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基因表达谱芯片技术筛选舌癌转移相关基因被引量：3: 2006年; 目的应用基因表达谱芯片技术对口腔舌癌细胞系Tca8113及其脑转移细胞株Tb的基因表达谱进行对比分析并筛选差异表达基因,以期从基因水平上探讨舌癌转移机制。方法以舌癌细胞系Tca8113及其脑转移细胞株Tb作为研究肿瘤转移分子机制的模型,提取mRNA,逆转录为cDNA,用Cy3和Cy5荧光染料标记,制备成cDNA 探针,与基因表达谱芯片进行杂交扫描和分析;并应用RT-PCR技术对其中6个基因进行验证。结果在1152个基因表达谱的筛选中,37个基因表达有差异(2倍以上),其中15个基因表达水平上调,22个基因表达水平下调。 RT-PCR技术对其中6个基因表达差异的验证结果与基因芯片结果一致。结论舌癌细胞转移侵袭可能与多个基因相关。; 朱秀丽吴军正温德升郭青玉王静; 关键词：基因芯片肿瘤转移相关基因

基质金属蛋白酶-1 shRNA真核表达载体的构建: 2012年; 目的构建基质金属蛋白酶-1(MMP-1)特异的RNA干扰质粒载体。方法根据GenBank数据库提供的MMP-1基因核苷酸序列,选择设计能转录短发夹状RNA(Short hairpin RNAs,shRNA)的DNA序列,并与pWH1质粒载体连接,用酶切的方法进行鉴定;将构建成功的特异性表达载体(pWH1-MMP1)稳定转染至人腺样囊性癌ACC-M细胞系后,应用RT-PCR、免疫组织化学及Western Blot对细胞MMP1的表达进行检测。结果在成功转染pWH1-ACC-M表达载体的ACC-M细胞中,MMP1 mRNA和蛋白的表达明显降低。结论成功构建了MMP1特异性shRNA表达载体,可有效地沉默MMP1基因,为进一步研究MMP1表达与腺样囊性癌增殖和转移的相关性奠定了一定的实验基础。; 朱秀丽朱晓英郭青玉王静温德升吴军正; 关键词：涎腺腺样囊性癌短发夹状RNA 基质金属蛋白酶1

TGF-β1 shRNA对人涎腺黏液表皮样癌Ms细胞生长及粘附能力的影响被引量：2: 2010年; 目的:研究TGF_β1shRNA对人涎腺黏液表皮样癌脊髓转移株Ms(metastatic cells of mucoepidermoid carcinoma in spinal cord,MS)细胞生长及粘附的影响。方法:体外培养Ms细胞、稳定转染空载体的Ms细胞、稳定转染TGF_β1shRNA的Ms细胞,利用细胞计数法,克隆形成实验检测细胞增殖能力的变化;同质粘附实验与异质粘附实验测定细胞的粘附率;考马斯亮蓝染色法检测细胞骨架的改变及免疫荧光法检测Ezrin蛋白的表达。结果:稳定转染TGF_β1shRNA的Ms细胞、稳定转染空载体的Ms细胞和Ms细胞的群体倍增时间分别为30.8,28.8和29.0h;平板克隆形成率分别为14.2%,24.5%和25.1%。Ms细胞转染了TGF_β1shRNA后,30min同质粘附率升高了18.6%;细胞在FN基质表面上1h的粘附抑制率为35.3%。与未转染组、转染空载体组相比,转染TGF_β1shRNA组细胞生长缓慢(P<0.05),同质粘附能力增强(P<0.05),异质粘附能力降低(P<0.05),细胞骨架明显改变,Ezrin蛋白表达降低。结论:TGF_β1shRNA能影响Ms细胞在体外的生长和粘附能力,其机制可能与细胞骨架和Ezrin蛋白表达的改变有关。; 王静陈健吴军正马铭赵媛; 关键词：TGF-Β1 SHRNA 黏液表皮样癌粘附

基质金属蛋白酶-1在人涎腺腺样囊性癌细胞中的表达被引量：3: 2012年; 目的:测定基质金属蛋白酶-1(MMP-1)在人涎腺腺样囊性癌不同转移力细胞系中的表达。方法:以人涎腺腺样囊性癌ACC-2细胞系及其高转移株ACC-M作为研究肿瘤转移分子机制的模型,采用免疫组化法和蛋白印迹(Western blot)法检测MMP-1的蛋白表达水平。结果:MMP-1在ACC-M细胞中的表达水平高于ACC-2细胞。结论:MMP-1在人涎腺腺样囊性癌的侵袭转移过程中可能发挥作用。; 朱秀丽郭青玉温德升王静吴军正; 关键词：MMP-1 肿瘤转移

转化生长因子β1在人涎腺黏液表皮样癌高低转移细胞系中的表达被引量：4: 2006年; 目的探讨转化生长因子(TGF)βl在人涎腺黏液表皮样癌高、低转移细胞株的差异表达。方法应用基因芯片技术、反转录(RT)-PCR、免疫组化、免疫印迹杂交等方法从基因水平和蛋白水平检测TGF-βl的表达。结果基因芯片技术、RT-PCR、免疫组化、Western blot结果都证实TGF-β1在人涎腺黏液表皮样癌脊髓转移株高表达,在低转移株不表达。结论TGF-β1的表达上调可能与人涎腺黏液表皮样癌转移有关。; 王静吴军正郭富平魏红宇; 关键词：黏液表皮样癌涎腺转化生长因子-Β1

TGF-β1shRNA对高转移性人涎腺粘液表皮样癌生物学行为的影响: 目的:建立TGF-β1 shRNA稳定转染涎腺粘液表皮样癌细胞株,观察转染质粒对高转移性人涎腺粘液表皮样癌生物学行为的影响。方法:将TGF-β 1 shRNA转染人涎腺粘液表皮样癌Ms 细胞后,以G418（600 mg／...; 王静吴军正魏红宇付善民郭富平温德升; 关键词：转化生长因子-Β1 SHRNA 涎腺粘液表皮样癌; 文献传递

窖蛋白1 mRNA在人舌癌细胞系中的表达被引量：3: 2005年; 目的:检测窖蛋白1基因m RNA在舌癌不同转移力细胞系中的表达,初步探讨窖蛋白1在肿瘤发生发展中的作用。方法:以舌鳞状细胞癌Tca8113细胞系及其脑转移株Tb作为研究肿瘤转移分子机制的模型,应用RT-PCR技术检测窖蛋白1m RNA的表达。结果:窖蛋白1m RNA在两种细胞中均有表达,其在Tb细胞中的表达水平高于Tca8113细胞。结论:窖蛋白1可能在舌癌转移过程中发挥作用。; 朱秀丽吴军正温德升吴元明; 关键词：窖蛋白舌癌细胞肿瘤转移

趋化因子受体CXCR4 shRNA真核表达载体的构建被引量：1: 2007年; 目的:构建趋化因子受体(CXCR4)特异的RNA干扰质粒载体。方法:根据GenBank数据库提供的CXCR4基因核苷酸序列,选择设计能转录短发夹状RNA(short hairpin RNAs,shRNA)的DNA序列,并与pWH1质粒载体连接,用酶切的方法进行鉴定;将构建成功的特异性表达载体(pWH1-CXCR4)稳定转染至人涎腺黏液表皮样癌Mc3细胞系,并应用RT-PCR和流式细胞术对细胞CXCR4的表达进行检测。结果:与Mc3细胞和转染空白质粒pWH1 Mc3细胞相比,转染pWH1-CXCR4表达载体的Mc3细胞CXCR4 mRNA和蛋白的表达明显降低。结论:构建的CXCR4特异性shRNA表达载体可有效的沉默CXCR4基因,为进一步研究CX-CR4表达对涎腺黏液表皮样癌增殖和转移的意义及治疗涎腺黏液表皮样癌奠定了基础。; 温德升朱秀丽张红菊郭青玉王静吴军正; 关键词：涎腺黏液表皮样癌短发夹状RNA 趋化因子受体4

白血病抑制因子受体在人涎腺腺样囊性癌细胞系中的表达: 2005年; 目的 :探讨白血病抑制因子受体 (LIFR)与人涎腺腺样囊性癌转移的相关性。方法 :以涎腺腺样囊性癌细胞系ACC 2及其肺高转移株ACC M作为研究肿瘤转移分子机制的模型 ,应用RT PCR技术和免疫组化方法检测LIFR的表达。结果 :RT PCR检测表明LIFRmRNA在肺高转移细胞株ACC M细胞中的表达低于在ACC 2细胞中的表达 ,免疫组化检测表明LIFR蛋白在ACC M细胞中表达降低。结论 :LIFR在涎腺腺样囊性癌转移过程中可能发挥抑制作用。; 朱秀丽吴军正温德升吴元明; 关键词：白血病抑制因子受体涎腺腺样囊性癌肿瘤转移

TGF-β1 shRNA对人涎腺粘液表皮样癌Ms细胞增殖的影响被引量：4: 2007年; 目的:用TGF-β1shRNA稳定转染涎腺粘液表皮样癌Ms细胞,观察shRNA的基因沉默效应及其对细胞增殖的影响。方法:用Liperfetamine2000将TGF-β1shRNA转染Ms细胞,以G418(600mg/L)筛选21d,挑出单克隆获得稳定转染细胞系。RT-PCR法和免疫组化方法检测细胞中TGF-β1mRNA和蛋白的表达。利用MTT、软琼脂克隆形成实验、流式细胞仪、透射电镜等检测转染前后Ms细胞的增殖和形态特点,以空载体转染和未转染细胞为对照。结果:获得稳定转染TGF-β1shRNA的细胞系。TGF-β1shRNA阻断了Ms细胞中TGF-β1mRNA和蛋白的表达。未转染组,转染空载体组和转染shRNA组,细胞倍增时间分别为39.3h,40.1h和45.3h,Gl期细胞所占比例分别为54.2%,56.8%和61.7%,增殖指数PI分别为0.46,0.43和0.38;软琼脂克隆形成率分别为34.7%,33.3%和15.8%;超微结构观察见转染细胞细胞器扩张和肿胀,核浆比例变小,核仁减小,数目减少,核分裂像减少。结论:应用shRNA沉默TGF-β1基因可抑制Ms细胞的增殖。; 王静吴军正魏红宇付善民郭富平温德升; 关键词：转化生长因子-Β1 SHRNA 涎腺粘液表皮样癌

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国家自然科学基金(30371551)

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