国家自然科学基金(81271460)
- 作品数：4 被引量：16H指数：3
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- 敲低小胶质细胞中过氧还原素6(PRDX6)降低氧糖剥夺再复氧神经元的存活被引量：4
- 2016年
- 目的观察敲低小胶质细胞中过氧还原素6(PRDX6)对氧糖剥夺再复氧(OGD/R)神经元存活的影响。方法小胶质细胞采用PRDX6-siRNA慢病毒感染,同时培养基中加入非Ca2+依赖性磷脂酶A2(i PLA2)活性抑制剂MJ33,24 h后与原代神经元共培养,并进行OGD/R处理。实验分为正常组、OGD/R组、阴性对照siRNA处理的OGD/R组、PRDX6-siRNA处理的OGD/R组、PRDX6-siRNA联合MJ33处理的OGD/R组。Western blot法检测小胶质细胞PRDX6蛋白的表达,实时定量PCR检测小胶质细胞PRDX6 mRNA的表达。ELISA检测i PLA2活性;MTS、乳酸脱氢酶(LDH)法检测神经元的存活率;采用比色法检测超氧化物歧化酶(SOD)和丙二醛(MDA)含量以反映神经元的氧化应激水平。结果与OGD/R组比较,PRDX6-siRNA处理的神经元存活率降低,MDA增加、SOD降低、氧化应激损伤加重;与PRDX6-siRNA组比较,同时加入i PLA2活性抑制剂MJ33组神经元存活率增加,MDA降低、SOD增加、氧化应激水平下降。结论小胶质细胞PRDX6对神经元氧糖剥夺损伤有保护作用,而i PLA2活性对PRDX6的作用有影响。
- 谭丽赵涌姜蓓蓓杨波张徽
- 关键词：氧糖剥夺小胶质细胞神经元
- Peroxiredoxin 6在脑缺血再灌注损伤中的抗氧化和抗凋亡作用被引量：5
- 2016年
- 目的:探讨Peroxiredoxin 6(Prdx6)在脑缺血再灌注损伤中的影响及相关机制。方法:采用中脑动脉栓塞(middle cerebral artery occlusion,MCAO)模型诱导SD大鼠左侧脑皮质缺血再灌注,将大鼠随机(n=16)分为假手术组、MCAO组、Scramble组和Prdx6-si RNA组:前两组均不进行侧脑室注射,其中Sham组仅做手术切口,不插入线栓,MCAO组进行手术造模;后2组分别侧脑室注射8μl的乱序Prdx6-si RNA和Prdx6-si RNA再手术建模。测定各组神经功能学评分、脑含水量和脑梗死体积;HE和亚甲蓝染色法检测大脑皮质缺血再灌注区神经元的损伤情况;免疫印迹法检测脑组织中Prdx6及Caspase3蛋白的表达水平;最后,检测SOD、MDA活性并用TUNLE染色法探讨相关氧化、凋亡机制。结果:Prdx6-si RNA组与MCAO组相比,神经功能学评分、缺血侧脑含水量和脑梗死体积均明显增加(P=0.000);HE和亚甲蓝染色显示脑缺血区神经元损伤进一步加重(P=0.000);SOD活性进一步降低(P=0.000),MDA含量进一步增加(P=0.000);TUNLE染色阳性细胞率(P=0.000)和Caspase3蛋白表达水平(P<0.01)均进一步增高。而Scramble组与MCAO组比以上各指标均无明显统计学差异。结论:Prdx6在脑缺血再灌注损伤中起保护作用,此作用与其抗氧化和抗凋亡机制有关。
- 姜蓓蓓谭丽姚辉喻姗姗赵涌王顺和
- 关键词：RNA脑缺血再灌注抗凋亡
- DJ-1通过Nrf2信号通路减轻大鼠脑缺血-再灌注引起的氧化应激损伤被引量：6
- 2021年
- 目的探讨DJ-1(Park7)在脑缺血再灌注损伤中的抗氧化作用及相关机制。方法构建SD大鼠大脑缺血再灌注损伤模型,将SD大鼠随机分为假手术组、MCAO组、Scramble组和DJ-1 siRNA组、NC组和Overexpression组。通过DJ-1 siRNA干扰片段干扰DJ-1的表达,以及DJ-1过表达腺相关病毒载体过表达DJ-1的表达。通过测定MCAO/R后各组神经功能学评分和脑含水量,同时应用HE和Nissl染色法评估脑组织的形态学变化和皮层梗死区神经元的损伤情况,评价DJ-1对大鼠脑缺血再灌注损伤的神经保护作用。用超氧化物歧化酶(SOD)和丙二醛(MDA)分析脑组织氧化应激状态。免疫印迹法检测脑组织中DJ-1,Nrf2,HO-1以及NQO1的表达水平,以及免疫荧光染色法观察Nrf2的表达及核转位情况,探讨DJ-1减轻大鼠脑缺血再灌注氧化应激损伤的可能机制。结果与MCAO组相比,DJ-1 siRNA组的神经功能学评分(P<0.001)、脑含水量(P<0.001)均明显增加;HE和Nissl染色显示脑缺血区神经元损伤进一步加重;SOD含量进一步降低,MDA含量进一步增加(P<0.001);干扰DJ-1后,其蛋白水平明显降低(P=0.003),同时Nrf2及其下游的HO-1和NQO1也明显降低(P<0.001)。而过表达DJ-1以后,其DJ-1(P=0.006)、Nrf2(P=0.006)及其下游的HO-1(P=0.004)和NQO1明显增加(P=0.014)。结论DJ-1作为体内重要的神经保护因子,可以减少大鼠脑缺血再灌注氧化应激损伤,并可能是通过激活Nrf2信号通路来实现的。
- 李莉彭莉朱进巫静娴赵涌
- 关键词：DJ-1脑缺血-再灌注氧化应激
- Sulfiredoxin-1对大鼠星形胶质细胞缺血损伤的保护作用被引量：3
- 2015年
- 目的探讨小分子蛋白Sulfiredoxin-1(Srxn1)对大鼠星形胶质细胞缺血损伤的保护作用以及Srxn1是否参与活化NF-κB炎症信号通路的分子机制。方法通过H2O2处理、氧糖剥夺/复氧(oxygen-glucose deprivation followed by recovery,OGD/R)模型,模拟体内脑缺血再灌注损伤;通过慢病毒载体片段Lenti-Srxn1-sh1和Lenti-Srxn1-sh2干扰Srxn1的表达,采用MTT法检测两种损伤模型中细胞的存活率,采用双荧光免疫细胞化学法检测NF-κB入核情况,Western blot检测p-NFκB p65、MIF的蛋白表达。结果在H2O2和OGD/R模型中,两组慢病毒干扰片段均可以降低Srxn1蛋白的表达。与Control组比较,干扰Srxn1基因能够明显降低细胞存活率,增加NF-κB p65入核,使p-NFκB p65和巨噬细胞游走抑制因子(macrophage migration inhibitory factor,MIF)蛋白表达显著增加,差异具有统计学意义(P<0.05)。结论 Srxn1作为体内重要的神经保护因子,可以减少大鼠星形胶质细胞缺血性损伤的作用机制之一可能是与其激活NF-κB信号通路相关。
- 喻姗姗刘远玲陈曦周云川周杨巫静娴赵涌
- 关键词：星形胶质细胞神经保护NF-ΚB巨噬细胞游走抑制因子
