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国家自然科学基金(39680032)
作品数:
3
被引量:18
H指数:2
相关作者:
魏东芝
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华东理工大学...
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2001
2篇
2000
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反义寡核苷酸-萘二酰亚胺偶联物对多药耐药性肿瘤细胞的抑制作用
被引量:3
2001年
目的:针对人表皮癌细胞阿霉素耐药株( KB- A- 1)的多药耐药性问题,探讨天然反义寡核苷酸与寡核苷酸-萘二酰亚胺偶联物对多药耐药性肿瘤细胞的抑制作用及 mdr1基因表达的影响。方法:利用 S-烷基化反应成功地合成了反义寡核苷酸-萘二酰亚胺偶联物,并通过 MTT法和 ELISA法测定天然反义寡核苷酸与寡核苷酸-萘二酰亚胺偶联物对多药耐药性肿瘤细胞的抑制作用。结果:作用靶点不同的反义寡核苷酸对 KB- A- 1细胞生长的抑制能力不同。针对 mdr1基因翻译起始区的寡核苷酸片段 1- 4对 KB- A- 1细胞生长的抑制率分别为 13.34%、 14.32%、 26 00%和 25.37%,其中片段 3的效果最好( P< 0.01)。与单独使用反义寡核苷酸相比较,萘二酰亚胺对寡核苷酸的共价修饰显著地提高了反义寡核苷酸对 KB- A- 1细胞生长的抑制。凝胶电泳实验结果也表明萘二酰亚胺对寡核苷酸的化学修饰能提高寡核苷酸抵抗核酸酶降解的能力。寡核苷酸及寡核苷酸-萘二酰亚胺偶联物专一性地抑制 KB- A- 1细胞生长,而对非多药耐药性的 KB- 3- 1细胞株无明显影响,是由于寡核苷酸及寡核苷酸-萘二酰亚胺偶联物选择性地抑制 mdr1基因表达所致。 ELISA法检测结果表明寡核苷酸及寡核苷酸-萘二酰亚胺偶联物可使 KB- A- 1细胞膜表面的
李军生
魏东芝
周宇荀
钱江潮
朱冬晖
张元兴
关键词:
反义寡核苷酸
化学修饰
多药耐药性
肿瘤细胞
MTT法测定人表皮癌细胞的抗药性
被引量:15
2000年
在用MTT测定细胞存活率以研究人表皮癌细胞KB-3-1 及其抗阿霉素细胞株KB-A-1对化疗药物阿霉素、长春花碱和秋水仙碱的多药抗性时,发现培养基中血清浓度的变化对MTT法测定结果有影响。吸光值在血清浓度为w = 0.02 时最高,w = 0.30 时最低,w = 0.05~0.20 之间波动不大。而不加血清使甲酉尤溶解困难而产生误差。培养基中的血清(常为w = 0.10)不影响MTT法的结果,在完全培养基中用MTT法测定了两株细胞的抗药性。KB-A-1 对阿霉素、长春花碱和秋水仙碱的相对抗药性分别为KB-3-1 的176、45 和137 倍。MTT法可简便地用于抗癌药物的筛选。
钱江潮
魏东芝
陈笑岚
张嗣良
关键词:
MTT法
多药抗性
化疗药物
靶序列三链DNA对质粒pBR322的Amp^r基因表达的抑制
2000年
利用 Ca Cl2 法成功地将寡核苷酸导入大肠杆菌 JM1 0 9细胞。质粒 p BR32 2转化结果表明 ,寡核苷酸片段 5′- AGCGGGAATAAGGGAA- 3′在转化前 (或后 )与靶序列结合均能抑制 β-内酰胺酶基因的表达 ,细菌生长受到抑制。体外聚丙烯酰胺凝胶电泳结果表明 ,该片段能与靶序列形成三链结构。这些结果表明多聚嘌呤寡核苷酸是通过与靶序列形成三链 DNA来抑制β-内酰胺酶基因的表达。
李军生
魏东芝
张元兴
关键词:
寡核苷酸
三链DNA
Β-内酰胺酶基因
基因表达
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