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高表达碳酸酐酶1参与骨化过程的研究: 2012年; 目的碳酸酐酶1不仅可以催化二氧化碳水化反应，还可以加速碳酸钙的形成，而钙沉淀是新骨形成的重要步骤。本研究以培养细胞为模型探索碳酸酐酶1在骨形成过程中的作用。方法用成骨诱导培养基（OM）诱导骨肉瘤细胞Saos-2钙化，然后用茜素红染色法观察细胞矿化结节的形成，用荧光定量聚合酶链反应（PCR）检测细胞骨化标志蛋白核心结合蛋白因子2（Runx2）、成骨细胞特异性转录因子（OSX）、碱性磷酸酶（AIJP）、骨钙素和骨涎蛋白（BSP）的表达。用蛋白印迹法和荧光定量PCR检测细胞钙化前后碳酸酐酶1的表达量的变化。用碳酸酐酶抑制剂乙酰唑胺处理Saos-2细胞，观察细胞钙化过程是否被抑制。2组间比较采用t检验，不同时间点的统计学分析采用重复测量的方差分析。结果Saos-2细胞在OM诱导后形成大量矿化结节（0．68±0．03与2．76±0．13，P〈0．01），Runx2、ALP、骨钙素、OSX和BSP转录水平明显升高，显示OM可诱导Saos-2细胞钙化和骨化。Saos-2细胞钙化后碳酸酐酶1表达明显增高（0．25±0．03与0．94±0．06，P〈0．01）。Saos-2细胞经乙酰唑胺处理后，碳酸酐酶1的表达量减少（1．09±0．05与0．55±0．07，P〈0．05），矿化结节形成明显减少（2．76±0．13与2．19±0．07，P〈0．01），骨化标志蛋白的表达也明显下降，说明抑制碳酸酐酶1表达可以抑制Saos-2细胞矿化和骨化过程。结论碳酸酐酶1在新骨形成过程中起着重要作用。; 郑亚冰王林赵丹王月俭安琨韩金祥常晓天; 关键词：骨生成成骨诱导生物矿化

强直性脊柱炎关节滑膜高表达碳酸酐酶_1的研究被引量：3: 2011年; [目的]过度的新骨形成和骨吸收是强直性脊柱炎(AS)的重要病理特征。研究表明,AS病人滑膜的病理变化与该病的病变严重程度密切相关。本研究用蛋白质组学方法比较AS、类风湿性关节炎(RA)、骨关节炎(OA)滑膜组织的蛋白表达谱,筛选AS疾病相关的特异性表达蛋白。[方法]AS滑膜取自髋关节,RA和OA滑膜取自膝关节。提取每个滑膜(每种疾病n=10)的总蛋白,然后按等比例浓度混合分别制备每种疾病的样本池。用双向凝胶电泳分析AS、RA、OA滑膜的蛋白表达谱,用质谱分析方法鉴定AS中特异高表达的蛋白。用免疫组织化学法和蛋白免疫印迹法逐一分析靶蛋白在每个滑膜中的表。[结果]与RA和OA相比,蛋白质组学发现碳酸酐酶1(car-bonic anhydrase I,CA1)在AS滑膜中特异性高表达。免疫组织化学法和蛋白免疫印迹均证实CA1在AS滑膜中明显表达(P=0.01)。[结论]研究证实,CA1可以促进钙沉淀和骨吸收。AS关节滑膜组织中高表达CA1可能会通过刺激新骨形成和骨吸收而参与AS病理过程。; 张虎贾堂宏李晓光闫新峰赵燕常晓天; 关键词：强直性脊柱炎钙化骨吸收

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国家自然科学基金(30671949)

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