中国农业科学院北京畜牧兽医研究所基本科研业务费(2014ywf-zd-2)
- 作品数：8 被引量：69H指数：5
- 相关作者：杨青川康俊梅张铁军龙瑞才晁跃辉更多>>
- 相关机构：中国农业科学院北京畜牧兽医研究所内蒙古农业大学南京农业大学更多>>
- 发文基金：中国农业科学院北京畜牧兽医研究所基本科研业务费国家科技支撑计划国家牧草产业技术体系建设项目更多>>
- 相关领域：农业科学生物学更多>>
- 紫花苜蓿MsHSP17.7基因的克隆及功能分析被引量：4
- 2016年
- 热激蛋白是一类普遍参与抗逆的保护性蛋白,在植物生长发育及逆境调控中起重要作用。为了解紫花苜蓿(Medicago sativa L.)热激蛋白基因特性及功能,本研究通过同源克隆法获得热激蛋白基因MsHSP17.7,该基因包含477bp开放阅读框,编码158个氨基酸,蛋白分子量为17.67kDa。序列比对发现MsHSP17.7与截形苜蓿(Medicago truncatula)和豌豆(Pisum sativum)中的2个小分子热激蛋白同源性较高,相似度分别是93.38%,83.13%。组织差异性表达显示,MsHSP17.7在茎中表达最多,叶和花次之,在根中最少;实时定量PCR分析显示,MsHSP17.7受高温、高盐诱导表达,在过氧化诱导下表达量变化不明显。对T3代转基因拟南芥(Arabidopsis thaliana)实时定量PCR分析显示,该基因在高盐和过氧化胁迫下均能大量表达,结果表明MsHSP17.7基因可能参与了高盐与过氧化逆境下的胁迫应激调控。
- 栗振义龙瑞才张铁军杨青川康俊梅
- 关键词：紫花苜蓿热激蛋白实时定量PCR非生物胁迫
- 拟南芥NCED4基因的克隆及初步功能鉴定被引量：2
- 2014年
- 以拟南芥为试材,采用PCR及DNA重组技术,从野生型拟南芥中克隆出NCED4基因,并构建植物表达载体pBI-NCED4,最终获得具有卡那霉素抗性的转基因拟南芥植株,研究NCED4基因超表达对植物体的影响,并对其中4个再生植株进行PCR和荧光定量RT-PCR分析。结果表明:目的基因转入拟南芥基因组中,并在转基因拟南芥中成功过量表达;NCED4基因受外源激素的影响较为敏感,其作用可能与激素的调控有关。
- 郭涛晁跃辉杨青川金洪张铁军康俊梅
- 关键词：拟南芥脱落酸
- 紫花苜蓿MsHST基因克隆及拟南芥转化被引量：4
- 2016年
- 运用RT-PCR法从紫花苜蓿(Medicago sativa)中成功克隆出长度约1100bp的尿黑酸法呢基转移酶基因MsHST,采用qRT-PCR的方法,分析MsHST基因的表达特征,结果显示MsHST在所有组织中均有表达,但在叶片中表达量最高,根中最低;随叶片的衰老,表达量降低。且构建了超表达载体pBI-MsHST,并获得拟南芥(Arabidopsis thaliana)转基因植株,经PCR,RT-PCR和GUS染色检测转基因植株,初步证实目的基因在拟南芥中表达。
- 李奕稹晁跃辉康俊梅杨青川金洪
- 关键词：紫花苜蓿拟南芥转基因
- 紫花苜蓿MsARGOS基因的克隆及对拟南芥的转化被引量：6
- 2014年
- 利用RT-PCR技术在紫花苜蓿中克隆出拟南芥ARGOS同源基因,命名为MsARGOS,MsARGOS基因编码区长234bp,编码77个氨基酸。通过DNA重组技术将其与载体pBI121连接,成功构建了植物表达载体35Spro::MsARGOS,并采用花序侵染法对拟南芥的腋生花序进行侵染,获得具有卡纳抗性的转基因植株,通过PCR和RT-PCR技术检测证明,目的基因已整合入拟南芥基因组中并能够成功表达。
- 王梦颖晁跃辉丛丽丽杨青川康俊梅张铁军
- 关键词：紫花苜蓿拟南芥
- 紫花苜蓿盐诱导HD-Zip类转录因子MsHB2的克隆及功能分析被引量：18
- 2014年
- 【目的】在已有的一条紫花苜蓿(Medicago sativa L.cv.Zhongmu-1)盐诱导未知基因的EST序列基础上,克隆其(MsHB2)全长序列并分析其功能,以进一步了解其在紫花苜蓿中的耐盐调控机理。【方法】以先前获得的EST序列为基础设计引物,使用RACE法从紫花苜蓿中克隆得到MsHB2的3′和5′末端序列,经DNAMAN软件拼接后得到其全长序列。使用多种生物信息学软件对MsHB2的开放阅读框,编码蛋白等电点、分子量、疏水性、亚细胞定位、进化关系等进行预测分析。构建MsHB2的亚细胞定位瞬时表达载体,使用基因枪转化法将MsHB2与GFP在洋葱表皮细胞中融合瞬时表达并观察其亚细胞定位荧光信号。将生长30 d的中苜一号分别进行300 mmol·L-1NaCl和0.1 mmol·L-1 ABA胁迫处理,取胁迫处理0、2、4、10、24 h后的根和茎叶组织提取总RNA并进行荧光定量PCR分析。构建了MsHB2的植物超表达载体,转化农杆菌GV3101菌株,使用农杆菌花序侵染法转化拟南芥并在盐胁迫条件下对转基因株系进行相关表型分析。【结果】将RACE法克隆得到MsHB2的3′和5′末端序列拼接后得到1 126 bp的全长序列,序列分析表明,其编码蛋白包含247个氨基酸,具有一个同源异型结构域和一个亮氨酸拉链结构域,与拟南芥HD-Zip第I类转录因子ATHB12具有较高相似性。进化树聚类分析表明MsHB2属于第Ⅰ类同源异型域亮氨酸拉链蛋白。洋葱亚细胞定位分析表明MsHB2定位于细胞核。转录水平表达分析表明MsHB2受300mmol·L-1 NaCl和0.1 mmol·L-1 ABA胁迫诱导而表达量显著升高。转基因研究表明在NaCl和ABA胁迫下,过量表达MsHB2的转基因拟南芥表现比野生型拟南芥更敏感。【结论】从紫花苜蓿中克隆得到一个定位于细胞核的同源异型域亮氨酸拉链蛋白基因MsHB2,其在紫花苜蓿中受NaCl和ABA胁迫诱导,并在NaCl和ABA胁迫条件下抑制转基因拟南芥的生长。推测MsHB2可能通过A
- 李明娜龙瑞才杨青川沈益新康俊梅张铁军
- 关键词：紫花苜蓿亮氨酸拉链亚细胞定位功能分析转录因子
- 铅胁迫对禾本科牧草生长、生理及Pb^(2+)富集转运的影响被引量：17
- 2015年
- 采用苗期盆栽试验,对14份禾本科牧草种质材料进行不同浓度(0,10,50,100,200,300mg/kg)铅(Pb)胁迫处理,通过对株高、分蘖数、地上/地下生物量、脯氨酸含量、抗氧化酶(SOD、POD、CAT)活性、地上部与根中Pb2+含量等指标的测定与分析,探究Pb胁迫对禾草生长生理以及Pb2+富集转运的影响。结果表明,随着Pb浓度的增加,14份材料的株高、分蘖数、地上生物量均呈先上升后下降的趋势,地下生物量则逐渐降低,通过综合评价,来自土耳其的长穗冰草G5具有较强的耐Pb性。随着Pb浓度的增加,地上部与根中Pb2+含量逐渐升高,富集系数逐渐降低,转移系数逐渐降低(披碱草G7与G8除外),根中Pb2+含量显著高于地上部,为Pb2+的主要富集器官,披碱草地上部Pb2+含量高于其他材料,具有较强的Pb富集转运能力。7份材料的生理指标测定结果表明,随着Pb浓度的增加,7份材料的脯氨酸含量逐渐上升,CAT活性逐渐下降,POD和SOD活性则呈先上升后下降的趋势。
- 李慧芳王瑜袁庆华赵桂琴
- 关键词：禾本科牧草苗期铅胁迫
- 41个紫花苜蓿品种苗期耐盐性评价被引量：13
- 2016年
- 本研究以41个紫花苜蓿品种在0.5%NaCl胁迫下,采用室内盆栽法,测定了不同品种的存活率、株高、绿叶数、萎蔫叶数、分枝数、地上生物量共6个指标,分别分析了盐胁迫10d与20d时不同品种间各指标的差异,并运用隶属函数法对盐胁迫30d时的耐盐性进行了综合评价。结果表明:盐胁迫10d与20d时,不同品种间的各指标均存在显著差异;根据综合评价结果筛选出耐盐性较强的苜蓿品种5个,分别为超级13R、公农1号、赛迪7、超音速、劳博;耐盐性较弱的品种5个,分别为赛特、阿尔冈金、三得利、苜蓿王、南苜蓿;其余31个品种的耐盐性居中。
- 苗丽宏袁庆华王瑜
- 关键词：苜蓿苗期耐盐性综合评价
- 紫花苜蓿杂交群体产量相关性状的遗传分析被引量：7
- 2017年
- 以产量和早熟性状差异明显的紫花苜蓿为亲本,通过杂交方法获得152个单株子代。进一步以亲本和F_1代单株群体为供试材料,对其干重、株高、茎粗、分枝数、茎叶比等5个农艺性状的2年数据进行遗传分析。结果表明:变异系数最大的是干重和分枝数,最小的是茎粗,不同性状平均变异系数值为22.8%;所有性状在后代群体中均存在双向超亲分离,除株高外,所有性状分布频率接近正态分布;干重的遗传率在两年分别为53%和71%,株高的遗传率在两年都大于80%,株高能解释46.4%的干重变异。干重和株高在不同年份遗传率稳定。干重的最佳遗传模型为一对加性-显性主基因遗传模型。逐步回归分析表明,株高、分枝数、茎叶比为干重主要构成因素,分别能解释46.4%、12.8%、2.5%的变异信息;通径分析结果与逐步回归分析结果一致,都显示茎粗主要是通过间接作用影响干重。
- 张帆康俊梅龙瑞才杨青川张铁军
- 关键词：紫花苜蓿农艺性状
