国家自然科学基金(30671969)
- 作品数：15 被引量：62H指数：5
- 相关作者：戴亚蕾苏丹石海莲吴大正徐婷更多>>
- 相关机构：同济大学上海中医药大学第二军医大学更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 黄芪注射液对左室肥厚大鼠心肌钙超载及肌浆网钙泵表达的影响被引量：7
- 2008年
- 目的:探讨黄芪对压力过载致左室肥厚大鼠心肌钙含量及肌浆网钙泵(SERCA2a)表达的影响。方法:采用缩窄腹主动脉法制备压力过载性心肌肥厚模型。大鼠随机分为假手术组,模型组,低、中、高剂量黄芪组(5,10,20 g·kg^(-1)·d^(-1))和卡托普利组(0.05 g·kg^(-1)·d^(-1))。造模后第13周开始灌胃给药,连续12周。测定大鼠左室质量指数(left ventricular mass index,LVMI)和心肌钙含量的变化(原子吸收光谱法),并检测(RT-PCR,Western blot)大鼠左室组织肌浆网钙泵的表达。结果:黄芪呈剂量依赖性抑制模型大鼠左室质量指数的增加(P<0.01,P<0.001),其中高剂量黄芪作用与卡托普利相似;黄芪能抑制肥厚心肌组织钙超载(P<0.01);与假手术组相比,心肌肥厚大鼠左心室SERCA2a基因表达下调(P<0.05),高剂量黄芪使之表达上调(P<0.05),而卡托普利对其表达无明显影响。结论:黄芪对大鼠压力过载性心肌肥厚的抑制作用可能与其减轻心肌钙超载及上调心肌SERCA2a基因表达有关。
- 苏丹许兵石海莲吴大正戴亚蕾
- 关键词：黄芪注射液左室肥厚钙超载肌浆网钙泵
- 清道夫受体SR-PSOX基因定点突变的研究
- 2010年
- 目的构建清道夫受体SR-PSOX点突变体,揭示该受体与脂质结合的关键位点,为确定SR-PSOX在脂质摄取、泡沫细胞形成中的作用提供模型。方法利用分子克隆及PCR定点突变技术,构建不同突变点的片段并克隆到pEGFP-N3中,形成含有SR-PSOX各联合突变的pEGFP-SR-PSOX突变体质粒。转染293T细胞后采用流式检测受体表达情况。结果从THP-1源性的巨噬细胞中成功克隆SR-PSOX受体并在真核表达载体pEGFP-SR-PSOX基础上获得了SR-PSOX三种突变体(R78、R82H85、R78R82H85)。测序结果表明SR-PSOX序列中发生了预期的突变,使SR-PSOX受体中第78位精氨酸单点突变,第82位精氨酸、第85位组氨酸双点突变,第78、82位精氨酸和第85位组氨酸三点突变,均突变为丙氨酸,并将所有pEGFP-SR-PSOX突变体在293T细胞膜表面成功表达。结论定点突变PCR可以成功构建SR-PSOX受体的3种突变体,使之在293T细胞表面获得表达,为进一步研究SR-PSOX的功能奠定了基础。
- 刘威威尹岚张琪敏陈春霞戴亚蕾
- 关键词：清道夫受体定点突变转染
- 乌拉地尔对急性心肌梗死再灌注后无复流的影响被引量：1
- 2007年
- 目的对冠脉内注射小剂量乌拉地尔对防治靶血管开通后的无复流现象的作用进行初步研究。方法我院收治的急性心肌梗死患者并行急诊介入治疗者共48例随机分为为乌拉地尔组(术中加用乌拉地尔冠脉内注射)和对照组(各24例)。比较两组患者的术后心肌灌注分级和无复流的发生率。结果乌拉地尔组术后梗死相关血管血流Blush分级无复流发生率,显著低于对照组(16.67%vs29.2%)P<0.05。结论冠脉内注射小剂量乌拉地尔对急性心肌梗死直接介入治疗后无复流现象有一定防治作用。
- 邓良蒋金法邓兵宋浩明
- 关键词：无复流急性心肌梗死乌拉地尔
- 黄芪注射液对压力过载性左心室肥厚大鼠心肌胶原蛋白Ⅰ、Ⅲ表达的影响被引量：3
- 2009年
- 目的:观察黄芪注射液对大鼠压力过载性心肌肥厚的逆转作用,并探讨胶原蛋白Ⅰ、Ⅲ在肥厚心肌中的表达变化及黄芪注射液对其的影响。方法:采用缩窄大鼠腹主动脉建立心肌肥厚模型,术后12周开始给药,连续12周。测定大鼠左心室质量指数(LVWI),观察黄芪注射液对大鼠心肌组织病理变化的影响;检测大鼠左心室组织胶原蛋白Ⅰ、Ⅲ的表达。结果:黄芪注射液呈剂量依赖性抑制模型大鼠左心室LVWI的增加,其中高剂量黄芪注射液与卡托普利作用相似。黄芪注射液和卡托普利均能减轻模型大鼠心肌胞外基质过多沉积,改善心肌细胞受压萎缩或空泡变性的程度;均能抑制心衰大鼠左心室组织中胶原蛋白I的表达,而胶原蛋白Ⅲ的表达无显著变化。结论:黄芪注射液对压力过载所致大鼠左心室肥厚有抑制作用,其机制可能与下调心肌组织胶原蛋白I的表达有关。
- 苏丹严浩然戴亚蕾吴大正石海莲
- 关键词：黄芪注射液左心室肥厚
- 体外研究人LOX-1受体功能的细胞模型建立被引量：3
- 2009年
- 目的研究LOX-1受体在早期动脉粥样硬化中的作用,建立体外LOX-1高表达细胞模型,用于探讨LOX-1与Ox-LDL的相互作用及参与泡沫细胞形成的机制。方法根据人类cDNA文库设计引物,采用巢式PCR技术用人单核细胞转化的巨噬细胞中扩增出LOX-1完整编码区,克隆至pEGFP-C1重组真核表达载体,经测序证实后,用脂质体转染法转染至293T细胞,采用RT-PCR鉴定外源基因的表达,倒置荧光显微镜检测质粒转染效率和融合蛋白的细胞膜上定位情况,流式细胞技术检测EGFP-LOX-1融合蛋白表达情况以及其对Ox-LDL的结合能力。结果pEGFP-LOX-1重建质粒经测序证实克隆的LOX-1序列完整,插入方向正确,转染后实验组LOX-1 mRNA大量表达,融合蛋白正确定位在细胞膜表面,并显示结合配体Dil-Ox-LDL的功能提高到6.3倍。表明所克隆的LOX-1受体具有特异性结合Ox-LDL的功能,从而建立了高表达LOX-1受体的细胞。结论成功克隆人类LOX-1基因,使其在293T细胞中高度表达并获得了相应的功能,为进一步研究LOX-1提供有利工具。
- 徐婷戴亚蕾尹岚杨红田菲陈春霞
- 关键词：LOX-1基因克隆真核表达
- 白细胞介素10对巨噬细胞源泡沫细胞趋化因子表达的影响被引量：12
- 2007年
- 目的探讨白细胞介素10对单核—巨噬细胞源性泡沫细胞转化过程中趋化因子表达的影响及其机制。方法以佛波醇酯诱导THP-1单核细胞分化为巨噬细胞,在氧化型低密度脂蛋白作用下形成泡沫细胞,同时给予白细胞介素10干预,采用逆转录聚合酶链反应和凝胶阻滞试验研究单核细胞趋化蛋白1、巨噬细胞炎性蛋白5、白细胞介素8mRNA的表达变化及白细胞介素10对核因子κB活性的影响。结果在白细胞介素10作用下,泡沫细胞中单核细胞趋化蛋白1和巨噬细胞炎性蛋白5mRNA相对表达量均显著降低,且与作用时间成正相关,而白细胞介素8相对表达量变化不明显。同时白细胞介素10能显著抑制氧化型低密度脂蛋白诱导的核因子κB活化。结论白细胞介素10选择性抑制单核—巨噬细胞源性泡沫细胞形成中趋化因子mRNA的表达与有效地抑制核因子κB活性密切相关。这对降低炎症反应,减少泡沫细胞形成,延缓动脉粥样斑块形成具有重要意义。
- 王飞戴亚蕾
- 关键词：病理学与病理生理学白细胞介素10泡沫细胞趋化因子低密度脂蛋白
- 白细胞介素10对血管内皮细胞E选择素和血凝素样低密度脂蛋白受体1表达的影响被引量：2
- 2011年
- 目的研究白细胞介素10对人血管内皮细胞表面黏附分子E选择素、细胞间黏附分子1及血凝素样低密度脂蛋白受体1表达的影响,探讨白细胞介素10抗动脉粥样硬化可能的机制。方法将人脐静脉内皮细胞随机分为四组进行不同处理24 h:即空白对照组、氧化型低密度脂蛋白组、白细胞介素10组和白细胞介素10与氧化型低密度脂蛋白联合刺激组。采用流式细胞术检测细胞表面黏附分子E选择素和细胞间黏附分子1表达的变化;采用实时定量PCR和Western Blotting分别检测血凝素样低密度脂蛋白受体1的mRNA和蛋白表达。结果与空白对照组比较,细胞经氧化型低密度脂蛋白刺激24 h后,其表面的黏附分子E选择素表达量显著增加了20%,血凝素样低密度脂蛋白受体1的表达量也显著增加了25%,而同时加入白细胞介素10联合刺激组E选择素和血凝素样低密度脂蛋白受体1的表达量与氧化型低密度脂蛋白组比较均出现显著下降(分别为20%和40%),回到基线水平。而单独使用白细胞介素10对E选择素及血凝素样低密度脂蛋白受体1的表达没有影响;本实验未能检测到氧化型低密度脂蛋白对细胞间黏附分子1表达的影响。结论抗炎因子白细胞介素10能通过下调内皮细胞表面黏附分子的表达抑制单核-血管内皮细胞黏附,对血管内皮细胞发挥保护作用;同时降低血凝素样低密度脂蛋白受体1的表达,减少氧化型低密度脂蛋白对内皮细胞活化,这些可能是白细胞介素10抗动脉粥样硬化的机制之一。
- 姬果尹岚刘威威戴天耘陈春霞戴亚蕾
- 关键词：血管内皮细胞氧化型低密度脂蛋白白细胞介素10细胞间黏附分子1E选择素
- 改良移植技术建立豚鼠至大鼠异位心脏移植模型被引量：1
- 2008年
- 目的建立简便易行的豚鼠至大鼠异种颈部心脏移植模型。方法采用Cuff技术(对照组,n=40)和改良Cuff技术(实验组,n=40)行豚鼠-大鼠异种异位心脏移植。结果进行正式实验80例,成功率分别为为95%(对照组)和97.5%(实验组),移植后平均存活时间分别为(16.89±3.00)min和(50.64±1.95)min,应用改良方法移植可使供心总缺血时间由(20.97±1.05)min缩短至(7.95±0.97)min。结论改良移植技术建立豚鼠至大鼠异位心脏移植模型操作简便,重复性好,适合非协调性异种心既移植超急性血管排斥机制及抗排斥方面的研究。
- 王建雄黄盛东徐志云崔世涛徐兵庄育刚
- 关键词：异种移植
- 白细胞介素10对人THP-1源巨噬细胞泡沫化过程中SR-A表达的影响被引量：2
- 2008年
- 目的:本研究旨在观察白细胞介素-10(IL-10)对人THP-1源巨噬细胞泡沫化过程中清道夫受体A(SR-A)表达的影响,探讨在动脉粥样硬化形成中IL-10对氧化型低密度脂蛋白(ox-LDL)诱导巨噬细胞泡沫化的干预作用。方法:体外建立泡沫细胞培养体系,将细胞分为5组即THP-1单核细胞组,巨噬细胞组,IL-10刺激巨噬细胞组,ox-LDL刺激巨噬细胞组(泡沫细胞组),ox-LDL和IL-10联合刺激巨噬细胞组。采用RT-PCR和Westernbloting分别检测SR-A的mRNA和蛋白表达变化,脂质油红O化学染色方法检测各组细胞脂质摄取量的情况。结果:当THP-1分化为巨噬细胞时,SR-A开始大量表达;IL-10刺激可显著抑制巨噬细胞组SR-A的表达,其mRNA和蛋白分别下降为未刺激前的0.6倍和0.7倍,泡沫细胞形成率也下降为未刺激前的0.6倍。巨噬细胞经ox-LDL刺激形成泡沫细胞时,SR-A的表达进一步升高,其mRNA和蛋白分别增加为巨噬细胞组的1.5倍和1.4倍,泡沫细胞形成率提高为巨噬细胞组的1.7倍。在此过程中加入IL-10联合刺激,观察到SR-A的表达量有显著降低,其mRNA和蛋白均下降为单用ox-LDL刺激巨噬细胞组的0.4倍,ox-LDL的摄取量也下降为单用ox-LDL刺激巨噬细胞组的0.3倍。结论:IL-10抑制巨噬细胞SR-A表达,IL-10对ox-LDL诱导巨噬细胞SR-A的表达具明显干预作用。IL-10通过抑制SR-A表达可能在抗动脉粥样硬化的发生中发挥重要作用。
- 杨红戴亚蕾徐婷田菲
- 关键词：白细胞介素10清道夫受体氧化型低密度脂蛋白
- 清道夫受体SR-AⅡ基因定点突变的研究被引量：1
- 2008年
- 目的:利用聚合酶链反应技术对清道夫受体SR-AⅡ基因进行定点突变的研究。方法:利用聚合酶链反应定点突变技术,首先设计4条(其中2条包含预定突变位点)引物,通过3轮PCR反应扩增出含有所需突变位点的片段,通过酶切连接方法将其重组到pEGFP-C1中形成pEGFP-SR-AⅡ-335质粒。结果:在真核表达载体pEGFP-SR-AⅡ-335基础上获得了SR-AⅡcDNAA1201G和A1202C的突变体,测序结果表明在序列中发生了预期的突变,使SR-AⅡ受体蛋白第335位的赖氨酸变为丙氨酸。结论:SR-AⅡ定点突变体的构建为进一步的功能研究奠定了基础。
- 杨红陈士超田菲戴亚蕾
- 关键词：受体聚合酶链反应定点突变
