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陕西省自然科学基金(2004C2-45)

作品数:1 被引量:3H指数:1
相关作者:安群星徐志凯尹文吕欣韦三华更多>>
相关机构:第四军医大学更多>>
发文基金:陕西省自然科学基金国家自然科学基金更多>>
相关领域:医药卫生更多>>

文献类型

  • 1篇中文期刊文章

领域

  • 1篇医药卫生

主题

  • 1篇蛋白
  • 1篇蛋白表达
  • 1篇蛋白酶
  • 1篇丝氨酸
  • 1篇丝氨酸蛋白酶
  • 1篇杆菌
  • 1篇肝炎
  • 1篇肝炎病毒
  • 1篇氨酸
  • 1篇丙型
  • 1篇丙型肝炎
  • 1篇丙型肝炎病毒
  • 1篇病毒
  • 1篇肠杆菌
  • 1篇纯化
  • 1篇大肠杆菌
  • 1篇大肠杆菌中表...

机构

  • 1篇第四军医大学

作者

  • 1篇杨敬
  • 1篇雷迎峰
  • 1篇韦三华
  • 1篇吕欣
  • 1篇尹文
  • 1篇徐志凯
  • 1篇安群星

传媒

  • 1篇科学技术与工...

年份

  • 1篇2008
1 条 记 录,以下是 1-1
排序方式:
HCV NS3/4A丝氨酸蛋白酶在大肠杆菌中表达、纯化被引量:3
2008年
在大肠杆菌中HCV NS3/4A丝氨酸蛋白酶获得表达并进行纯化。根据NS3与NS4A两者形成异源二聚体的结构要求,并参照文献,通过基因拼接的方法设计了单链NS3/4A丝氨酸蛋白酶的基因。合成相应引物,利用反转录PCR从HCV患者血液中扩增出该蛋白酶的编码基因,克隆入原核表达载体pRSET-A,将重组表达质粒pRSET-A-ns3/4a转化BL211(DE3)大肠杆菌,并诱导表达与纯化。成功地构建了重组表达质粒pRSET-A-ns3/4a;重组质粒转化的BL21工程菌经IPTG诱导表达后,表达产物经SDS-PAGE和Western-blot证实为NS3/4A丝氨酸蛋白酶,并用镍离子亲和层析方法获得纯化蛋白酶。获得的纯化NS3/4A丝氨酸蛋白酶为建立其酶活性测定系统奠定了基础。
雷迎峰尹文杨敬吕欣韦三华安群星徐志凯
关键词:丙型肝炎病毒大肠杆菌蛋白表达
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