湖北省自然科学基金(2012FFB07407)
- 作品数:2 被引量:2H指数:1
- 相关作者:刘学群程钢王春台刘洋李林鹏更多>>
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- 水稻vdac3基因超表达载体的构建和遗传转化
- 2013年
- 以构建水稻osvdac3基因超表达载体并获得超表达的转基因水稻植株为目标,通过PCR扩增将水稻osvdac3基因的全长片段克隆到植物表达载体,构建CaMV35S∷osvdac3∷rfp植物超表达载体。并以水稻YTB品种作为其遗传转化的受体,通过农杆菌介导的愈伤组织侵染法进行水稻遗传转化。结果表明,利用该方法成功构建了水稻osvdac3基因超表达载体,在此基础上获得了多个osvdac3基因超表达的水稻植株,并使用RT-PCR技术分析了阳性植株中osvdac3基因的表达水平。该研究结果为进一步研究水稻osvdac3基因蛋白的功能奠定了基础。
- 李林鹏王春台周杰刘学群程钢
- 关键词:水稻
- 水稻VDAC3蛋白的可溶性外源表达及纯化被引量:2
- 2014年
- [目的]获得外源表达的可溶性水稻VDAC3蛋白。[方法]将osvdac3基因克隆到含有GST标签的pGEX-4T-1原核表达载体中,转化入BL21表达菌株,经IPTG诱导,并使用SDS-PAGE和Western Blot检测分析表达产物,通过Glutathione Resin亲和层析系统纯化获得较纯的目的蛋白。[结果]试验成功构建了pGEX-4T-1-osvdac3原核表达载体并转化大肠杆菌。通过SDS-PAGE和Western Blot试验证实56 kD处的蛋白条带是具有可溶性表达的VDAC3蛋白。[结论]经Glutathione Resin亲和层析系统纯化得到可溶性带GST标签的VDAC3蛋白。该研究结果为水稻VDAC蛋白的功能研究进一步奠定了基础。
- 刘洋王春台刘学群程钢
- 关键词:原核表达