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钴金属螯合亲和层析在hIGF-1融合蛋白分离纯化中的应用被引量：2: 2013年; 为探讨钴金属螯合亲和层析应用于分离纯化制备人胰岛素样生长因子-1(hIGF-1)的可行性与纯化条件,以重组工程菌E.coli DH5α/pET32a(IGF-1)为对象,使用钴亲和层析技术分离纯化其表达产物并与镍亲和层析比较,在此基础上尝试应用钴亲和层析分离纯化制备较大量的hIGF-1融合蛋白。结果显示,钴亲和层析在分离纯化hIGF-1融合蛋白时表现出更好的可操作性与纯化效果,线性放大条件后分离纯化效果稳定,制备hIGF-1融合蛋白产物纯度约为95%,蛋白获得率约为10.78%。研究初步建立了切实可行的钴金属螯合亲和层析分离纯化制备hIGF-1融合蛋白的工艺。; 杨渐俞昌喜许盈廖联明; 关键词：人胰岛素样生长因子-1 镍离子钴离子

重组人胰岛素样生长因子-1对坐骨神经损伤的修复作用被引量：5: 2017年; 目的在大鼠坐骨神经钳夹损伤模型上,探讨重组人胰岛素样生长因子-1(hIGF-1)融合蛋白的治疗作用。方法 40只Wistar大鼠随机分为假手术组、模型组及hIGF-1融合蛋白高(0.02mg)、低(0.002mg)剂量处理组,建立大鼠坐骨神经钳夹损伤模型;以大鼠行为学、坐骨神经功能指数(SFI)、坐骨神经-腓肠肌诱发电位、组织形态学变化为指标,综合考察hIGF-1融合蛋白对损伤坐骨神经的影响。结果术后20~32d,各测定时间点hIGF-1融合蛋白高、低剂量组大鼠SFI值及SFI恢复率显著高于模型组(P<0.05),作用呈剂量依赖性。术后35d,hIGF-1融合蛋白高、低剂量组大鼠坐骨神经-腓肠肌诱发电位振幅显著高于模型组(P<0.01),作用随剂量增大而增强。H-E染色显示,hIGF-1融合蛋白高、低剂量组大鼠坐骨神经损伤区再生神经排列较模型组规则,有髓神经纤维增多,髓鞘较厚且完整。结论重组hIGF-1融合蛋白能促进大鼠坐骨神经损伤的修复。; 黄慧慧杨渐俞昌喜; 关键词：胰岛素样生长因子-1 坐骨神经坐骨神经病

重组人胰岛素样生长因子-1工程菌发酵培养基的优化被引量：1: 2013年; 在摇瓶条件下,以M9培养基为基础,采用单因素实验和正交实验,对适合于表达重组人胰岛素样生长因子-1工程菌生长的高密度发酵培养基进行了优化。确定最佳培养基配方为:葡萄糖0.4%、甘油1.5%、酵母粉3%、胰蛋白胨3%、Na2HPO41.2%、KH2PO40.6%、NH4Cl 0.1%、NaCl 0.20%、MgSO40.048%,在此优化培养基中培养14h,工程菌菌体密度OD600达7.5。; 杨渐陈理俞昌喜; 关键词：人胰岛素样生长因子-1 大肠杆菌发酵培养基

胰岛素样生长因子-1(IGF-1)原核制备工艺进展被引量：6: 2012年; 胰岛素样生长因子-1(IGF-1)具有重要且广泛的生理作用及潜在的治疗作用,因此研究其制备工艺对于规模化生产高产量、高纯度、低成本的IGF-1蛋白具有重要的现实意义。通过基因重组技术制备IGF-1的首选和主要表达系统是原核大肠杆菌表达系统。IGF-1的原核制备工艺主要包括重组表达载体的构建、工程菌培养发酵、表达产物的分离纯化等关键环节。本文主要综述近年来国内外进行IGF-1原核制备的各个工艺流程的研究进展。; 宁俊凯俞昌喜; 关键词：IGF-1 分离纯化

重组人胰岛素样生长因子-1局部毒性、免疫原性研究: 2014年; 目的考察重组人胰岛素样生长因子-1(rhIGF-1)的局部毒性、免疫原性。方法家兔连续7d皮下注射rhIGF-1,末次给药后48h,对给药部位皮肤进行组织病理学检查;豚鼠隔日连续3次腹腔注射rhIGF-1致敏,末次致敏后14d静脉注射激发,激发后密切观察过敏反应症状;体外试管法观察rhIGF-1的溶血作用;小鼠每周皮下注射rhIGF-1 2次,连续4周,间接ELISA法检测抗体产生情况。结果皮下刺激性试验提示,rhIGF-1对皮下组织有刺激作用;全身主动过敏反应中阴性对照组过敏反应呈阴性,低剂量组、高剂量组和阳性对照组过敏反应呈极强阳性;体外溶血试验不引起溶血反应;间接ELISA结果表明,给药1周,未见动物产生抗体,从给药2周开始,所有动物均产生抗体,且随着给药时间的延长,抗体滴度明显上升。结论 rhIGF-1对动物具有致敏性、刺激性、免疫原性,但不引起溶血反应。; 张水华陈芯媛杨渐叶丽香林经东辛志明林菁俞昌喜; 关键词：胰岛素样生长因子-1 重组蛋白质类皮肤试验疾病模型

重组人胰岛素样生长因子-1大肠杆菌高密度发酵研究被引量：5: 2013年; 目的建立重组人胰岛素样生长因子-1(hIGF-1)在大肠杆菌高密度发酵中表达的工艺。方法以工程菌DH5α/pET32a(IGF-1)为对象,通过分批发酵培养优化溶解氧浓度、pH及温度等发酵条件,在此基础上以甘油为限制性基质进行分批补料发酵,考察不同补料方式对发酵的影响。结果适合重组hIGF-1在工程菌高密度发酵中表达的条件:在菌株活化与初始培养后,诱导时控制发酵系统溶解氧浓度为20%,温度为30℃,pH为7.2并以恒定pH反馈补料,发酵12h菌体密度OD600达44.53,得菌体干质量17.49g/L,平均生产强度为1.458g.L-1.h-1,其中重组hIGF-1的相对表达量为32.5%。结论研究为工业化生产hIGF-1奠定了基础。; 陈理杨渐俞昌喜; 关键词：高密度发酵重组大肠杆菌人胰岛素样生长因子-1

重组大肠杆菌高密度发酵工艺进展被引量：9: 2011年; 重组大肠杆菌高密度发酵技术(High cell density cultivation,HCDC)是现代发酵工程的一项新技术,能显著提高基因工程产品的产量。本文就影响重组大肠杆菌高密度发酵产率几个关键因素,包括宿主菌类型、培养基组成、诱导剂的选择、培养条件的选择、补料方法的选择、抑制性代谢产物的影响等做一综述,分析这些条件对菌体和重组蛋白的影响,介绍大肠杆茵高密度培养领域的一些研究进展。; 陈理俞昌喜; 关键词：大肠杆菌高密度发酵补料分批培养乙酸

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福建省高校产学合作科技重大项目(2010Y4002)