国家自然科学基金(39800190)
- 作品数：7 被引量：341H指数：5
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- 相关机构：中南大学湖南医科大学更多>>
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- AFLP法构建人参、西洋参基因组DNA指纹图谱
- ＜正＞扩增片段长度多态性（amplified fragment length polymor-phisms,AFLP）是Vos于1995年在Zabeau基础上发展的用于构建DNA指纹图的新技术,该技术结合了RFLP和PC...
- 罗志勇周钢周肆清胡维新
- 文献传递
- 水稻基因图谱绘制成功对世界粮食和环境问题的意义被引量：3
- 2002年
- 我国科学家率先成功绘制出水稻基因组草图 ,在提供绿色基因资源、加速全球第二次绿色革命———基因革命的前进步伐 ,解决世界粮食安全问题和环境保护方面作出了重要贡献。
- 罗志勇胡维新
- 关键词：基因革命
- 人参植物高质量RNA的分离及其皂苷生物合成相关新基因GBR6的表达分析被引量：5
- 2004年
- 为从富含多糖的人参植物组织中分离出高质量的RNA,使用改进的两种异硫氰酸胍法,可从人参植物根组织中提取到较高产量和质量的总RNA。每克新鲜组织的RNA产量在80～110μg之间;经琼脂糖凝胶电泳分析,可见到28S和18SrRNA两条完整、清晰的条带;紫外分光光度法测得的A_(260)/A_(280)比值位于1.8～2.0。而且,使用该改良法分离的RNA,可广泛用于检测基因表达的RT-PCR与Northern印迹杂交分析以及cDNA文库构建等植物分子生物学研究。
- 罗志勇刘水平陈湘晖文斌陆秋恒罗建清熊德慧胡维新
- 关键词：RNA皂苷生物合成基因基因表达异硫氰酸胍法
- 抑制消减杂交(SSH)技术及在克隆基因方面的最新进展被引量：10
- 2001年
- 基因表达的变化是调控细胞生命活动的核心机制 ,分离并克隆差异表达基因已成为现代分子生物学研究的热点 ,亦是功能基因组学研究的重要内容之一。抑制消减杂交技术以其低假阳性率、高灵敏度等优点 。
- 陆秋恒罗志勇胡维新
- 关键词：抑制消减杂交差异表达基因基因克隆SSH
- 人参植物与皂苷生物合成相关的差减cDNA文库构建及基因差异表达分析被引量：21
- 2003年
- 应用抑制差减杂交技术,分别以源于4年和1年生人参根组织cDNA群体作为检测子(tester)与驱赶子(driver),成功构建了与人参植物皂苷生物合成相关的差减cDNA文库,并对从中筛选的阳性cDNA克隆进行DNA测序及其序列分析、PCR及Northern印迹杂交鉴定.结果显示,获得的13个克隆为新基因序列.其中6个差减克隆系人参植物根生长发育阶段差异表达基因.目前,6个差异表达新基因的结构与功能仍在进一步研究中.
- 罗志勇刘水平陆秋恒陈湘晖文斌罗建清胡维新
- 关键词：皂苷生物合成差减CDNA文库基因差异表达五加科人参属
- AFLP法构建人参、西洋参基因组DNA指纹图谱被引量：154
- 2000年
- 目的 采用扩增片段长度多态性DNA(AFLP)分子遗传标志技术 ,分析人参、西洋参基因组DNA多态性。方法 人参、西洋参干燥根基因组DNA ,经EcoRI/MseI酶切并与其相应的人工接头连接后 ,使用选择性引物进行PCR扩增。结果 经变性聚丙烯酰胺凝胶电泳检测 ,成功构建出多态性丰富和重复性好的人参、西洋参DNA指纹图谱。结论 AFLP法有望成为一种独立的切实可行的手段 ,将在人参、西洋参等药用植物的鉴定、生物进化、系统发育研究及指导道地性药材的科学栽培等方面发挥重要作用。
- 罗志勇周钢周肆清陈湘晖罗建清胡维新
- 关键词：人参西洋参DNA指纹图谱
- 高质量植物基因组DNA的分离被引量：93
- 2001年
- 为了从富含多酚和多糖的药用植物组织中分离出高质量基因组DNA ,本文通过改良几种已经存在的分离方法 ,获得了一种以CTAB法为基础的分离高质量完整DNA的简便、快速方法。使用该方法从人参、西洋参及三七的新鲜或干燥根组织分离DNA时 ,A2 60 /A2 80 为 1.8左右 ,分子量大小约为 2 1.2kb ,由此所得的DNA可直接用于AFLP分析 ,即用EcoRⅠ /MseⅠ消化DNA后 ,用DNA的限制酶切片段经T4DNA连接酶连接 ,再用巢式PCR扩增 ,构建出可重复的、多态性丰富的人参、西洋参、三七基因组DNAAFLP指纹图谱。结果表明 ,该技术可有效地从富含多酚和多糖的药用植物组织中分离出高质量和高分子量DNA ,此法亦有望用于其它植物DNA的分离。
- 罗志勇周钢陈湘晖陆秋恒胡维新
- 关键词：DNA分离CTAB法药用植物
