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小鼠胚胎生殖细胞系的建立及其印记状态: 2013年; 目的成功建立小鼠胚胎生殖细胞(EGCs)系,并初步分析小鼠胚胎生殖细胞的印记状态。方法建立交配后12.5d(12.5dpc)原始生殖细胞(PGCs)来源的小鼠EGCs,通过碱性磷酸酶(AKP)染色、免疫荧光细胞化学、体内分化及体外分化等方法检测EGCs的多能性,并以小鼠胚胎干细胞(ESCs)为对照,应用Real-time PCR检测EGCs中与发育相关的Ins2、Lgf2、H19、Lgf2r等11个父源与母源印记基因的表达情况。结果成功建立小鼠EG细胞系,EGCs克隆AKP染色显示有高水平的AKP活性,免疫荧光细胞化学方法显示克隆表达小鼠ESCs多能性标记物Oct4及细胞表面标记SSEA-1。核型分析检测显示,小鼠EGCs为正常的40条染色体,体内可分化出3个胚层来源的组织,说明小鼠EGCs具有多能性;Real-time PCR结果显示EGCs的印记基因表达量显著高于ESCs。结论12.5dpc PGC来源的EGCs的印记基因处于擦除状态。; 胡静赵巧湜古艳丽白光宇吴稀雷蕾; 关键词：胚胎生殖细胞印记基因实时定量聚合酶链反应小鼠

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黑龙江省研究生创新科研项目(YJSCX2011-321HLJ)