国家自然科学基金(81072334)
- 作品数:2 被引量:1H指数:1
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- FB1经由PXR介导肝细胞中PP2A-B56γ抑制和诱导细胞毒性
- 目的:黄曲霉毒素B1(AFB1)作为常见于食物中的环境污染物,其靶向肝脏发挥毒性作用:除了慢性致癌作用,AFB1急性暴露引起的肝细胞毒性损伤受到关注。本研究拟探讨AFB1诱导肝细胞毒性作用中孕烷X受体(PXR)介导的蛋白...
- 夏斌廖昆张玉静庄群瑛邱杨骆冰何承勇林育纯林忠宁
- 关键词:肝细胞毒性
- 文献传递
- 核因子I-B高表达对肝L02细胞中蛋白磷酸酶2A-B55δ靶向调控研究
- 2013年
- 目的构建核因子I-B基因(NFIB)真核表达重组质粒,应用于其高表达调控肝细胞中蛋白磷酸酶2A(PP2A)的B亚基基因转录的功能学验证。方法逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)获得人NFIB mRNA片段,克隆入真核绿色荧光蛋白表达载体(pEGFP-N1),构建pEGFP-NFIB重组质粒后,分别给予250、500、1 000 ng转染永生化人正常肝L02细胞建立NFIB高表达细胞模型(相应设为250、500和1 000 ng剂量组),对照组为250 ng pEGFP-N1转染的L02细胞,荧光定量聚合酶链反应检测NFIB mRNA,激光共聚焦和免疫印迹法(WB)检测核因子-1(NF-1)蛋白水平。电泳迁移率实验分析与NF-1相结合的DNA序列的特异性,荧光素酶报告基因检测PP2A-B55δ亚基基因(PPP2R2D)启动子区的转录活力,RT-PCR和WB检测细胞内PPP2R2D mRNA和PP2A-B55δ蛋白水平。结果双向测序证实pEGFP-NFIB重组表达质粒构建成功。与对照组比较,各剂量组L02细胞中NFIB mRNA相对水平增高(P<0.01),增强型绿色荧光蛋白、NFI-B蛋白表达水平均升高(P<0.05)。NF-1可与PPP2R2D基因启动子区(2R2Dp)-462G>A不同多态性序列结合,NFIB高表达使L02细胞中2R2Dp-462G启动子活力下降(P<0.05),PPP2R2D mRNA和PP2A-B55δ蛋白水平均升高(P<0.05)。结论成功构建人NFIB真核表达重组质粒,应用于人肝细胞中证实NF-1靶向PPP2R2D的功能学调控作用。
- 麦剑荣林育纯陈慧峰陈宇曦夏斌廖昆张玉静高艳芳林忠宁
- 关键词:蛋白磷酸酶2A
- 环境-致癌过程相关基因启动子区多态性及其单体型的功能分析
- 背景:目的基因非编码区存在的遗传变异(genovariants)可通过影响转录因子或与靶向序列的结合,对目的基因的转录和表达起调控作用,特别是调控区基因多态性(regulatory polymorphisms)的功能学作...
- 林忠宁
- 关键词:基因多态性单体型功能分析致癌作用
- 文献传递
- DEHP对人肝L02细胞毒性作用及其核因子-κB机制研究
- 1.引言邻苯二甲酸酯类(PAEs)化合物是一类包含有多种成分的持久性环境污染物;其中邻苯二甲酸二-(2-乙基)乙酯(DEHP)是使用最广泛的PAEs增塑剂。研究表明DEHP可导致多种有害效应,包括肝、肾毒性,睾丸毒性,但...
- 胡耀明陈宇曦李晓杰陈慧峰麦剑荣夏斌张玉静廖昆林育纯林忠宁
- 广东汉族人群PP2A-Aα亚基基因5'-侧翼区多态性的单体型分析
- 目的探讨中国广东汉族人群蛋白磷酸酶2A(PP2A)-Aα亚基PPP21A基因5'-侧翼区多态性的连锁不平衡(LD)和人群单体型分布特征。材料与方法采用Haploview软件分析筛查到的PPP2R1A基因5'-侧翼区中7个...
- 陈慧峰林育纯林丽娜李文罗洁张树江万建新陈雯林忠宁
- 文献传递
- 孕烷X受体诱导活化参与PP2A不同亚基基因转录调控
- 目的 探讨孕烷X受体(PXR)作为转录因子对PP2A不同亚基基因的转录调控作用及其对外源化学物诱导肝细胞毒性转归的影响.方法 采用人肝L02细胞转染NR1/2基因构建PXR稳定高表达的L02-PXR细胞,以L02-pB空...
- 高艳芳廖昆张玉静夏斌殷花何承勇林忠宁林育纯
- 关键词:转录调控
- 倍半萜烯内酯化合物干预对人鼻咽癌细胞株中干性侧群细胞的影响
- 目的探讨倍半萜烯内酯(SLs)类化合物对人鼻咽癌(NPC)细胞中癌干细胞(CSC)的影响。方法人鼻咽癌高分化CNE1L和低分化CNE2L细胞株为靶细胞,实时定量PCR和蛋白免疫印迹检测细胞中cox-2mRNA和COX-2...
- 李晓杰林育纯林丽娜陈慧峰胡耀明陈雯黄奕俊林忠宁
- 文献传递
- 广东汉族人群蛋白磷酸酶2A-B55α亚基基因(PPP2R2A)5'侧翼区多态性的分析
- 目的探讨蛋白磷酸酶2A(PP2A)-B55α亚基基因PPP2R2A启动子区的多态性及其在特定人群中分布规律。方法随机选取广东健康汉族人群的全基因组DNA样本,PCR获得PPP2R2A基因5'-侧翼区-1707nt~+30...
- 林育纯林丽娜张骁陈慧峰万建新罗洁李晓杰陈宇曦李文张树江胡耀明林忠宁陈雯
- 关键词:多态性
- 文献传递
- 锌影响镉对体外诱导未成熟人树突状细胞的毒性作用
- 目的探讨锌对镉化合物诱导人未成熟树突状细胞(iDC)毒性作用的影响。方法分离人外周血单核细胞,体外诱导获得iDC;分别给予生理盐水(对照组),氯化镉(CdCl组);硫酸锌(ZnSO组);硫酸锌预处理后给予氯化镉(Zn+C...
- 李文林育纯陈慧峰罗洁李晓杰林丽娜胡耀明张树江陈雯林忠宁
- 关键词:树突状细胞镉免疫毒性锌
- 文献传递
- 孕烷X受体参与DEHP介导PPP2R5C基因5'-侧翼区多态性功能的调控
- 目的:蛋白磷酸酶2A(PP2A)通过对毒理学信号通路中关键调控蛋白的去磷酸化作用,参与外源化学物诱导细胞毒性的过程。邻苯二甲酸酯类(DEHP)暴露诱导的毒性危害受到关注;我们前期发现DEHP可诱导核受体(NRs)超家族成...
- 林育纯陈慧峰高艳芳张玉静廖昆何承勇林忠宁
- 关键词:基因启动子区多态性