国家自然科学基金(30770295)
- 作品数:2 被引量:4H指数:1
- 相关作者:王伟许静张鹏幸卢剑功聂宇更多>>
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- 发文基金:国家自然科学基金教育部科学技术研究重点项目山西省自然科学基金更多>>
- 相关领域:环境科学与工程生物学更多>>
- 游仆虫EoRab2a蛋白的表达、纯化及定位分析
- 2011年
- Rab GTPase家族蛋白是真核细胞内膜系统转运途径中重要的调控因子,不同的Rab家族成员在细胞具有功能多样性。为了解Rab2的功能,八肋游仆虫EoRab2a基因连接入原核表达质粒pGEX-6P-1中,获得重组表达质粒pGEX-6P-1-EoRab2a。质粒pGEX-6P-1-EoRab2a转化大肠杆菌BL21(DE3),经IPTG诱导,大肠杆菌BL21(DE3)/pGEX-6P-1-EoRab2a高效表达了可溶性GST-EoRab2a蛋白。融合蛋白GST-EoRab2a经亲和层析获得电泳纯蛋白。纯化后的GST-EoRab2a免疫BALB/c小鼠制备多克隆抗体。ELISA和Western blotting检测显示制备的抗体效价1∶25600,特异性良好。免疫荧光定位表明EoRab2a在游仆虫细胞质中点状分布,推测参与内质网与高尔基体间膜泡转运。
- 许静李江姣聂宇梁爱华王伟
- 关键词:八肋游仆虫原核表达纯化免疫荧光定位
- 八肋游仆虫组蛋白H4A和H4B的克隆及分析
- 染色质作为真核生物遗传信息的载体,其基本结构与功能单位是核小体。组蛋白作为核小体的基本组分,是染色质的结构和功能必需的。组蛋白的变体和修饰共同参与染色质修饰和基因的表达调控。真核生物细胞中的5种组蛋白在进化中高度保守,然...
- 杨旭霞王伟
- 关键词:八肋游仆虫克隆转录
- 文献传递
- 含荧光素酶四膜虫B2086-LUC全细胞生物传感器的构建及其对重金属离子的响应被引量:4
- 2013年
- 为了获得可用于快速检测环境中重金属污染的全细胞生物传感器,本研究将含有HA标签的萤火虫荧光素酶(LUC)基因重组到含有四膜虫金属硫蛋白MTT1启动子和微管蛋白终止子序列的载体pBX中,获得重组质粒pBX-LUC,用基因枪粒子轰击法将pBX-LUC转化入四膜虫细胞中,通过同源重组和巴龙霉素抗性筛选,LUC基因整合到四膜虫大核基因组MTT1位点,获得含有LUC基因的细胞株B2086-LUC.B2086-LUC对重金属镉和汞的响应敏感,可检测的最低浓度为5-10ng/mL;对铜和锌的响应较弱,可检测的最低浓度为0.5-1mg/mL.因此,四膜虫B2086-LUC可作为环境中镉和汞污染快速检测的全细胞生物传感器.
- 张鹏幸许静卢剑功王伟
- 关键词:萤火虫荧光素酶嗜热四膜虫汞生物传感器