓桂刘嘉茵
- 关键词：植入前诊断胚胎移植产前诊断
- 21-羟化酶缺陷症导致睾丸发育不良的病例分析被引量：6
- 2018年
- 目的探讨21-羟化酶缺陷症与男性睾丸发育不良的关系。方法回顾分析8例男性不育患者的临床资料及其21-羟化酶基因的检测结果，总结其临床特征及治疗经验。结果8例患者均表现为小睾丸（单侧睾丸平均体积为6．1mL），精液分析提示为无精或严重少精症。性激素检测卵泡刺激素、黄体生成素明显低于正常，睾酮正常或偏高，孕酮明显升高，促肾上腺皮质激素正常或偏高，皮质醇正常或偏低。3例伴睾丸肾上腺残余肿瘤。CT检查提示肾上腺皮质增生，5例呈腺瘤改变，1例呈肾上腺髓脂肪瘤。所有患者均给予地塞米松替代治疗。治疗3～6个月后，6例出现精子或精子浓度升高，5例的配偶成功妊娠。在8例患者中，共发现7个已知致病突变。结论21一羟化酶缺陷症可导致男性睾丸不发育并损害生精功能，通过手术和地塞米松替代治疗可以取得良好的疗效。8例患者均为21-羟化酶基因复合杂合突变，均携带导致男性化表型的P．Ilel72Asn致病突变。
- 蒋波马定远陈欢欢杨晓玉崔毓桂许争峰刘嘉茵
- 关键词：先天性肾上腺皮质增生症21-羟化酶缺乏症睾丸发育不良
- 男性不育症伴成人型多囊肾患者ICSI治疗结局分析被引量：6
- 2015年
- 目的:成人型多囊肾(ADPKD)可引起少弱精子症和无精子症,从而导致男性不育症。本文总结ADPKD致男性不育症的临床特征与治疗方案,并比较其与先天性双侧输精管缺如(CBAVD)患者的卵细胞胞质内单精子注射(ICSI)及胚胎移植(ET)治疗结局。方法:回顾性分析了2009年4月至2014年1月我中心收治的21例ADPKD不育症患者临床数据,其中15例行ICSI治疗,严格匹配164例CBAVD不育症患者,比较两组第一周期ICSI数据如夫妇双方年龄,ICSI卵子数、受精率、可移植胚胎率、优质胚胎率、胚胎种植率、生化妊娠率、临床妊娠率、早期流产率、单胎率、双胎率。结果:15例行ICSI的ADPKD不育症患者经过28个ICSI周期,10例实现临床妊娠,其中活产7例,自然流产1例,持续妊娠2例。两组患者在男、女方年龄,女方BMI,ICSI卵子数,平均移植胚胎数等基本情况差别无统计学意义(P>0.05)。ADPKD不育症组与CBAVD对照组的ICSI受精率(72.64%vs76.17%)、可移植胚胎率(51.28%vs 63.24%)、优质胚胎率(38.46%vs 49.83%)、胚胎种植率(17.64%vs38.50%)、早期流产率(0%vs 9.23%)、单胎率(50%vs 81.54%)、双胎率(50%vs 18.46%)差别无统计学意义;生化妊娠率(13.33%vs 42.68%,P=0.023<0.05)、临床妊娠率(13.33%vs 39.63%,P=0.032<0.05)差别有统计学意义。结论:ICSI治疗ADPKD致男性不育症同样有效,但单个周期成功率较CBAVD患者低。其后代将会面临遗传风险,应在充分遗传咨询的情况下,遵从患者夫妇意愿选择治疗方案。
- 苏煌刘边疆杨晓玉宋宁宏殷长军张炜刘嘉茵
- 关键词：成人型多囊肾男性不育症卵细胞胞质内单精子注射
