国家自然科学基金(30371510)
- 作品数：19 被引量：33H指数：3
- 相关作者：李根林刘月月王津津雷祥张娟美更多>>
- 相关机构：首都医科大学北京市神经外科科研究所北京大学更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金北京市自然科学基金国家高技术研究发展计划更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 人胚胎九个月视网膜组织超微形态学观察
- 2009年
- 目的观察人胚胎9个月时视网膜组织结构，探讨出生前期视网膜内神经元发育特征及意义。方法取因外伤自愿终止妊娠的9个月人胚胎2例4个眼球，1例孕周为35周，1例为36周。胎龄根据孕妇的末次月经及测量胚胎坐高而确定。每只眼球于后极部定位取材视网膜组织片4个，常规电子显微镜标本处理程序后进行观察。扫描电子显微镜（SEM）和透射电子显微镜（TEM）共观察视网膜样本8个。结果胚胎9个月时，外核层内含有5～6层感光细胞，外界膜外侧散在分布直径为2～3μm的球形膜性结构。感光细胞内节段排列紧密，其间可见含粘连小带的外界膜，内含线粒体，其外侧可见纤毛。外节段较小，其内可见少量排列欠整的盘膜结构。感光细胞为多形核，常和（或）异染色质比例接近。感光细胞轴突分支少而细，与内核层细胞间联系较少，未见典型的“突触”结构。视网膜内核层含4～5层胞体，多种胞核常和（或）异染色质密度不均，部分为分叶核，核膜清晰。内网状层内各神经细胞分枝细小，神经突起间联系较少，少见典型的“突触”结构。视网膜神经节细胞（RGC）数量较少，胞膜完整，胞浆内可见大的细胞核和粗面内质网，核膜为连续的双层膜性结构，核内以常染色质为主。视网膜内界膜为双层膜性结构，其内侧可见排列整齐的神经纤维层，表面分布直径2～3μm的微孔，其间散在4～5μm的较大孔隙。结论胚胎9个月时，人视网膜组织各层结构已经形成，但部分细胞结构和细胞联系尚未成熟，提示此期人视网膜发育仍处于发育重塑的重要时期。
- 李根林刘月月张湘雷祥
- 关键词：显微镜检查
- 结晶样视网膜色素变性的荧光素眼底血管造影特点分析被引量：5
- 2007年
- 目的分析结晶样视网膜色素变性的荧光素眼底血管造影(FFA)特点,进一步探索其发病机制。设计回顾性病例系列。研究对象结晶样视网膜色素变性患者。方法北京同仁医院眼科中心2004～2006年门诊诊断的结晶样视网膜色素变性患者32例。所有患者均行FFA检查。主要指标FFA表现。结果全部患者FFA显示后极部斑驳状、点状透见荧光。背景荧光部分增高,部分减弱。视盘高荧光或部分高荧光8例。2例环以低荧光。动脉血管变细18例,但其中仅3例出现血管充盈迟缓。4例视网膜血管闭塞,且全部位于周边部。3例视网膜后极部血管渗漏。仅1例出现无灌注区。6例黄斑拱环结构破坏或结构不清。结论结晶样视网膜色素变性的FFA特点显示:其病变主要是视网膜色素上皮细胞改变和脉络膜毛细血管的萎缩,同时累及神经视网膜及其视网膜血管组织。
- 张娟美朱晓青段安丽孟淑敏刘月月李根林
- 关键词：眼底荧光素血管造影
- 新生期视网膜色素上皮细胞动态吞噬功能及其α_vβ_5受体表达的研究被引量：3
- 2007年
- 目的观察新生期视网膜色素上皮细胞(retinal pigment epithelium,RPE)结合和内吞感光细胞外节段(photoreceptor outer segment,POS)能力的变化,为指导临床防治RPE相关病变提供依据。方法体外培养新生牛RPE,采用第3代(传2代)近融合RPE,加入异硫氢酸荧光素(fluorescein isothiocyanate-POS,FITC-POS)悬液,分别观察孵育1h、2h、3h、4h、5h、6h时RPE结合和内吞POS情况,同时检测胞膜上参与结合的整合素受体—αVβ5的表达情况。结果与POS孵育1h时,新生期RPE以结合POS为主,未见明显吞噬现象,但至第2h和第3h后,其吞噬能力迅速增强,并缓慢增加,达到平台期。而新生期RPE在前2h内未见明显的内吞现象,至第3h、4h、5h迅速增加,之后达到平台期,新生期RPE上参与结合阶段的受体-αVβ5受体表达丰富。结论在新生期RPE的吞噬周期中,孵育后的第2h和第3h主要是结合阶段,第3～5h主要是内吞阶段,提示其已具备较好的吞噬功能。
- 张娟美林丹樱刘月月马万云李根林
- 关键词：视网膜色素上皮细胞
- 枸杞对虹膜色素上皮细胞增殖活性干预作用的研究
- 2005年
- 目的寻找能够促进虹膜色素上皮细胞(irispigmentepithelium,IPE)增殖活性的相关因素。方法以激光共聚焦显微镜为研究手段,分析枸杞水煎液作用下,IPE线粒体膜电位(mitochondrialmembranepotential,MMP)的变化。通过MTT检测方法了解枸杞对IPE增殖的影响。结果枸杞水煎液在3.125mg/ml到50mg/ml范围内对IPE具有明显的促增殖作用,与剂量呈现相关性。枸杞使IPE细胞线粒体膜电位明显上升,浓度达到22mg/ml时细胞线粒体膜电位明显升高,后逐渐稳定。浓度达到54mg/ml时曲线再次上升。结论枸杞水煎液具有较好的IPE活性保护作用,对体外培养的IPE具有良好的促增殖作用。
- 王红李根林刘月月林丁王津津
- 关键词：虹膜色素上皮细胞枸杞细胞增殖药物干预
- 人胚胎7个月视网膜超微结构特点
- 2009年
- 目的探讨胚胎7个月时人视网膜组织结构和视网膜感光细胞、内核层细胞和神经节细胞的发育特征。方法以胚胎7个月(27～28孕周)因外伤自愿终止妊娠的流产人胚胎2例(4只眼球)为研究对象,每只眼球于后极部定位取视网膜组织片4个,常规电镜标本处理程序后分别行扫描电镜和透射电镜观察。结果人胚胎7个月视网膜分两层。外层为感光细胞层,内含大量线粒体,胞浆远端可见不完整外界膜,偶见纤毛结构,但未见感光细胞外节段。感光细胞层外侧面多见"棘突样"和"圆形"结构,散在"蘑菇状"形结构。部分感光细胞核呈分叶状,多数胞核以常染色质为主,核仁多偏心分布。外网状层疏松成网状,突触联系少见。内核层内可见胞核各异的多种细胞,部分胞核常/异染色质比例接近,核仁偏心分布。内网状层内可见细胞间电子致密带,但数量较少,未见典型的"突触结构"。神经节细胞数量稀少,部分核内异染色质多见,常染色质密度均匀,核膜清晰。神经纤维层内可见成束神经丝和较紧密排列的神经纤维。内界膜菲薄,部分结构呈节段样外观,其间散在直径为2～3μm的微孔。结论胚胎7个月时,人视网膜神经细胞结构幼稚于正常成熟期视网膜,神经细胞间功能联系不完善,提示此期人视网膜处于发育重塑的关键时期。
- 李根林刘月月张湘雷祥王津津
- 关键词：视网膜胚胎超微结构形态学
- MHC-Ⅱ分子在视网膜不同时期表达特点的实验研究
- 2008年
- 白大勇李根林刘月月王津津
- 关键词：分子C57BL/6小鼠视网膜移植免疫排斥反应
- 复方中药制剂抑制成纤维化增生作用的实验研究△被引量：3
- 2006年
- 目的观察复方中药制剂对结膜成纤维细胞增生的抑制作用,为临床防治增生性玻璃体视网膜病变提供新的治疗方法。方法以体外培养的兔结膜成纤维细胞作为研究对象,对照组用地塞米松、5-氟尿嘧啶、氢化可的松处理,实验组用丹苓(颗粒)冲剂及其君药(丹参、石决明)处理。48h后,用MTT法观察成纤维细胞增生情况及其细胞形态变化特点。结果丹苓(颗粒)冲剂和丹参在一定浓度范围内可抑制成纤维细胞增生,且成剂量依赖关系;石决明对成纤维细胞增生未见明显抑制作用。5-氟尿嘧啶、氢化可的松在一定浓度范围内可明显抑制成纤维细胞增生;地塞米松在低浓度时轻度刺激成纤维细胞增生,但在高浓度时抑制成纤维细胞的增生。丹苓(颗粒)冲剂和丹参作用48h后,部分成纤维细胞未能贴壁且收缩成圆形。结论丹苓(颗粒)冲剂可有效抑制成纤维细胞增生,有望成为防治增生性玻璃体视网膜病变的新药物。
- 张诚玥李根林刘月月
- 关键词：中药石决明MTT
- 正常和色素变性视网膜组织内神经营养素-3表达的变化被引量：1
- 2006年
- 目的 对视网膜变性动物模型（rd小鼠）和正常对照动物（C57BL小鼠）视网膜内的神经营养素-3（neurotrophin-3，NT-3）在出生后第0～4周龄5个时间点的表达情况进行观察对比，研究视网膜早期的生长发育规律，以及正常和基因型异常视网膜变性组织内NT-3的表达特点和变化规律，进而探讨NT-3在视网膜生长发育以及变性过程中的可能作用。方法 出生后第0～4周龄的rd小鼠（病变组）和C57BL小鼠（正常对照组）在每个时间点上各取8～10只处死后，即刻摘出眼球，行冰冻切片法制备视网膜切片，厚度为4μm，采用免疫组织化学法、光学显微镜联合灰度值半定量分析法，分别对不同时期、不同种类视网膜组织内NT-3含量进行测定。结果 出生后第2周龄时，2组小鼠视网膜的10层结构均基本形成，病变组较对照组差。出生后第3周龄时，病变组视网膜的内外核层（inner and outer nuclear layer，INL and ONL）已迅速退变为1层，对照组视网膜的INL和ONL已明显分出并最终成形。NT-3在对照组视网膜的节细胞层（ganglion cell layer，GCL）、内丛状层（inner plexiform layer，IPL）、INL以及ONL逐渐着染；而在病变组，NT-3仅在视网膜的GCL和IPL出现着染。在出生后第0，1周龄时，病变组视网膜内的NT-3含量均低于同期对照组（P〈0．05）。对照组的NT-3含量升高，而病变组的NT-3含量降低。结论 就生长发育而言，在正常小鼠视网膜组织，出生后第2周龄时初步形成视网膜10层结构，出生后第3周龄时视网膜具备典型的10层结构；在视网膜变性小鼠视网膜组织，出生后第2周龄时也初步形成视网膜10层结构，而出生后第3周龄时视网膜的内外核层迅速退变。就分布而言，正常视网膜组织内的NT-3在ONL、INL、IPL和GCL着染，而变性视网膜组织内的NT-3仅在IPL和GCL着染。就NT-3的表达而言，正常视网膜组织在出�
- 郑浩李根林刘月月
- 关键词：神经营养素-3视网膜变性免疫组织化学半定量分析
- 视网膜色素变性组织内脑源性神经营养因子动态变化的实验研究被引量：2
- 2008年
- 目的观察视网膜变性组织内脑源性神经营养因子（brain-derived neurotrophic factor，BDNF）的mRNA和蛋白的表达情况，研究视网膜早期的生长发育规律。进而探讨BDNF在视网膜生长发育以及变性过程中的可能作用。方法出生后0～4周龄的rd小鼠（病变组）和C57BL小鼠（正常对照组）在每个时间点各取10只处死后，即刻摘除眼球，显微手术操作取出视网膜组织。提取mRNA及蛋白。采取RT-PCR和Western blotting方法分别对不同时间点、不同组别的视网膜组织内BDNF mRNA和蛋白质的表达水平进行测定。结果BDNF mRNA表达在病变组呈现明显高于正常组的趋势（PN0周、2周、3周、4周时，2组相比P=0．000），但蛋白质表达低于正常组（PN0周、1周、2周、3周、4周时，2组相比P=0．000）。结论BDNF在视网膜变性过程中有保护视网膜感光细胞的作用。
- 张姗姗李根林刘月月
- 关键词：脑源性神经营养因子视网膜色素变性RT-PCRWESTERNBLOTTING
- 脑源性神经营养因子对视网膜神经细胞bcl-2蛋白动态表达的影响被引量：2
- 2009年
- 目的探讨脑源性神经营养因子(brain-derived neurotrophic factor,BDNF)对新生小牛视网膜神经细胞中bcl-2蛋白表达的影响。方法以新生小牛视网膜为研究对象,传代培养视网膜神经细胞。培养细胞传至第2代,以加入BDNF为BDNF组,不加任何药物为正常对照组。在接种后第3天BDNF组加入终浓度为50μg.L-1的BDNF,Western blotting法检测给药后第2天、第4天、第6天BDNF组和正常对照组不同时间点以及两组间对应时间点bcl-2蛋白表达变化情况。结果BDNF组bcl-2蛋白的表达在给药后第2天、第4天、第6天相对灰度值分别为0.447±0.052、0.355±0.039、0.287±0.031,呈现逐渐下降的趋势,第2天与第4天(t=2.788,P=0.016)、第2天与第6天(t=4.844,P=0.000)比较差异均有统计学意义,第4天与第6天(t=2.056,P=0.062)比较差异无统计学意义。而正常对照组分别为0.314±0.033、0.300±0.004、0.299±0.060,第2天与第4天(t=0.411,P=0.688)、第2天与第6天(t=0.441,P=0.667)、第4天与第6天(t=0.030,P=0.976)之间比较差异均无统计学意义。在给药后第2天,BDNF组bcl-2蛋白的表达强度与正常对照组相比差异具有统计学意义(t=4.022,P=0.002),第4天(t=1.645,P=0.126)、第6天(t=0.381,P=0.710)与相应对照组间比较差异均无统计学意义。结论BDNF能在短期内促进视网膜神经细胞bcl-2蛋白表达,提高细胞抗凋亡的能力,对延缓退行性视网膜疾病中的凋亡形成,开展视网膜神经细胞的神经保护具有一定作用。
- 雷祥张湘刘月月李根林
- 关键词：脑源性神经营养因子视网膜神经细胞新生小牛
