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河北省自然科学基金(H2013209327)

作品数：14 被引量：40H指数：4
相关作者：郝礼森张晓岚张家琪魏月李立文更多>>
相关机构：华北理工大学河北联合大学附属医院河北医科大学第二医院更多>>
发文基金：中国肝炎防治基金河北省自然科学基金更多>>
相关领域：医药卫生更多>>

文献类型

  • 13篇中文期刊文章

领域

  • 13篇医药卫生

主题

  • 13篇星状细胞
  • 13篇细胞
  • 13篇肝星状细胞
  • 12篇活化
  • 7篇体外
  • 7篇体外活化
  • 6篇蛋白
  • 6篇第10号染色...
  • 6篇染色
  • 6篇染色体
  • 5篇信号
  • 4篇活化肝星状细...
  • 3篇信号传导
  • 3篇骨架蛋白
  • 3篇过表达
  • 3篇PTEN
  • 2篇动蛋白
  • 2篇信号转导
  • 2篇鼠肝
  • 2篇纽蛋白

机构

  • 11篇华北理工大学
  • 2篇河北医科大学...
  • 2篇河北联合大学...
  • 1篇苏州大学

作者

  • 2篇张晓岚
  • 2篇郝礼森
  • 1篇王静
  • 1篇莫艳波
  • 1篇李立文
  • 1篇魏月
  • 1篇张家琪

传媒

  • 3篇中华肝脏病杂...
  • 2篇实用医学杂志
  • 1篇中国现代医学...
  • 1篇临床肝胆病杂...
  • 1篇中国病理生理...
  • 1篇基础医学与临...
  • 1篇中国应用生理...
  • 1篇中国全科医学
  • 1篇西部医学
  • 1篇华北理工大学...

年份

  • 1篇2022
  • 1篇2021
  • 1篇2019
  • 1篇2018
  • 5篇2017
  • 2篇2016
  • 1篇2015
  • 1篇2014
共 14 条 记 录，以下是 1-10
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排序方式：
腺病毒介导的shRNA下调PTEN表达对活化肝星状细胞骨架蛋白F-actin的影响被引量：5
2017年
目的:探讨腺病毒介导的shRNA下调第10号染色体缺失的磷酸酶张力蛋白同源物(PTEN)基因表达对体外培养的活化肝星状细胞(HSC)纤丝状肌动蛋白(F-actin)的影响。方法:体外培养大鼠活化HSC(HSCT6),将携带靶向PTEN的RNA干扰序列[短发夹RNA(shRNA)]并表达绿色荧光蛋白(GFP)的重组腺病毒AdshRNA/PTEN及仅表达GFP的对照空病毒Ad-GFP转染HSC,实时荧光定量PCR及Western blotting实验检测HSC的PTEN mRNA及蛋白表达;利用激光扫描共聚焦显微镜检测HSC的形态、F-actin的分布及荧光强度、伪足以及应力纤维的变化,并采用钙荧光探针Rhod-2/AM负载检测HSC内Ca^(2+)浓度的变化。实验分为对照(control)组(在腺病毒转染步骤以DMEM代替腺病毒液)、Ad-GFP组(转染表达GFP的空病毒Ad-GFP)和Ad-shRNA/PTEN组(转染重组腺病毒Ad-shRNA/PTEN)。结果:靶向PTEN的shRNA成功转染体外活化HSC,显著下调HSC的PTEN mRNA及蛋白表达(P<0.05);PTEN表达下调使活化HSC呈星形向四周伸展,F-actin排列紧密规则,数量增多,伪足充分向外伸展,应力纤维丝增长增粗;Ad-shRNA/PTEN组F-actin的荧光强度较control组及Ad-GFP组显著增强(P<0.05),而control组与Ad-GFP组间差异无统计学显著性;Ad-shRNA/PTEN组HSC内Ca^(2+)浓度较control组及Ad-GFP组明显升高(P<0.05),而control组与Ad-GFP组间差异无统计学显著性。结论:PTEN表达下调使体外活化肝星状细胞骨架蛋白F-actin的形成及细胞骨架的重构增强,并增加了HSC内的Ca^2浓度。
郝礼森宋小杰章广玲王静刘博张朋垒张明婷靳丽敏
关键词：肝星状细胞细胞骨架
磷酸酶张力蛋白同源物基因表达下调对体外活化肝星状细胞p130Crk相关底物蛋白及桩蛋白信号转导的影响
2019年
目的探讨腺病毒介导的短发夹RNA(shRNA)下调第10号染色体缺失的磷酸酶张力蛋白同源物基因(PTEN)表达对体外活化肝星状细胞(HSC)p130Crk相关底物蛋白(p130Cas)及桩蛋白信号转导的影响。方法体外培养活化大鼠肝星状细胞系HSC-T6,以腺病毒为载体,将靶向PTEN的shRNA瞬时转染体外活化HSC,构建体外活化HSC的PTEN低表达模型;采用Western blot及实时荧光定量PCR技术检测活化HSC的PTEN、p130Cas及桩蛋白的蛋白及mRNA表达。实验分组:对照组:以DMEM代替腺病毒液转染HSC;Ad-绿色荧光蛋白(GFP)组:转染仅表达GFP的空病毒Ad-GFP;Ad-shRNA/PTEN组:转染携带靶向PTEN的shRNA并表达GFP的重组腺病毒Ad-shRNA/PTEN。多组间均数比较采用单因素方差分析,组间比较采用LSD检验。结果靶向PTEN的shRNA成功转染并显著下调体外活化HSC的PTEN蛋白及mRNA表达(P<0.05),体外活化HSC的PTEN低表达模型成功构建。3组HSC的P130Cas RNA表达比较,以对照组HSC的P130Cas mRNA表达量为1,则Ad-GFP组和Ad-shRNA/PTEN组HSC的P130Cas mRNA相对对照组的表达倍数分别为1.01倍、1.52倍,Ad-shRNA/PTEN组HSC的P130Cas mRNA表达明显高于对照组及Ad-GFP组(P<0.05),而对照组与Ad-GFP组之间差异无统计学意义(P>0.05);3组HSC的p130Cas蛋白表达比较,Ad-shRNA/PTEN组(0.93±0.08)高于对照组(0.74±0.07)及Ad-GFP组(0.72±0.02),P<0.05,而Ad-GFP组与对照组之间差异无统计学意义(P>0.05)。3组HSC的桩蛋白mRNA表达比较,以对照组HSC的桩蛋白mRNA表达量为1,则Ad-GFP组及Ad-shRNA/PTEN组HSC的桩蛋白mRNA相对对照组的表达倍数分别为0.97倍、1.58倍,Ad-shRNA/PTEN组HSC的桩蛋白mRNA表达高于对照组及Ad-GFP组(P<0.05),对照组与Ad-GFP组之间差异无统计学意义(P>0.05);3组HSC的桩蛋白蛋白表达比较,Ad-shRNA/PTEN组(0.91±0.05)高于对照组(0.46±0.03)及Ad-GFP组(0.50±0.04),P<0.05,而对照组与Ad-GFP之间差异无统计学意义(P>0.05)。结论PTEN表达下调可显著增强体外活�
郝礼森张朋垒刘博章广玲陈静宋洁张明婷靳丽敏
关键词：肝星状细胞桩蛋白信号传导
PTEN表达下调促进体外活化大鼠肝星状细胞黏附被引量：2
2017年
目的探讨腺病毒介导的短发夹RNA(shRNA)下调第10号染色体缺失的磷酸酶张力蛋白同源物PTEN基因的表达对体外培养的活化肝星状细胞(HSC)黏附的影响及其信号传导机制。方法体外培养活化大鼠肝星状细胞系HSC-T6,以腺病毒为载体将靶向PTEN的RNA干扰(shRNA)瞬时转染HSC;实验分为3组:1)对照组,在腺病毒转染时以DMEM代替病毒液;2)Ad-GFP组,转染仅表达绿色荧光蛋白(GFP)的空病毒Ad-GFP;3)Ad-shRNA/PTEN组,转染携带靶向PTEN的shRNA并表达GFP的重组腺病毒Ad-shRNA/PTEN。用实时荧光定量PCR法检测HSC的PTEN mRNA表达;Western blot检测HSC的PTEN、黏着斑激酶(FAK)、磷酸化FAK[p-FAK(Tyr397)]蛋白表达;甲苯胺蓝染色法及四甲基偶氮唑盐(MTT)法测定HSC黏附能力。结果腺病毒感染HSC 48 h,Ad-shRNA/PTEN组PTEN蛋白及mRNA表达明显低于对照组及Ad-GFP组(P<0.05);Ad-shRNA/PTEN组HSC的p-FAK(Tyr397)表达较对照组及Ad-GFP组显著升高(P<0.05);Ad-shRNA/PTEN组HSC黏附细胞数及黏附率较对照组及Ad-GFP组明显增加(P<0.05)。结论 PTEN表达下调可通过上调FAK信号传导活性促进体外活化HSC的黏附。
郝礼森张家琪刘博章广玲靳丽敏张明婷张朋垒
关键词：肝星状细胞PTEN细胞黏附
肝纤维化逆转过程中肝星状细胞凋亡及其相关途径被引量：5
2016年
肝纤维化是各种慢性肝病发展为肝硬化的共有病理改变。随着对肝纤维化的深入研究，已发现肝纤维化、甚至早期肝硬化是可以逆转的［1］；并且已证实肝星状细胞（hepatic stellate cells，HSC）是参与肝纤维化过程中的最重要细胞，其活化及自身增殖和胶原合成增加是肝纤维化形成的中心环节［2］；但肝纤维化恢复期H SC凋亡明显增多。因此，抑制 H SC活化、增殖或诱导 H SC凋亡是逆转肝纤维化的关键所在。而 H SC凋亡则主要通过线粒体途径、死亡受体途径、内质网途径及神经生长因子途径实现，现将肝纤维化逆转过程中的肝星状细胞凋亡及其途径做一综述。
魏月郝礼森王玉兰
关键词：肝纤维化逆转凋亡途径肝星状细胞
腺病毒介导的shRNA下调PTEN表达对活化肝星状细胞微丝结合蛋白vinculin、filamin A及cortactin的影响
2022年
目的探讨腺病毒介导的shRNA下调第10号染色体缺失的磷酸酶张力蛋白同源物基因(PTEN)表达对活化肝星状细胞(HSC)的纽蛋白(vinculin)、细丝蛋白A(filamin A)及皮层肌动蛋白(cortactin)的影响。方法体外培养活化大鼠肝星状细胞系HSC-T6,将携带靶向PTEN的RNA干扰序列[短发夹RNA(short hairpin RNA,shRNA)]的重组腺病毒Ad-shRNA/PTEN及对照空病毒Ad-GFP转染HSC;采用实时荧光定量PCR及Western blot技术检测各组HSC的PTEN mRNA及蛋白表达;借助激光扫描共聚焦显微镜,采用免疫荧光法检测各组HSC的vinculin、filamin A及cortactin表达变化,并利用Image-pro plus 6.0软件进行图像分析处理,计算所测蛋白荧光表达的积分光密度值(IOD)。实验分为3组:对照组(在腺病毒转染步骤以DMEM代替腺病毒液)、Ad-GFP组(转染仅表达绿色荧光蛋白的空病毒Ad-GFP)、Ad-shRNA/PTEN组(转染携带靶向PTEN的shRNA并表达绿色荧光蛋白的重组腺病毒Ad-shRNA/PTEN)。3组间均数比较采用单因素方差分析,组间比较采用LSD检验。结果靶向PTEN的shRNA成功转染并显著下调HSC的PTEN mRNA及蛋白表达(P<0.05);HSC的vinculin主要表达于细胞质,Ad-shRNA/PTEN组HSC的vinculin荧光IOD(19758.83±1520.60)较对照组(7737.16±279.93)及Ad-GFP组(7725.50±373.03)显著升高(P<0.05),而对照组与Ad-GFP组之间HSC的vinculin荧光IOD差异无统计学意义(P>0.05)。3组HSC的filamin A荧光IOD差异无统计学意义(P>0.05),但3组HSC的filamin A亚细胞分布发生了变化,Ad-shRNA/PTEN组HSC的filamin A主要分布于细胞质,而对照组和Ad-GFP组HSC的filamin A主要位于细胞核,Ad-shRNA/PTEN组HSC的filamin A核质比(0.60±0.15)明显低于对照组(1.20±0.15)及Ad-GFP组(1.08±0.23),P<0.05;而对照组与Ad-GFP组之间HSC的filamin A核质比差异无统计学意义(P>0.05)。3组HSC的cortactin主要分布于细胞质,Ad-shRNA/PTEN组HSC的cortactin荧光IOD(54688.50±2095.53)较对照组(22959.94±1710.42)及Ad-GFP组(22547.11±1588.72
郝礼森宋洁张明婷宋小杰蒋美钰季景秀莫艳波王静
关键词：星状细胞细丝蛋白A纽蛋白皮层肌动蛋白
野生型PTEN过表达对体外活化大鼠肝星状细胞ERK信号转导的影响被引量：1
2017年
目的探讨野生型第10号染色体缺失的磷酸酶张力蛋白同源物基因(PTEN)过表达对体外活化大鼠肝星状细胞(HSC)的细胞外信号调节激酶(ERK)信号转导的影响。方法利用瞬时转染技术,以腺病毒为载体,将野生型PTEN基因转染体外培养的活化大鼠HSC;采用Western blot及实时荧光定量PCR技术检测HSC的PTEN、ERK1蛋白及mRNA表达;并应用Western blot技术检测HSC的磷酸化ERK(p-ERK)表达。结果外源性野生型PTEN基因在活化HSC大量表达,并显著下调HSC的p-ERK表达(P<0.05),而对HSC的ERK1蛋白及mRNA表达均无影响(P>0.50)。结论野生型PTEN过表达通过抑制ERK的磷酸化负性调控体外活化大鼠HSC的ERK信号转导。
郝礼森刘博宋小杰陈静章广玲莫艳波张朋垒靳丽敏
关键词：肝星状细胞细胞外信号调节激酶
肝星状细胞活化过程中的信号转导被引量：13
2015年
肝星状细胞(HSC)是肝脏的主要纤维生成细胞,其活化增殖,进而产生大量细胞外基质,是肝纤维化形成的中心环节。随着对肝纤维化的深入研究,HSC活化过程中所涉及的信号转导已成为研究热点。归纳了HSC活化过程中所涉及的主要信号转导,并介绍了近年来的相关研究进展。相信随着对这些信号转导的深入研究,肝纤维化的防治必将取得新突破。
任昌镇郝礼森
关键词：肝硬化肝星状细胞活化信号传导
PTEN过表达及突变对活化肝星状细胞黏着斑激酶信号转导的影响研究被引量：3
2016年
目的探讨过表达的野生型第10号染色体缺失的磷酸酶张力蛋白同源物基因(PTEN)及其突变体G129E(仅保留蛋白磷酸酶活性而丧失脂质磷酸酶活性)对活化肝星状细胞(HSC)黏着斑激酶(FAK)信号转导的影响。方法 2014年12月—2015年6月,利用瞬时转染技术,以腺病毒为载体将野生型PTEN及其突变体G129E转染到体外培养的活化HSC;实验分为4组:对照组:腺病毒转染时以DMEM基础培养基代替腺病毒;Ad-GFP组:转染表达绿色荧光蛋白(GFP)的载体空病毒Ad-GFP;Ad-PTEN组:转染携带野生型PTEN并表达GFP的重组腺病毒Ad-PTEN;Ad-G129E组:转染携带G129E并表达GFP的重组腺病毒Ad-G129E。应用Western blotting法检测活化HSC中PTEN、FAK、磷酸化FAK〔p-FAK(Tyr397)〕表达,实时荧光定量PCR法检测活化HSC中PTEN、FAK mRNA表达。结果腺病毒转染活化HSC 48 h,4组活化HSC中PTEN及其mRNA表达比较,差异有统计学意义(P<0.05);其中Ad-PTEN组和Ad-G129E组活化HSC中PTEN及其mRNA表达高于对照组和Ad-GFP组(P<0.05);对照组与Ad-GFP组、Ad-PTEN组与Ad-G129E组活化HSC中PTEN及其mRNA表达比较,差异无统计学意义(P>0.05)。4组活化HSC中FAK及其mRNA表达比较,差异无统计学意义(P>0.05)。4组活化HSC中p-FAK(Tyr397)表达比较,差异有统计学意义(P<0.05);其中Ad-PTEN组和Ad-G129E组活化HSC中p-FAK(Tyr397)表达低于对照组和Ad-GFP组(P<0.05);对照组与Ad-GFP组、Ad-PTEN组与Ad-G129E组活化HSC中p-FAK(Tyr397)表达比较,差异无统计学意义(P>0.05)。结论过表达的野生型PTEN及其突变体G129E均可通过抑制活化HSC的FAK磷酸化负性调控体外活化HSC的FAK信号转导。
魏月郝礼森任昌镇章广玲陈静王静莫艳波张明婷
关键词：肝星状细胞黏着斑激酶信号传导
RNA干扰下调PTEN表达对体外活化肝星状细胞α-微管蛋白及γ-微管蛋白表达的影响
2021年
目的:探讨RNA干扰下调第10号染色体缺失的磷酸酶张力蛋白同源物基因(PTEN)表达对体外活化肝星状细胞(HSC)α-微管蛋白(α-tubulin)及γ-微管蛋白(γ-tubulin)表达的影响。方法:2017年9月至2018年3月,以腺病毒为载体将靶向PTEN的RNA干扰序列—短发夹RNA(shRNA)转染体外培养的活化大鼠肝星状细胞系HSC-T6,实验分为3组:对照组(Control组,以DMEM代替腺病毒液进行腺病毒转染)、Ad-GFP组(以对照空病毒Ad-GFP转染体外活化HSC)、Ad-shRNA/PTEN组(以携带靶向PTEN的shRNA的重组腺病毒Ad-shRNA/PTEN转染体外活化HSC),每组设6个复孔。采用Western blot及实时荧光定量PCR技术检测各组HSC的PTEN蛋白及mRNA表达;免疫荧光法检测各组HSC的α-tubulin及γ-tubulin表达。结果:与对照组及Ad-GFP组比较,Ad-shRNA/PTEN组HSC的PTEN蛋白及mRNA表达明显降低(P<0.05)。HSC的α-tubulin主要表达于细胞浆,对照组和Ad-GFP组HSC的α-tubulin呈丝网状、辐射状均匀分布于细胞核周围,而Ad-shRNA/PTEN组HSC的α-tubulin向细胞两端末梢逐渐聚集并在细胞两端稍增多;与对照组HSC的α-tubulin荧光积分光密度值(IOD)(40803.00±2006.59)及Ad-GFP组HSC的α-tubulin荧光IOD(42302.50±2537.93)比较,Ad-shRNA/PTEN组HSC的α-tubulin荧光IOD(101495.17±5005.39)明显升高(P<0.05),而对照组与Ad-GFP组HSC的α-tubulin荧光IOD比较差异无统计学意义(P>0.05)。HSC的γ-tubulin也主要表达于胞浆,并在胞浆中有散在点状聚集,但Ad-shRNA/PTEN组HSC的γ-tubulin点状聚集更明显;与对照组HSC的γ-tubulin荧光IOD(20410.68±1815.53)及Ad-GFP组HSC的γ-tubulin荧光IOD(20137.50±1469.49)比较,Ad-shRNA/PTEN组HSC的γ-tubulin荧光IOD(41310.83±1544.68)明显升高(P<0.05),而对照组与Ad-GFP组HSC的γ-tubulin荧光IOD比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论:下调体外活化肝星状细胞的PTEN表达可显著增加其α-微管蛋白及γ-微管蛋白表达,并引起上述微管蛋白在胞浆中的分布发生变化。
郝礼森季景秀蒋美钰张明婷张晓岚展宗媛杨小师陈盼盼
关键词：微管Α-微管蛋白Γ-微管蛋白
肿瘤抑制基因PTEN对体外活化肝星状细胞骨架蛋白vinculin的影响被引量：1
2018年
目的探讨第10号染色体缺失的磷酸酶张力蛋白同源物基因(PTEN)表达变化对体外活化肝星状细胞(HSC)纽蛋白(vinculin)的影响。方法分别将含有野生型PTEN基因及含有靶向PTEN的RNA干扰序列短发夹RNA(shRNA)的重组腺病毒转染体外培养的活化大鼠肝星状细胞系HSC-T6,构建体外活化大鼠肝星状细胞PTEN过表达及低表达模型;应用免疫荧光法并结合激光扫描共聚焦显微镜技术检测活化HSC的vinculin分布及表达。实验分组:(1)Control组:以无血清无抗生素的DMEM培养液代替腺病毒液转染体外活化HSC;(2)Ad-GFP组:以仅带有绿色荧光蛋白(GFP)基因的载体空病毒Ad-GFP转染体外活化HSC;(3)Ad-PTEN组:以带有GFP基因并携带野生型PTEN基因的重组腺病毒Ad-PTEN转染体外活化HSC;(4)Ad-shRNA/PTEN组:以带有GFP基因并携带靶向PTEN的shRNA的重组腺病毒Ad-shRNA/PTEN转染体外活化HSC。结果外源性野生型PTEN基因及靶向PTEN的shRNA成功转染体外活化HSC,并成功构建体外活化肝星状细胞PTEN过表达及低表达模型。HSC的vinculin蛋白主要表达于胞浆,4组HSC的vinculin亚细胞分布未发生明显变化。Ad-PTEN组HSC的vinculin蛋白荧光强度(251.78±12.68)明显低于Control组(381.13±9.12)及Ad-GFP组(383.87±12.15),P<0.05;而Ad-shRNA/PTEN组HSC的vinculin蛋白荧光强度(770.77±20.12)显著高于Control组及Ad-GFP组(P<0.05);但Control组与Ad-GFP组之间HSC的vinculin蛋白荧光强度差异无统计学意义(P>0.05)。结论 PTEN表达变化对体外活化肝星状细胞骨架蛋白vinculin的亚细胞分布无明显影响,但PTEN过表达可下调体外活化肝星状细胞骨架蛋白vinculin的表达,而PTEN低表达则可上调体外活化肝星状细胞骨架蛋白vinculin的表达。
郝礼森张明婷王玉兰宋小杰宋洁章广玲莫艳波靳丽敏张朋垒
关键词：肝星状细胞纽蛋白
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