湖北省卫生厅青年科技人才基金(QUX2010-28)
- 作品数：9 被引量：26H指数：3
- 相关作者：吴江锋张艳琼柳长柏陈静李红军更多>>
- 相关机构：三峡大学葛洲坝中心医院中国葛洲坝集团中心医院更多>>
- 发文基金：湖北省卫生厅青年科技人才基金国家自然科学基金湖北省卫生厅科研基金更多>>
- 相关领域：医药卫生文化科学生物学理学更多>>
- 关于人体解剖学八年留学生教学的体会被引量：3
- 2011年
- 人体解剖学教研室经过8年的探索和教学实践,积累了一些经验,并形成了较为完整的教学体系。
- 吴江锋张瑞涛陈静汤桂成
- 关键词：人体解剖学教学实践
- 抗肝纤冲剂对肝纤维化小鼠肝组织TGFβ信号转导通路的影响被引量：2
- 2012年
- 目的探讨抗肝纤冲剂对免疫损伤肝纤维化小鼠的治疗作用机制。方法将75只雌性Balb/c小鼠分为5组:正常对照组、肝纤维化模型组,秋水仙碱治疗组,抗肝纤冲剂低剂量组、抗肝纤冲剂高剂量组。除正常对照组外,其余各组均制备肝纤维化小鼠模型。造模的同时分别用药物对小鼠进行干预治疗7周。7周末处死小鼠,免疫荧光检测肝组织中的TGF-β、Smad2/3和Smad6/7蛋白的表达,采用Western blotting方法检测肝组织中的TGF-β和Ⅰ型胶原蛋白的表达情况。结果正常小鼠肝组织中的TGF-β、Smad2/3和Ⅰ型胶原蛋白的表达量少,Smad6/7表达量多;模型组小鼠的肝组织中TGF-β、Smad2/3和Ⅰ型胶原蛋白的表达量明显增加,而Smad6/7表达量减少;抗肝纤冲剂干预治疗后,肝组织中TGF-β、Smad2/3和Ⅰ型胶原蛋白的表达量有减少的趋势,而Smad6/7表抗肝纤冲剂通过抑制TGF-β的分泌,降低Smad2/3的磷酸化水平,起到抑制Ⅰ型胶原的蛋白分泌的作用。达量又趋增加。结论抗肝纤冲剂通过抑制TGF-β的分泌,降低Smad2/3的磷酸化水平,起到抑制Ⅰ型胶原的蛋白分泌的作用。
- 肖和杰柳长柏张艳琼吴江锋石次国陈钢杜杨红石慧
- 关键词：肝纤维化SMAD
- 制作冰冻切片的体会被引量：3
- 2011年
- 冰冻切片具有制片迅速、简便、切片较薄、组织变化不大、无需脱水及浸腊等特点，能很好地保存类脂、脂肪等成分，尤其在免疫组织化学染色中，更能完好地保存大部分的抗原活性及各种酶类。尤其对有机溶剂或热温度耐受差的细胞表面抗原和水解酶的保存就更好。常用于临床诊断和科学研究。要制作高质量的冰冻切片并非易事，受到多种因素的影响。笔者通过多年的实践总结了一些体会，供同仁们参考。
- 吴江锋李红军
- 关键词：病理学显微切片术
- 骨骼标本脱脂的新方法被引量：10
- 2012年
- 人体骨骼标本是人体解剖学中的不可缺少的教具,制作优质的骨骼标本是解剖学实验人员的技能之一,制作骨骼标本的步骤主要包括：清除软组织、脱脂、漂白等。能否彻底脱去骨骼标本的油脂是制作优质骨骼标本的关键。香蕉水（banana oil）是一种有机溶剂,在长期制作骨骼标本的过程中,我们使用香蕉水进行了脱脂处理,现将这方面的知识做一介绍。
- 吴江锋陈静丁志兵
- 关键词：骨骼标本人体解剖学有机溶剂
- 抗肝纤冲剂对免疫损伤小鼠肝纤维化肝组织病理改变的影响被引量：4
- 2012年
- 目的观察抗肝纤冲剂对猪血清所致的免疫损伤肝纤维化小鼠肝组织的病理学影响。方法将75只雌性Balb/c小鼠分为5组,每组15只:正常对照组,肝纤维化模型组,秋水仙碱治疗组,抗肝纤冲剂低剂量组,抗肝纤冲剂高剂量组。除正常组外,其余各组均采用腹腔注射猪血清的方法制备肝纤维化小鼠模型。造模的同时分别用药物对小鼠进行干预治疗7周。7周末处死小鼠,取血、肝脏及脾脏。用全自动生化仪测定血清肝功能指标;肝组织固定、切片、HE染色,于光镜下观察肝脏病理变化。结果药物治疗组的小鼠一般状况有所改善,死亡率降低。抗肝纤冲剂治疗组与模型组、秋水仙碱组相比,血清肝功能指标ALT、AST显著降低(P<0.01,P<0.05);肝组织的病理学显示,抗肝冲剂治疗组与模型组相比,肝细胞炎症减轻。结论抗肝纤冲剂可以显著减轻免疫损伤小鼠肝纤维化的肝组织的病理学损伤。
- 肖和杰柳长柏张艳琼石次国陈钢杜杨红石慧吴江锋
- 关键词：肝纤维化
- 肿瘤细胞培养中的问题及采取措施被引量：4
- 2013年
- 本文通过对各种不同肿瘤细胞培养(包括细胞的复苏、传代、冻存等)过程中,易出现的坏死、污染、不长等问题及采取的措施进行了探讨。总结出一条较为适合肿瘤细胞培养的方法。以提高科研水平。
- 李红军张艳琼
- 关键词：肿瘤细胞培养污染
- Necdin-Wnt及STRA6-JAK2-STAT5信号通路与肝星状细胞活化的关系研究
- 2013年
- 肝纤维化的发生与多种信号通路密切相关,有研究证实Wnt信号通路促进肝星状细胞(hepaticstellate cell,HSC)活化。Necdin作为经典Wnt信号通路的上游信号分子,其与Wnt10b启动子结合,激活Wnt信号通路,通过抑制PPARγ,促进HSC活化。STRA6-JAK2-STAT5信号通路可以通过正向调节PPARγ维持HSC的静止。因此,研究Necdin-Wnt和STRA6-JAK2-STAT5信号通路与HSC活化之间的关系,有助于为肝纤维化临床治疗提供一些新的思考。
- 沈旭宋兴福吴江锋
- 关键词：WNTPPARΓ肝星状细胞
- RNA干扰引起的非特异性免疫反应及其机制研究探讨
- 2012年
- 基因的表达失控是疾病发生的主要原因之一,干扰靶基因的表达可能成为有效的治疗手段。RNA干扰技术是近年兴起的基因调控干预方法,其基础,特别是应用研究极受关注,人们期待RNA干扰能成为肿瘤、病毒感染等难治疾病的临床治疗手段。然而,这一新兴技术在应用研究过程中显现出诸多问题,如细胞毒性、引起机体非特异性反应等等。就RNA干扰引起的非特异性免疫反应展开综述,探讨其机制,期望为RNA干扰的应用研究提供一些思考。
- 吴江锋张贺吉柳长柏
- 关键词：RNA干扰小干扰RNA非特异性免疫
- gremlin1基因的诱变及其真核表达载体的构建
- 2013年
- 目的：分别构建全长、无信号肽、无核定位系统和既无信号肽也无核定位系统的大鼠gremlin1基因的真核表达载体.方法：采用PCR技术获得全长大鼠gremlin1基因（gremlin1）和无信号肽的gremlin1基因（gremlin1-DS）,以全长gremlin1为模板运用重叠延伸PCR获得无核定位系统的gremlin1基因（gremlin1-DN）,继而在gremlin1-DN的基础上去掉信号肽获得既无信号肽也无核定位系统的gremlin1基因（gremlin1-DS-DN）.分别将4组重组质粒转染到非洲绿猴肾细胞株cos7中,免疫荧光和蛋白免疫印迹检测gremlin1基因的表达.结果：构建的真核表达载体pEF1/Myc-HisC-gremlin1、pEF1/Myc-His C-gremlin1-DS、pEF1/Myc-His C-gremlin1-DN和pEF1/Myc-His C-gremlin1-DS-DN经PCR与酶切鉴定显示目的片段大小与预期结果一致；经DNA测序显示pEF1/Myc-His C-gremlin1中的gremlin1片段与Gene Bank中的gremlin1序列（NM-019282）完全吻合；pEF1/Myc-His C-gremlin1-DS中的gremlin1基因缺失信号肽序列；pEF1/Myc-His C-gremlin1-DN中的gremlin1片段实现了4个定点突变：433-435位的AAG（赖氨酸）、487-489位的CCA（脯氨酸）、490-492位的CCC（脯氨酸）、496-498位的AAG（赖氨酸）均突变为TTC（苯丙氨酸）；pEF1/Myc-His Cgremlin1-DS-DN中的gremlin1基因既缺失信号肽序列又实现了4个定点突变.将它们分别转染到cos7细胞后,免疫荧光和蛋白免疫印迹检测显示,4者均能在细胞内成功表达.结论：成功构建了pEF1/Myc-HisC-gremlin1、pEF1/Myc-HisC-gremlin1-DS、pEF1/Myc-His C-gremlin1-DN、pEF1/Myc-His C-gremlin1-DS-DN的真核表达载体.
- 万林燕张巧娟彭虎夏鑫柳长柏吴江锋张艳琼
- 关键词：诱变真核表达
