湖南省教育厅科研基金(06C696)
- 作品数：8 被引量：24H指数：3
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- 二烯丙基二硫对K562细胞生长抑制和促凋亡的作用被引量：1
- 2011年
- 目的探讨二烯丙基二硫(DADS)对人白血病K562细胞增殖、诱导凋亡和细胞周期的影响。方法采用CCK-8技术检测细胞存活率,进行细胞形态学观察,DNA琼脂糖凝胶电泳和流式细胞仪检测DADS对细胞凋亡及周期的影响。结果 DADS能有效地抑制人白血病K562细胞增殖,15、30、60、120和240μmol/L DADS作用于K562细胞48h后,抑制率分别为26.3%、58.2%、44.7%、62.6%和75.6%。Hoechst形态学观察呈现典型的凋亡形态学改变,琼脂糖凝胶电泳上呈现出凋亡特征性的梯状条带,流式细胞仪检测可见亚二倍体峰并阻滞细胞于G2/M期,30、60和120μmol/L DADS作用于K562细胞12h后,Annexin V/PI双标记法检测早期凋亡细胞率分别为18.59%±0.81%、20.85%±0.65%、23.5%±1.1%(P<0.05)。结论 DADS呈浓度依赖性抑制K562细胞生长,其机制与诱导细胞凋亡并阻滞细胞于G2/M期有关。
- 谭晖吉晓霞王娟何洁彭娟苏琦
- 关键词：二烯丙基二硫K562细胞凋亡细胞周期阻滞
- DADS诱导人白血病细胞HL-60凋亡的流式细胞术检测
- 2009年
- 目的运用流式细胞术检测二烯丙基二硫(diallyl disulfide,DADS)诱导人白血病HL-60细胞凋亡的作用。方法实验分对照组和DADS处理组,进行体外细胞培养,进行细胞形态学观察,应用流式细胞术检测凋亡率、早期凋亡细胞以及caspase-3活性。结果DADS诱导前后,HL-60细胞形态学发生明显改变,PI单染法检测结果:随着不同浓度DADS作用HL-60细胞24 h,HL-60细胞出现明显亚二倍峰,细胞周期也发生了相应的改变;Annexin V/PI双染法检测结果:10 mg/L DADS作用HL-60细胞4、8、12和24 h后,早期凋亡细胞显著增加,具有明显的时间依赖性(P<0.05);间接免疫荧光流式细胞术结果显示在DADS诱导HL-60细胞凋亡过程中有caspase-3的活化,且与作用时间呈依赖关系。结论流式细胞术检测结果表明,DADS能有效诱导HL-60细胞凋亡。
- 易岚林敏吉小霞贺庆芝李国庆唐国华苏琦
- 关键词：流式细胞术人白血病细胞DADS凋亡
- 二烯丙基二硫对人白血病HL-60细胞凋亡启动过程的影响被引量：5
- 2009年
- 背景与目的:二烯丙基二硫(diallyl disulfide,DADS)作为一种抗肿瘤物质日益受到关注。本研究在建立DADS启动HL-60细胞凋亡模型的基础上,研究DADS启动人白血病HL-60细胞凋亡的相关蛋白。方法:提取未处理HL-60细胞和3.6mg/LDADS处理2d的HL-60细胞的总蛋白,双向电泳分离细胞总蛋白质,绘制图谱,PDQuest软件分析,切割差异蛋白质,进行质谱分析、生物信息学分析,Western blot以及RT-PCR验证部分差异蛋白。结果:对照组和处理组蛋白质表达量相差2倍以上的点有29个,其中22个上调,7个下调。质谱分析和数据库搜索鉴定了9个蛋白质点,其中7个蛋白质点有意义,这些蛋白功能分别与信号转导、基因转录及调控、细胞骨架、细胞新陈代谢等有关。Western blot结果显示DADS处理后Rac2(ras-related C3 botulinum toxin substrate2)蛋白表达明显上调,RT-PCR显示DADS处理后Rac2表达增强。结论:Rac2等蛋白参与了DADS诱导的HL-60细胞凋亡,但其具体机制还有待于进一步研究。
- 易岚曾希谭晖葛玲吉小霞林敏苏琦
- 关键词：DADS白血病HL-60细胞蛋白质组学
- 二烯丙基二硫诱导HL-60细胞系凋亡及其与Caspase-3的关系被引量：1
- 2008年
- 目的研究二烯丙基二硫(DADS)诱导白血病细胞凋亡及其机制。方法实验分对照组、DADS处理组、Ac-DEVD-CHO预处理组,进行体外细胞培养,采用形态学观察、MTT法、流式细胞术、DNA凝胶电泳等方法,进行细胞形态学观察、细胞增殖抑制作用研究,检测细胞凋亡率、Caspase-3活性以及DNA Ladder检测。结果DADS诱导前后,HL-60细胞形态学发生明显改变,DADS以剂量依赖的方式抑制细胞的生长,在DADS诱导HL-60细胞凋亡过程中有Caspase-3的活化,且与剂量和作用时间呈依赖关系,Caspase-3抑制剂Ac-DEVD-CHO能抑制DADS诱导HL-60细胞凋亡。结论DADS能有效地诱导HL-60细胞凋亡,其过程与Caspase-3活化相关。
- 易岚苏琦李国庆秦志峰贺庆芝刘运莲殷杰杨露青
- 关键词：人白血病细胞二烯丙基二硫凋亡CASPASE-3
- 二烯丙基二硫上调p21、STAT1和CAMTA1诱导人白血病HL-60细胞分化被引量：12
- 2010年
- 目的应用抑制性消减杂交(SSH)研究二烯丙基二硫(diallyl disulfide,DADS)诱导人白血病HL-60细胞分化的分子机制。方法在前期工作中,我们成功地构建了具有高消减效率的DADS诱导白血病分化的cDNA文库,本实验通过挑取文库中的30个克隆制备质粒并酶切分析、测序和同源性检索。结果18个克隆均具有100～600bp左右的插入片段,测序分析发现10个差异表达基因,分别与细胞周期、信号转导、代谢、RNA结合等有关。RT-PCR验证其中上调的3个基因:p21、STAT1和CAMTA1,结果与SSH相符。结论p21、STAT1和CAMTA1表达上调与DADS诱导白血病分化密切相关。
- 黄卫国谭晖易岚何洁苏琦
- 关键词：二烯丙基二硫白血病HL-60细胞分化P21STAT1
- 二烯丙基二硫通过激活Caspase3和释放Cyt-c诱导Raji细胞凋亡被引量：2
- 2009年
- 二烯丙基二硫(diallyl disulfide,DADS)作为天然植物大蒜中的提取物,能抑制多种肿瘤细胞生长,但其抑瘤的分子机制还不十分清楚。在该研究中,作者采用CCK-8(cell counting ki)t技术检测发现,DADS能有效地抑制人淋巴瘤Raji细胞增殖,形态学观察、DNA琼脂糖凝胶电泳和流式细胞仪检测证实DADS呈时间和浓度依赖性诱导Raji细胞凋亡,DADS处理细胞24h后,MCL1和Bcl-2蛋白表达下降,而Bax和Bak蛋白表达水平无变化,Bid和Caspase3被激活,线粒体中Cyt-c释放增多,用Caspase抑制剂Z-VAD-FMK能部分阻断DADS诱导人淋巴瘤Raji细胞凋亡,提示DADS诱导的Raji细胞凋亡作用通过Bcl-2/MCL1-线粒体-caspase3通路介导。
- 谭晖吉晓霞凌晖罗招阳何洁易岚周建国苏琦
- 关键词：DADSRAJI细胞凋亡CASPASE3
- 角蛋白19/20表达与胃癌组织学类型及转移的关系被引量：2
- 2010年
- 目的分析角蛋白19/20(CK19/20)表达与胃癌组织学类型及转移的关系。方法选择65例手术切除的胃癌及20例淋巴结转移癌标本,并以18例慢性浅表性胃炎组织作为对照,采用免疫组化SP方法检测CK19/20蛋白表达,分析其表达与临床病理特征之间的关系。结果胃癌患者中CK19和CK20阳性率分别为84.6%(55/65)和81.5%(53/65);转移癌中CK19和CK20阳性率分别为95.0%(19/20)和90.0%(18/20);对照组胃炎患者中CK19和CK20阳性率分别为27.8%(5/18)和27.8%(5/18)。CK19/20表达在转移性胃癌中高于胃癌患者,且均高于对照组胃炎患者(P<0.05);CK19和CK20阳性率与分化、淋巴结转移及临床分期有关(P<0.05),而与年龄、性别无关(P>0.05);CK19和CK20在胃癌中的表达呈显著正相关(r=0.836,P<0.01)。结论胃癌组织中CK19/20蛋白表达阳性率增高,与胃癌的分化和转移有关,且相互之间的表达具有相关性。
- 黄卫国赵强曾庆彪苏琦
- 关键词：胃癌角蛋白19角蛋白20分化
- Mcl-1基因及其在白血病中的作用被引量：3
- 2009年
- Mcl-1(myeloid cell leukemia-1)基因作为Bcl-2家族成员之一,在细胞的生存凋亡,周期及分化调控中起着重要的作用。Mcl-1基因与血液系统恶性肿瘤的发生和发展有着密切的关系。
- 吉晓霞谭晖苏琦
- 关键词：MCL-1基因白血病凋亡细胞周期
