福建省科技重大专项(2011YZ0002-1)
- 作品数：2 被引量：4H指数：1
- 相关作者：林建华林金銮刘蔚楠蓝文彬张俐更多>>
- 相关机构：福建省微生物研究所福建中医药大学福建医科大学更多>>
- 发文基金：福建省科技重大专项更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- mTOR抑制剂FIM-A对人骨肉瘤细胞株MG-63的抑制作用及其机制被引量：4
- 2013年
- 目的:观察新型哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mammalia target of rapamycin,mTOR)抑制剂含磷西罗莫司衍生物FIM-A对人骨肉瘤MG-63细胞增殖及凋亡的影响。方法:不同浓度(1×10-9～1×10-5mol/L)FIM-A处理MG-63细胞后,采用CCK-8法检测MG-63细胞的增殖,流式细胞术检测MG-63细胞周期和凋亡情况,ELISA法检测血管内皮细胞生长因子(vascu-lar endothelial cell growth factor,VEGF)和低氧诱导因子(hypoxia inducible factor-1α,HIF-1α)的分泌量,RT-PCR和Western blot-ting分别检测FIM-A对MG-63细胞中mTOR、p70核糖体S6激酶(p70S6 kinase protein,p70s6k)及4E结合蛋白1(4E-bindingprotein 1,4E-BP1)mRNA和蛋白表达的影响。结果:与人成骨hF-OB1.19细胞相比,人骨肉瘤MG-63细胞中mTOR、p70s6k及4E-BP1 mRNA的表达水平明显升高(P<0.05)。FIM-A可有效抑制MG-63细胞的增殖(P<0.05),且呈剂量依赖性(r=0.940,P<0.01)。1×10-6mol/L FIM-A处理24 h后与对照组相比,G0/G1期MG-63细胞比例明显增加[(56.4±3.2)%vs(43.4±6.9)%,P<0.05],而MG-63细胞的凋亡率没有明显改变。不同浓度FIM-A作用24 h后,MG-63细胞中HIF-1α和VEGF表达均明显低于对照组(P<0.05),且具有剂量依赖性(HIF-1α,r=-0.988,P<0.01;VEGF,r=-0.998,P<0.01)。同时,FIM-A对MG-63细胞中mTOR(r=-0.919,P<0.01)、p70s6k(r=-0.843,P<0.01)及4EBP1(r=-0.818,P<0.01)蛋白的磷酸化也具有浓度依赖性抑制作用。结论:FIM-A能抑制人骨肉瘤MG-63细胞的增殖,并阻滞细胞周期于G0/G1期,其机制可能与影响mTOR信号通路蛋白磷酸化有关。
- 罗鸿斌刘蔚楠林建华程元荣张俐黄捷吴朝阳林金銮蓝文彬
- 关键词：MTOR抑制剂骨肉瘤MG-63细胞MTOR
- 糖类抗原125化学发光免疫定量检测试剂的研制与临床应用
- 2016年
- 为了研制肿瘤标志物糖类抗原125(CA125)化学发光免疫定量检测试剂,并分析其临床应用价值,将CA125单抗包被微孔板,以辣根过氧化物酶标记的CA125抗体为二抗,结合鲁米诺化学发光底物系统,建立CA125化学发光免疫定量检测方法。用CA125检测试剂国家参考品质控血清分析所建立方法的特异性、灵敏度、稳定性和精密性等试剂性能,并与进口的CA125定量检测试剂同时检测临床血清样本350例,比较检测结果。结果表明所研制的试剂性能符合CA125检测试剂国家参考品质量标准。批内变异系数2.8%~3.6%、批间变异系数3.7%;试剂盒置37℃孵育3d,其稳定性良好。临床样本比对检测结果表明,两种方法相关性良好(相关系数r = 0.9897,阴性符合率99.5%、阳性符合率99.3%,总符合率为99.4%,Kappa值为0.99,一致性强度为最强)。本文成功研制了快速、特异、敏感和稳定的肿瘤标记物CA125化学发光免疫定量检测试剂并建立其检测方法,适合临床检验推广应用。
- 戴志文戴振贤张剑清谢玉玲薛正翔吴玉水
- 关键词：糖类抗原125化学发光
