[目的]探讨暴露于DNA甲基化抑制剂5-Aza-2’-deoxycytidine(5-Aza-CdR)对新生SD大鼠生长发育和成年精子发生的影响。[方法]新生大鼠随机分为3组,每组24只雄鼠。自出生第3天(postnatal day 3,PND 3)开始经口给予5-Aza-CdR 25、250μg/kg,对照组给予等量的溶剂。连续暴露5d,最后一次暴露结束后24h,处死半数雄鼠(幼鼠)。剩余部分继续喂养至12周龄(成鼠),乙醚麻醉。取睾丸组织做病理学检查、精子头计数等,附睾做精子畸形检查。[结果]随着剂量的增加,幼鼠体重出现下降趋势,与对照组比较差异有统计学意义(P<0.05)。组织病理学发现幼鼠睾丸组织中出现空泡变性。检查发现染毒结束后继续喂养至12周的成鼠睾丸组织无明显形态和组织学变化;但每克睾丸组织精子头计数及每日精子生成量随幼年时暴露剂量增加呈现下降趋势(P<0.05),而精子畸形率随剂量增加呈现上升趋势(P<0.05)。[结论]新生大鼠对DNA甲基化抑制制5-Aza-CdR生殖毒性作用敏感,低剂量短时间的暴露即可引起成年期生殖功能的异常。
[目的]观察2,2′,4,4′,5,5′-六氯联苯(PCB153)对新生SD大鼠睾丸细胞凋亡的影响。[方法]体内实验:将出生3d(postnatal day 3,PND 3)的SD大鼠随机分组,每组24只,经口给予溶剂对照(玉米油)和PCB153(0.025、0.250、2.500mg/kg),连续暴露5d。最后一次暴露24h后解剖每组一半的动物,取睾丸组织做成切片,原位末端凋亡法(TUNEL法)检测睾丸细胞凋亡水平并电镜观察细胞形态;剩余动物在无暴露条件下继续喂养至12周龄(成鼠)解剖,进行精子计数。体外实验:新生大鼠(postnatal day 5,PND5)睾丸组织分离精原-支持细胞共培养48h后,用0、1、10、50μmol/L的PCB153染毒24h,染色观察细胞核凋亡,流式细胞仪测定细胞早期凋亡率和晚期凋亡率。[结果]新生期大鼠不同剂量PCB153暴露后,与对照组相比,0.250mg/kg和2.500mg/kg剂量组12周龄睾丸每日精子生成量明显下降(P<0.05)。PND8时,TUNEL法检测发现PCB153染毒组大鼠睾丸中凋亡细胞各组间差异无统计学意义。电镜下观察曲细精管,可见染毒组支持细胞线粒体肿胀,生殖细胞核固缩凝结。体外共培养细胞染毒24h后,流式细胞仪检测发现,与对照组比较,50μmol/L组早期细胞凋亡率明显升高(P<0.05);但晚期凋亡率各组差异无统计学意义。荧光显微镜下观察,从PCB153染毒浓度10μmol/L起可见明显的凋亡细胞核形态特征。[结论]新生期大鼠暴露PCB153可直接诱导睾丸细胞凋亡,引起雄性大鼠生殖功能的远期损害。
