国家自然科学基金(30671981)
- 作品数：5 被引量：13H指数：4
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- 相关机构：中国人民解放军总医院复旦大学首都医科大学更多>>
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- 超抗原SEB诱导的免疫耐受与细胞因子无关被引量：4
- 2009年
- 目的研究超抗原金黄色葡萄球菌肠毒素B(staphylococcal enterotoxin B,SEB)诱导的耐受效应和耐受调节机制。方法收集SEB活化10天的细胞,充分洗涤后做为效应细胞,分别与刀豆蛋白(ConA)、脂多糖(LPS)和白介素-2(IL-2)共同培养,用MTT方法测定细胞的耐受性应答反应。正常淋巴细胞在与ConA、LPS、IL-2共同培养的同时添加效应细胞,用MTT方法测定效应细胞的抑制性应答反应功能。流式细胞技术解析耐受性效应细胞类型。结果效应细胞对ConA、LPS和IL-2的应答反应能力明显降低(P<0.01,n=3),但保持对ConA的应答反应能力。效应细胞抑制正常淋巴细胞与ConA、LPS和IL-2的应答反应(P<0.01,n=3),尤其抑制ConA和IL-2诱导的细胞增殖。SEB活化的效应细胞中CD8+NK1.1+、TcRVβ8+NK1.1+和CD4+NK1.1+NKT细胞以及TcRVβ8+T、CD8+T细胞数量明显增加(P<0.01和P<0.05,n=4)。结论超抗原SEB诱导的耐受性应答反应是效应细胞的直接作用,与细胞因子无关;这些效应细胞能抑制T淋巴细胞增殖,并保存识别ConA的受体功能。
- 陈钰郭业磊钟江陈中才
- 关键词：超抗原SEB免疫耐受细胞因子NKT细胞
- 超抗原SEB可以活化NKT细胞
- 2007年
- NKT细胞是一群表达NK1．1＋TcRαβ＋抗原的淋巴细胞亚群，最初是在那些NK1．1＋的小鼠中发现，2000年被命名为第四类的淋巴细胞。小鼠的NKT细胞主要是CD4^＋或者CD4～CD8^-细胞。大量的NKT细胞存在于肝脏，大约占T淋巴细胞的30％，外周血、脾脏中很少，只占2％前后。NKT细胞的作用主要有两个方面，效应功能和调节功能；它可以抑制Th1细胞的过激，控制IL-2，IFN-γ的产生和后期的细胞增殖，可以调节Th2细胞的细胞因子产生，使T细胞分化朝Th2方向偏移；它也可以在Th1细胞抵抗感染和肿瘤时提供帮助以及可以阻止部分细胞的分化，控制自身免疫病的发生和发展。NKT细胞的活化主要依靠类脂多肽类抗原如半乳糖神经酰胺（alpha-galactosylceramide，简称α-Galcer）和类似于MHCI类抗原的CDId递呈抗原。目前还无法证明其它脂类或糖脂类抗原能否激活NKT细胞，并使其发挥功能。我们以往的研究发现葡萄球菌肠毒素B（SEB）作为耐受原不仅能诱导淋巴细胞的耐受，在异基因骨髓移植、皮肤移植和角膜移植中都显示出明显抗排斥效应。在外周淋巴细胞移植中，用SEB可诱导带有供体淋巴细胞表面分子特征的微嵌合体形成；
- 陈钰
- 关键词：超抗原SEBNKT细胞活化葡萄球菌肠毒素异基因骨髓移植CD4^+
- 超抗原SEB活化的NKT细胞亚群及耐受功能的研究被引量：4
- 2009年
- 目的研究多肽类抗原-超抗原金黄色葡萄球菌肠毒素B(staphylococcal enterotoxin B,SEB)活化的NKT细胞亚群及耐受特征。方法小鼠脾细胞分别与SEB和ConA体外培养,MTT方法测定细胞增殖;特异性耐受特征的研究使用体外活化第3天的细胞,吸出上清后添加二次抗原ConA、LPS、IL-2,继续培养3 d,MTT方法测定细胞对二次抗原的应答反应能力。用流式细胞测定法解析SEB和ConA体外活化的淋巴细胞在第0、5、10和15天时的T和NKT淋巴细胞亚群。结果SEB和ConA均诱导了小鼠淋巴细胞在体外增殖;SEB活化的淋巴细胞对ConA、LPS和IL-2的二次应答反应能力消失,细胞增殖的OD570nm值由一次应答反应的0.433±0.07分别下降到0.19±0.01、0.14±0.02和0.15±0.04(P<0.01)。ConA活化的淋巴细胞的二次应答反应依然存在并依赖IL-2。SEB活化的淋巴细胞是CD4+NK1.1+和CD8+NK1.1+NKT细胞,而不是CD4-CD8-NKT细胞。ConA活化的淋巴细胞是CD3+、CD4+和CD8+T淋巴细胞并包括了CD4-CD8-/CD3+NK1.1+NKT细胞。结论除了α-Calcer脂多糖类抗原能够活化NKT细胞,多肽类超抗原SEB也能活化NKT细胞并具有特异性免疫耐受功能。能够介导免疫耐受的NKT细胞亚群可能是SEB活化的CD4+、CD8+NKT细胞而不是CD4-CD8-/CD3+NK1.1+NKT细胞。
- 陈钰钟江徐健陈中才张继慧金婷
- 关键词：超抗原SEB免疫耐受
- 超抗原SEB活化的NKT细胞亚群形态和分化途径的研究被引量：4
- 2009年
- 目的:以NKT细胞形态和分化途径为焦点,研究超抗原SEB活化的NKT细胞亚群的特征。方法:C57BL/J小鼠脾细胞分别经SEB或者ConA诱导,收集体外扩增10d和5d的淋巴细胞以及获取正常黏附性巨噬细胞。用荧光抗体染色,流式细胞仪测定淋巴细胞和大淋巴细胞群表面CD69的表达、NKT细胞亚群百分数和不同NKT细胞亚群的分化途径。倒置显微镜400倍下比较大淋巴细胞的形态。结果:SEB活化的淋巴细胞和大淋巴细胞表面CD69分子表达由正常值的0.11%分别提高到55.00%和68.95%。大细胞群中CD8+和TCRVB8+NKT细胞亚群的百分数由原始的0.36%和0.81%分别提高到30.29%和31.48%。这些细胞位于流式细胞图的上部,是大体积细胞群。显微镜下显示SEB活化的大淋巴细胞体积不仅大于ConA活化的T淋巴细胞,而且比正常巨噬细胞大5倍以上,是非黏附性细胞。胞内质粒松散、胞质与核之比>1。SEB活化的CD8+和TCRVβ8+NKT细胞亚群均由T细胞直接分化而来。结论:SEB活化10d的NKT细胞亚群主要是CD8+NK1.1+和TCRVβ8+NK1.1+的NKT细胞。这些细胞是大体积淋巴细胞,应属于T细胞的亚群。
- 陈钰郭业磊钟江
- 关键词：超抗原细胞形态细胞分化
- 超抗原SEB活化耐受性NKT细胞亚群的研究被引量：7
- 2008年
- 目的:探讨超抗原SEB活化的效应细胞参与免疫耐受的NKT细胞亚群及分化特征。方法:采用C57BL/J小鼠脾细胞经SEB诱导,收集体外扩增10d的淋巴细胞为效应细胞,与刀豆蛋白(ConA)、脂多糖(LPS)和白介素-2(IL-2)共同培养3d,测定效应细胞对刺激剂的应答反应能力。在正常小鼠淋巴细胞与上述刺激剂反应的同时添加效应细胞,3d后测定效应细胞抑制正常淋巴细胞对刺激原的应答反应能力。用MTT染色方法记录细胞增殖的A值。以ConA活化的淋巴细胞做参照,用流式细胞术(FCM)解析了耐受性效应细胞中NKT细胞亚群并显示分化来源与功能的相关性。结果:与正常淋巴细胞对抗原应答反应能力相比,SEB活化的效应细胞对ConA、LPS和IL-2的应答反应能力明显降低,细胞生长的A值从正常组的0.80±0.04、0.60±0.03和0.55±0.07下降到0.60±0.05、0.30±0.05及0.27±0.04(P<0.01,n=3)。效应细胞抑制正常淋巴细胞对上述抗原的应答反应,尤其抑制ConA活化的T淋巴细胞的应答反应;A值分别由正常值降低到0.26±0.002、0.48±0.04及0.34±0.02(P<0.01,n=3)。效应细胞中CD4+NK1.1+、CD8+NK1.1+、TcRVβ8+/NK1.1+NKT细胞亚群显著增加(P<0.05和P<0.01,n=4)。ConA活化的淋巴细胞是T淋巴细胞并包括CD4-CD8-/CD3+NK1.1+NKT细胞。结论:超抗原SEB活化的耐受功能与CD4+NK1.1+、CD8+NK1.1+、TcRVβ8+NK1.1+NKT细胞亚群有关,它们由T细胞分化而来。CD4-CD8-/CD3+NK1.1+NKT细胞没有参与耐受性调节。
- 陈钰钟江徐健陈中才郭业磊金婷张继慧
- 关键词：超抗原SEB免疫耐受
