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广东省自然科学基金(9151802904000002)
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2
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赵良运
赵亮
涂响安
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肾癌特异性配体多肽ZT-2筛选及新标志物的研究
2009年
目的寻找肾癌早期诊断和靶向治疗的标志物。方法以肾癌细胞株A498为靶细胞,正常肾细胞株HK-2为吸附细胞,37℃下对噬菌体十二肽库进行4轮减性筛选。挑取单克隆采用ELISA方法初步鉴定噬菌体克隆亲和力;阳性克隆提取质粒,测序后合成多肽,鉴定多肽的亲和力及特异性。结果经ELISA初步鉴定,随机挑选20个单克隆中,2号多肽对A498细胞亲和力最高(AZT-2/AN月比值为3.15),命名为Phage-ZT-2。细胞免疫荧光试验证明,合成的相应多肽FITC-ZT-2对A498细胞具有特异性结合。利用荧光标记的ZT-2检测肾癌组织芯片,肾癌组织ZT-2的荧光吸光度(A)值为0.453±0.123,正常组织及非肾癌炎性组织为0.148±0.075,2组间比较差异有统计学意义(t=2.776,P〈0.01)。结论成功筛选出与肾癌细胞特异性结合的多肽ZT-2,为肾癌的早期诊断和靶向治疗提供了实验依据。
涂响安
臧林泉
赵亮
邓立文
王文卫
赵良运
梁辉
曾令友
庄锦涛
关键词:
肾肿瘤
药物筛选试验
抗肿瘤
阻滞真核细胞起始因子-4E对膀胱癌细胞乙酰肝素酶表达的影响
被引量:2
2012年
目的探讨膀胱癌细胞真核细胞起始因子-4E(eIF4E)与乙酰肝素酶表达的关系。方法脂质体包裹eIF-4E于mRNA翻译起始点互补的反义寡核苷酸(asODN)及相应对照的正义寡核苷酸(sODN)以100、200pmol/L两种浓度分别转染膀胱癌EJ细胞,逆转录-聚合酶链反应(RT—PCR)检测eIF4E转录水平的改变。荧光定量PCR和Westernblot分别检测乙酰肝素酶mRNA及蛋白表达。结果asODN转染显著抑制eIF4E基因水平。eIF-4E被阻滞后,乙酰肝素酶mRNA水平及蛋白表达量:asODNl组(0.276±0.050、0.255±0.028)及asODN2组(0.195±0.022、0.160±0.032),均显著低于空白对照组(0.896±0.057、0.603±0.029)及sODN1组(0.867±0.099、0.572±0.029)和sODN2组(0.879±0.087、0.560±0.035,P〈0.01)。结论asODN转染膀胱癌EJ细胞可以阻滞eIF-4E基因表达,阻滞eIF-4E后,膀胱癌乙酰肝素酶mRNA水平及蛋白表达均明显降低。
庄锦涛
涂响安
王文卫
赵良运
赵亮
丘少鹏
邓春华
胡斌
关键词:
膀胱癌
真核细胞起始因子4E
乙酰肝素酶
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