上海市自然科学基金(03ZR14041)
- 作品数：4 被引量：4H指数：1
- 相关作者：王运伟朱正纲顾琴龙刘炳亚林言箴更多>>
- 相关机构：上海交通大学医学院附属瑞金医院上海第二医科大学附属瑞金医院更多>>
- 发文基金：上海市自然科学基金国家高技术研究发展计划更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 胃癌抗原相关基因MPS-1的融合表达及兔抗GST-MPS-1抗体的制备
- 2007年
- 目的在大肠杆菌中表达GST-MPS-1融合蛋白并制备兔抗GST-MPS-1抗体。方法将MPS-1全长cDNA克隆笔pGEX-5X载体内,转化大肠杆菌BL21,用IPTG诱导GST-MPS-1融合蛋白的表达。以分离纯化表达的蛋白免疫新西兰兔,制备抗GST-MPS-1抗体。用Western blotting和细胞免疫荧光染色法,检测兔抗GST-MPS-1抗体的特异性。结果经测序和酶切鉴定确认,MPS-1基因以正确的方式插入到载体中。此重组表达载体经IPTG诱导后,可高效表达相对分子质量(Mr)为36000的GST-MPS-1融合蛋白。以融合蛋白免疫兔获得的抗血清,经ELISA检测效价达到1×105。Western blotting和细胞免疫荧光染色证实,该多克隆抗体能与MPS-1蛋白特异性结合。结论兔抗MPS-1特异性抗体的获得,为进一步检测MPS-1蛋白的表达和功能分析奠定了基础。
- 王运伟朱正纲顾琴龙
- 关键词：胃癌肿瘤相关抗原融合蛋白多克隆抗体
- 肿瘤抗原NY-ESO-1研究进展
- 2005年
- 肿瘤抗原NY-ESO-1是肿瘤-睾丸(cancer-testis,CT)抗原,其编码基因是一基因家族,目前发现的主要包括NY-ESO-1、LAGE-1和ESO3三个成员。NY-ESO-1是迄今发现的最具免疫原性的肿瘤抗原之一,可以在NY-ESO-1表达阳性的肿瘤患者体内引起自发性体液免疫反应和T细胞免疫反应,因此在抗原特异性肿瘤免疫治疗中具有广泛的应用前景。
- 王运伟顾琴龙朱正纲
- 关键词：肿瘤抗原NY-ESO-1肿瘤免疫治疗
- 胃癌抗原相关基因MPS-1的融合表达及兔抗GST-MPS-1抗体的制备被引量：1
- 2006年
- 目的在大肠杆菌中表达GST-MPS-1融合蛋白并制备兔抗GST-MPS-1抗体。方法将MPS-1全长cDNA克隆至pGEX-5X载体内,转化大肠杆菌BL21,用IPTG诱导GST-MPS-1融合蛋白的表达。以分离纯化表达的蛋白免疫新西兰兔,制备抗GST-MPS-1抗体。用Western blot和细胞免疫荧光染色法,检测兔抗GST-MPS-1抗体的特异性。结果经测序和酶切鉴定确认,MPS-1基因以正确的方式插入到载体中。此重组表达载体经IPTG诱导后,可高效表达相对分子质量(Mr)为36000的GST-MPS-1融合蛋白。以融合蛋白免疫兔获得的抗血清,经ELISA检测效价达到1×105。Western blot和细胞免疫荧光染色证实,该多克隆抗体能与MPS-1蛋白特异性结合。结论兔抗MPS-1特异性抗体的获得,为进一步检测MPS-1蛋白的表达和功能分析奠定了基础。
- 王运伟朱正纲顾琴龙李建芳瞿颖刘炳亚林言箴
- 关键词：胃癌肿瘤相关抗原融合蛋白多克隆抗体
- 肿瘤抗原相关基因MPS-1在胃癌中的表达及其临床意义被引量：3
- 2005年
- 目的探讨肿瘤抗原相关基因MPS-1在胃癌组织和细胞中的表达及其临床意义。方法采用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)和Western印迹,检测42例胃癌组织及其相应正常黏膜组织以及AGS、MKN-45、SGC7901、KATOⅢ、N-87和SNU-16株胃癌细胞中MPS-1的表达情况。结果MPS-1mRNA在胃癌组织和细胞株中均有表达。MPS-1mRNA在胃癌组织中的表达水平为1.37±0.87,明显高于其在相应正常黏膜组织中的表达(0.99±0.67,P<0.01)。MPS-1的表达与肿瘤的临床分期相关,TNM分期为Ⅲ、Ⅳ期标本中的表达明显高于Ⅰ、Ⅱ期的标本(P<0.05);但与肿瘤患者的性别、年龄、肿瘤大小和分化程度无关。同时,MPS-1在6株胃癌细胞中的表达高于胃正常黏膜上皮细胞GES-1,RT-PCR与Western印迹结果一致。结论胃癌抗原相关基因MPS-1可能在胃癌的恶性转变中发挥一定的作用,为今后胃癌免疫治疗提供了又一新的靶点。
- 王运伟朱正纲刘炳亚顾琴龙李建芳瞿颖陈雪华林言箴
- 关键词：肿瘤抗原相关基因肿瘤抗原WESTERN印迹逆转录聚合酶链反应胃癌细胞黏膜上皮细胞
