湖南省科技厅攻关项目(06NK3049)
- 作品数：5 被引量：13H指数：3
- 相关作者：肖调义许宝红刘巧林章怀云苏建明更多>>
- 相关机构：湖南农业大学中南林业科技大学澳大利亚国立大学更多>>
- 发文基金：湖南省科技厅攻关项目国家自然科学基金湖南省教育厅重点项目更多>>
- 相关领域：生物学农业科学更多>>
- 大鲵Dmrt2基因cDNA的克隆与表达分析被引量：1
- 2012年
- Dmrt2是参与性腺发育最古老的发育基因家族Dmrt家族成员之一,在维持胚胎组织的正常发育、精子的发生、神经系统和感觉器官发育等方面起重要作用。目前在哺乳动物人类、鸟类红原鸡以及水生动物青鳉中都克隆到Dmrt家族成员并证明其与性腺和生长发育的密切相关性。研究采用RACE方法克隆了大鲵Dmrt2基因全长cDNA序列共2 026 bp,开放阅读框长1 581 bp,5′非编码区长58 bp,3′非编码区长387 bp,基因序列提交GenBank的登录号为FJ859987。该基因编码蛋白含526个氨基酸,依生物信息学方法预测该氨基酸为非跨膜蛋白,无信号肽,定位在细胞质内,无分泌蛋白。CDD数据库分析该ORF框翻译的氨基酸,在93~146位含DM保守结构域（c102557）的两个成员pfam00751和smart003010,与哺乳类人mab-3、鸟类红原鸡Dmrt2、两栖类非洲爪蟾Dmrt2和水生类鲐mab-3 DM结构域存在I（异亮氨酸）、R（精氨酸）、M（甲硫氨酸）、T（苏氨酸）、C（半胱氨酸）5个氨基酸的变异;系统进化树分析表明：大鲵Dmrt2与以上四物种首先聚类,据此推测Dmrt基因在进化上高度保守,DM结构域上5个氨基酸的变异对蛋白功能的发挥可能无重要影响。实时荧光定量组织差异表达显示,Dmrt2基因在大鲵的精巢和肌肉组织中高表达,预示该基因可能在性腺发育和生长发育方面起重要作用。
- 许宝红肖真明肖调义陈开健刘巧林周伟刘敏姚一彬
- 关键词：实时荧光定量PCR
- 三角帆蚌精氨酸酶基因的cDNA克隆与组织表达分析被引量：4
- 2011年
- 精氨酸酶(Arginase,Arg)是生物体尿素循环当中一种标志性的酶类,它不但与生物体许多疾病相关,而且是目前用于治疗肿瘤和癌症的一种重要的工具酶。根据三角帆蚌消减杂交cDNA文库获得的EST序列,运用cDNA末端快速扩增(Rapid amplification of cDNA ends,RACE)技术获得三角帆蚌精氨酸酶基因的全长cDNA序列。生物信息学方法分析表明精氨酸酶基因cDNA序列长1720 bp,开放阅读框(65—1072)1008 bp,编码335个氨基酸,5′端非编码区为64 bp,3′端非编码区为648 bp,软件推测其编码蛋白相对分子量为36.81 kD。研究采用实时荧光定量PCR(quantitative real-time PCR,qPCR)方法分析该基因在不同组织中的表达规律,结果表明,该基因在肝脏、胃、肠、鳃、心脏、外套膜、斧足共7个组织中都有表达,但主要集中在肝脏、胃和肠消化器官中表达。这可能说明低等的无脊椎动物三角帆蚌的精氨酸酶兼具有Ⅰ型和Ⅱ型精氨酸酶的特征和功能,既可以参与尿素循环,又可以在生理和病理过程中发挥重要作用,但还需进一步验证。
- 刘巧林许宝红肖调义刘敏钟蕾苏建明
- 关键词：三角帆蚌精氨酸酶RACE
- 三角帆蚌细胞色素P450基因的克隆与表达分析被引量：5
- 2012年
- CYP是一类以血红素为辅基的末端加氧酶,广泛存在于人、动物、植物和微生物之中,参与许多外源性物质（药物、毒物和环境污染物质等）和内源性物质（激素、脂肪酸等）的代谢,在碳源同化、激素合成、外源物质降解和致癌物质消除等方面发挥重要作用,
- 肖调义刘巧林郭小泽章怀云崔树良许宝红钟蕾
- 关键词：细胞色素P450CDNA克隆半定量RT-PCR三角帆蚌
- 三角帆蚌肝脏瘟病感染期抑制性消减cDNA文库的构建与分析被引量：5
- 2009年
- 采用抑制性消减杂交技术构建了三角帆蚌肝脏瘟病感染期抑制性消减cDNA文库。经检验，差异表达基因均被富集了2^10倍左右，证明构建的cDNA消减文库具有很强的消减效率。PCR鉴定发现，在随机挑取的阳性克隆中，95％的克隆均含有0．2～1．0kb的插入片段，这些片段可能是三角帆蚌瘟病病毒感染后差异表达基因的cDNA片段。测序共获得214个有效cDNA序列，分别属于8大类，共98个基因。其中细胞分裂基因2个、细胞结构与运动基因9个、代谢基因10个、信号传导基因7个、细胞防疫基因10个、基因与蛋白表达基因20个、未知功能蛋白基因26个，GenBank中找不到任何同源序列的基因14个。结果说明，构建的差异表达cDNA文库，可较好地反映三角帆蚌瘟病病毒对三角帆蚌影响的基因信息。
- 肖调义葛熹凯许宝红苏建明章怀云
- 关键词：三角帆蚌肝脏抑制性消减杂交
- 瘟病病毒感染对三角帆蚌主要消化器官的影响被引量：1
- 2009年
- 通过人工感染实验,在感染三角帆蚌瘟病病料组织后第3、5、7、9、11d,运用光学显微镜和电子显微镜分别观察了三角帆蚌(Hyriopsis cumingii)主要消化器官的病理变化特征。结果表明,三角帆蚌瘟病病毒(H.cumingiiPlague Virus,HcPV)严重破坏了三角帆蚌消化器官的结构。主要消化腺肝损伤最为严重:光镜下,攻毒7d内腺管肿大,管腔缩小,7d后腺管细胞空泡化并形成多核体;电镜下,线粒体、内质网等细胞器结构破坏,病毒粒子增殖速度快。消化道的病理变化主要表现为胃、肠结构的破坏,胃肠基本结构及感染病毒后的病理变化相似:光镜下,攻毒7d内胃肠结构变化不大,7d后柱状细胞肿大,纤毛脱落,并伴有上皮细胞的脱落;电镜下,细胞器结构破坏,甚至空泡化,病毒粒子前期增殖较慢,后期增殖较快,但总体增殖速度比肝慢。
- 肖调义刘巧林章怀云钟蕾葛熹凯许宝红苏建明
- 关键词：三角帆蚌消化腺消化道组织病理学
- 三角帆蚌细胞色素P450基因的克隆与表达分析
- 根据三角帆蚌(Hyriopsis cumingi)消减杂交cDNA文库获得的EST序列,运用cDNA末端快速扩增(rapid amplification of cDNA ends,RACE)获得三角帆蚌细胞色素P450(...
- 肖调义刘巧林郭小泽章怀云崔树良许宝红钟蕾
- 关键词：细胞色素P450CDNA克隆半定量RT-PCR三角帆蚌
- 文献传递
