国家自然科学基金(30471949)
- 作品数：7 被引量：34H指数：4
- 相关作者：傅松滨孟祥宁刘改云王佳曦王哲更多>>
- 相关机构：哈尔滨医科大学黑龙江省生物医药工程重点实验室北京大学更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家高技术研究发展计划国家教育部博士点基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- EGF通过激活FAK—PI3K／AKT途径促进肺癌细胞增殖被引量：3
- 2007年
- 目的探讨在EGF处理下，FAK—PI3K／AKT途径促进A549细胞增殖的作用。方法应用MTr法检测细胞的增殖，使用Western印迹检测FAK397位点及AKT的磷酸化水平，并应用RNAi干涉技术探讨各途径间的关系。结果MTT法证明EGF可以通过PI3K／AKT途径促进A549细胞的增殖，Westem印迹检测显示EGF处理可以促进FAK397位点和AKT的磷酸化。FAKRNAi结果表明EGF通过磷酸化FAK激活PI3K／AKT途径。结论EGF可以通过激活FAK—PI3K／AKT途径促进A549细胞增殖。
- 阿友孟祥宁刘改云傅松滨
- 关键词：EGFFAKP13KAKT
- 肺癌细胞系A549抗失巢凋亡的研究被引量：4
- 2007年
- 目的研究FAK调节肺癌细胞系A549抗失巢凋亡的功能和信号通路。方法应用光镜观察，Hoechst33342染核、电镜、Western印迹、RNA干涉技术、P13K的抑制剂，对FAK调节肺癌细胞A549抗失巢凋亡的功能和信号通路进行研究。结果发现肺癌细胞系A549具有抗失巢凋亡的能力；A549细胞悬浮培养时，FAKtyr-397／861／925的活性随时间的延长逐渐增加后降低，磷酸化的P13K和AKT表现出与其一致的活性变化；通过RNA干涉实验发现干涉组比对照组细胞出现明显的凋亡现象，同时P13K／AKT的磷酸化水平下降；P13K的抑制剂组比对照组出现更多的凋亡细胞。结论FAK在肺癌细胞A549抗失巢凋亡中发挥了重要作用，其抗失巢凋亡的机制是通过激活下游P13K／AKT通路来实现的。
- 刘改云孟祥宁王佳曦赵育桢王哲傅松滨
- 关键词：失巢凋亡肺癌FAKP13K/AKT
- 卵巢癌单克隆抗-抗独特型抗体32F2的制备及其特性研究
- 2007年
- 目的6B11是可模拟卵巢癌抗原的鼠源性抗独特型单克隆抗体,为了深入探讨其作为肿瘤疫苗的主动免疫机制,制备抗6B11的IgG型抗-抗独特型单克隆抗体并对其特性进行研究。方法以卵巢癌抗独特型抗体6B11作为免疫原,与载体钥孔槭血兰蛋白(KLH)偶联并辅以福氏佐剂,多次免疫同系Balb/c小鼠,通过杂交瘤技术将免疫脾细胞与骨髓瘤细胞Sp2/0融合;采用酶联免疫吸附实验(EL1SA)筛选杂交瘤细胞,经克隆化后建立稳定分泌鼠源性抗-抗独特型单克隆抗体的杂交瘤细胞株。秋水仙素法确认杂交瘤细胞染色体数目及形态,ELISA法鉴定抗体类型,采用非竞争酶免疫结合实验测定抗体亲和力,EL1SA、免疫组织化学方法检测抗-抗独特型单克隆抗体特异性结合抗原的性质。结果制备出一株能稳定分泌抗-抗独特型单克隆抗体的杂交瘤细胞株,命名为32F2。其染色体数目平均为103条,并有端着丝点和亚中部着丝点染色体,符合小鼠杂交瘤细胞特点。抗体类型为IgG1型,抗体亲和力约为2.3119×107L/mol,能够竞争抑制卵巢癌单克隆抗体COC166-9与原始抗原OC166-9的结合,免疫组织化学染色证实32F2鼠腹水与84.6%卵巢浆液性乳头状囊腺癌呈阳性染色,与COC166-9类似,表明32F2可与OC166-9抗原产生特异性结合。结论通过杂交瘤技术建立了分泌IgG1亚型的卵巢癌抗-抗独特型单克隆抗体的杂交瘤细胞株。对抗体的初步研究显示其能特异性结合初始抗原OC166-9,并能竞争抑制COC166-9与OC166-9的结合,属Ab1样Ab3,间接证实6B11为抗原内影像型抗体,具有模拟抗原作用。32F2的制备成功为进一步研究卵巢癌抗独特型疫苗6B11的作用机制打下了基础,并且该抗体具有潜在的临床治疗卵巢癌的价值。
- 倪俊昌晓红叶雪付天云张超崔恒
- 关键词：卵巢癌抗独特型抗体
- 黏着斑激酶被引量：2
- 2007年
- 黏着斑激酶是细胞基质-整合素信号通路的重要传递者，作为多种信号通路的枢纽，它可以直接参与细胞多种功能的调节。本文综述了FAK的结构、激活途径以及其与多种信号分子的相互作用，以便我们能更好地了解FAK的功能。
- 孟祥宁王柏春金焰白静傅松滨
- 关键词：黏着斑激酶整合素信号通路
- FAK与肿瘤关系的研究进展被引量：12
- 2005年
- FAK是细胞内一种重要的信号转导分子,参与调控肿瘤细胞的多种生物学行为。本文结合当前的研究进展着重总结了FAK与肿瘤之间的密切联系。
- 姬宏飞孟祥宁傅松滨
- 关键词：FAK肿瘤
- 野生型p53基因诱导凋亡相关基因ANNEXIN A2的表达研究被引量：6
- 2005年
- 目的探讨p53基因过表达介导不同转移潜能肿瘤细胞的凋亡分子机理,寻找与细胞凋亡和肿瘤转移的相关基因。方法应用mRNA差异显示方法分析腺病毒介导的野生型p53基因感染不同转移潜能的肺癌细胞系前后存在的表达差异基因,并用逆转录-聚合酶链反应、Northern印迹和Western印迹方法加以验证。结果分析发现,在p53基因诱导后ANNEXIN A2基因的表达显著差异有统计学意义,经p53基因诱导后ANNEXINA2基因的表达有明显下调。并且以Anip973细胞的表达缺失最为显著。经逆转录-聚合酶链反应、Northern印迹和Western印迹方法也验证了这种差异的存在。结论表明ANNEXINA2基因的表达与p53基因诱导的肿瘤细胞凋亡存在密切的相关性。
- 黄昀闫承慧傅松滨
- 关键词：P53基因ANNEXIN
- FAK siRNA质粒表达载体的构建及其对肺巨细胞癌细胞FAK基因表达的抑制被引量：7
- 2006年
- 目的应用RNA干扰技术,构建针对FAK的siRNA表达载体,抑制肺巨细胞癌细胞BE-1中FAK的表达。方法依据设计siRNA的原则,针对人FAK的mRNA序列,设计并合成编码siRNA的两条寡核苷酸序列,经退火成互补双链,再克隆到pSilencerTM2.1-U6真核表达载体中构建重组体pSilencer-FAK,进行测序鉴定。然后转染重组体至BE-1细胞中,经G418筛选,以空质粒转染为对照,获得稳定转染克隆,运用Western印迹检测FAK基因的表达。结果测序证实目的寡核苷酸片段已被克隆到pSilen-cerTM2.1-U6载体中,pSilencer-FAK转染细胞后,FAK基因在蛋白水平的表达量受到明显抑制。结论成功构建了针对人FAK的siRNA表达载体,通过转染BE-1细胞,可有效抑制细胞中FAK的表达,为后续研究以及肺癌的基因治疗奠定了基础。
- 王佳曦孟祥宁刘改云赵育桢王哲白静傅松滨
- 关键词：SIRNARNAIFAK基因表达抑制
