江西省卫生厅科技计划项目(2007015)
- 作品数：1 被引量：0H指数：0
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- 下调EZH2表达对胃癌细胞株MKN1增殖作用的研究
- 2013年
- 目的下调EZH2的表达,探讨EZH2在胃癌细胞株MKNl增殖、细胞周期中的作用,研究EZH2在胃癌发生与发展中的作用。方法将EZH2的siRNA表达载体pSilencer 2.1-U6(+)通过Lipofect AUINE 2000转入人胃癌细胞MKNl中,G418选择培养,建立EZH2低表达的胃癌细胞系MKNl/Silence(+);RT-PCR和Western blot检测EZH2在MKNl、MKNl/Silence(+)和MKNl/Silence(-)细胞表达,MTT法检测细胞增殖的活性,流式细胞观察其对MKNl细胞周期的影响。结果构建成功稳定表达EZH2 siRNA细胞MKNl/Silence(+):EZH2在MKNl/Silenc(+)的mRNA和蛋白的表达明显下降,MKNl/Silence(+)细胞增殖明显抑制。在细胞周期试验中,MKNl/Silence(+)细胞G2/M期(36.08±1.34)比MKNl(16.59±0.71)、空载体MKNI/Silence(-)(18.35±0.35)显著增高(P<0.01),G0/G1期细胞显著减少(P<0.01),而S期细胞无明显变化,EZH2 siRNA作用下阻滞于G2/M期。结论下调EZH2的表达显著性阻滞了MKN1细胞的增殖。
- 龚志斌李小平余志强曾俊郭晓白童华章陈建勇胡坚方
- 关键词：胃癌EZH2RNA干扰
