国家自然科学基金(30772861)
- 作品数：9 被引量：24H指数：3
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- 相关机构：广州中医药大学肇庆医学高等专科学校南京大学更多>>
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- 龟板提取物对PC12细胞凋亡的影响及其机制被引量：5
- 2011年
- 目的:探讨龟板提取物(Plastrum testudinis Extracts,PTE)对6-羟基多巴胺(6-OHDA)诱导的PC12细胞凋亡的保护作用及其机制。方法:采用无血清培养PC12细胞同时100μmol/mL 6-OHDA损伤24 h的方法建立PC12细胞凋亡模型。细胞分为正常对照组、6-OHDA组及PTE 3、30μg/mL组四组。在施加处理因素24 h后,MTT比色分析测定细胞光密度值,Ammexin V/PI双染流式细胞术测定细胞凋亡率,Western blot检测BCL-X/L的表达水平。用Bio-Rad Quantity One凝胶分析系统对条带进行半定量分析。结果:MTT与流式细胞术结果显示PTE能提高PC12细胞活力,降低PC12细胞凋亡率,并呈剂量依赖性,PTE 3、30μg/mL组与模型组比较,差异具有统计学意义。Western blot结果显示龟板提取物使BCL-X/L表达增强,并呈剂量依赖性。结论:龟板提取物具有抑制6-羟基多巴胺诱导PC12细胞凋亡的作用,其作用机制可能与上调BCL-X/L的表达有关。
- 刘洋伍艺灵曹佳会陈东风周健洪邓汝东
- 关键词：PC12细胞凋亡
- 龟板提取物调控骨髓间充质干细胞中Id1表达的研究
- 2014年
- 目的观察龟板提取物在不同的时间点对骨髓间充质干细胞中分化抑制蛋白1的影响。方法将构建成功的PGL3-Id1启动子用磷酸钙共沉淀法转染大鼠骨髓间充质干细胞,龟板提取物分别作用于转染后的骨髓间充质干细胞36小时、3天、7天,每个时间点分别加入0,1,3,30,100μg/ml的龟板提取物,药物作用一定时间后收集细胞分别应用萤光素酶报告基因系统、RT-PCR检测Id1蛋白的表达。结果 36小时和3天时,小剂量的龟板提取物对分化抑制蛋白1的影响不大,随着时间和剂量的增加,龟板提取物量效依赖性地促进了Id1的表达;7天时,龟板提取物对Id1的促进作用逐渐减弱。结论龟板提取物促进了骨髓间充质干细胞中分化抑制蛋白1的表达,且其促进作用呈现增高-最强-减弱的特点。
- 张海玲郑二来陈金锋叶茂盛陈东风华子春
- 关键词：骨髓间充质干细胞
- 龟板抑制帕金森病大鼠T淋巴细胞的浸润被引量：1
- 2011年
- 目的：观察龟板是否能抑制CD3＋、CD4＋、CD8＋T淋巴细胞的浸润和趋化因子受体CCR3的表达.方法：本实验用6-羟基多巴胺（6-OHDA,0.2%）于大鼠左侧黑质致密带注射2μl造成帕金森病模型,设立正常对照组、模型组和龟板组,应用免疫组织化学显色方法观察帕金森病大鼠中脑黑质中CD3＋、CD4＋、CD8＋淋巴细胞和CCR3细胞阳性细胞数目.结果：免疫组织化学显色显示正常对照组没有检测出CD3＋、CD4＋、CD8＋、CCR3阳性细胞,模型组帕金森病大鼠中脑黑质的CD3＋、CD4＋、CD8＋、CCR3阳性细胞数增多,龟板组帕金森病大鼠中脑黑质的CD3＋、CD4＋、CD8＋、CCR3阳性细胞数少于模型组.结论：龟板能抑制CD3＋、CD4＋、CD8＋淋巴细胞的浸润和趋化因子受体CCR3的表达.
- 伍艺灵刘洋曹佳会陈东风周健洪李伊为黎辉邓汝东张赛霞
- 关键词：龟板帕金森病免疫炎症CD3+CD8+CCR3
- Effect of cholesterol myristate on proliferation of mesenchymal stem cells is via retinoic acid receptor
- ＜正＞Cholesterol myristate,an active compound commonly found in Plastrum testudinis in traditional Chinese medic...
- Dong-Feng Chen~(1,2),Jia-hui Cao~2,Zi-Chun Hua~(1**) (1.State Key Laboratory of Pharmaceutical Biotechnology,Department of Biochemistry, Nanjing University,Nanjing,210093,China
- 文献传递
- Folin-Ciocalteu比色法测定龟甲多酚含量的研究被引量：5
- 2010年
- 研究以Folin-Ciocalteu比色法测定不同龟甲的多酚含量。以没食子酸为对照品绘制标准曲线,在0～0.048mg/mL范围内呈线性关系,回归方程为:y=30.947x+0.0605(R=0.9991,RSD=3.6%)。该法稳定性、精密度、重现性和加样回收测试均符合要求,稳定可靠,准确方便,可用于龟甲中的多酚含量测定。依据该法测得各种龟甲的95乙醇提取物中的多酚含量,分别为:湖北龟甲(背)0.39mg/g,湖北龟甲(腹)0.22mg/g,浙江龟甲(醋炙)0.20mg/g,海南龟甲(第1批)0.16mg/g,海南龟甲(第2批)0.13mg/g。结果提示,不同产地的龟甲,龟甲(背)与龟甲(腹),醋炙与非醋炙,同一产地不同批次之间,其多酚含量都存在差异。
- 高姚湘陈东风李熙灿
- 关键词：龟甲多酚含量
- 视黄酸对龟甲提取物促骨髓间充质干细胞增殖的促进作用被引量：2
- 2014年
- 目地:观察视黄酸(retinociacdi,RA)对龟甲提取物(Extracts from Testudinis Carapacis et Plastri,PTE)促骨髓间充质干细胞(mesenchymal stem cells,MSCs)增殖的影响及其作用机制。方法:将PGL3-ID1用磷酸钙共沉淀法转染大鼠MSCs。PTE联合视黄酸(RA)、视黄酸受体阻断剂Ro41分别以10-6、10-7、10-8mol/L的浓度作用于转染后MSCs 36 h,萤光素酶报告基因检测ID1的表达。1、3、30、100μg/mL PTE分别作用于MSCs 36 h、3 d、7 d,RTPCR检测RAR的表达。PTE分别联合10-6mol/L RA、10-7mol/L Ro41作用于MSCs 36 h,RT-PCR检测RAR、ID1的表达。结果:PTE促进了MSCs中ID1的表达,联合应用RA,其促进作用增强,同时促进了RAR的表达;应用Ro41阻断RAR,PTE对ID1的促进作用减弱。结论:RA促进了MSCs中ID1的表达,PTE通过调控核受体RAR的表达水平来调控MSCs的增殖和分化。
- 张海玲尹文杨涛陈金锋陈东风华子春
- 关键词：视黄酸骨髓间充质干细胞核受体
- 龟板提取物对骨髓间充质干细胞中分化抑制蛋白1表达的影响被引量：3
- 2013年
- 目的观察不同剂量的龟板提取物对骨髓间充质干细胞中分化抑制蛋白1(inhibitor of differentiation 1,Id1)的作用。方法将构建成功的PGL3-Id1启动子用磷酸钙共沉淀法转染大鼠骨髓间充质干细胞,龟板提取物分别作用于转染后的骨髓间充质干细胞12、24、36 h,选取作用最为明显的36 h,每组分别加入0、1、3、30、100μg/mL龟板提取物,药物作用36 h后收集细胞分别应用萤光素酶报告基因系统、RT-PCR和Western blotting检测Id1的表达。结果早期、小剂量龟板提取物对Id1的影响不大;随着时间和剂量的增加,Id1的表达水平也逐渐升高。结论龟板提取物促进了骨髓间充质干细胞中Id1的表达,剂量越大,作用时间越长,促进作用越明显。
- 张海玲陈金锋陈东风郑二来叶茂盛华子春
- 关键词：骨髓间充质干细胞
- 龟板促进帕金森病大鼠黑质神经生长因子信号分子的表达被引量：1
- 2009年
- 目的：进一步探讨神经生长因子（NGF）／酪氨酸受体激酶A（TrkA）通路是否为龟板抗帕金森病（PD）大鼠多巴胺能神经元凋亡中的机制。方法：采用大鼠左侧黑质致密带注射6-羟基多巴胺（6-OHDA，0．2％）μl造成PD模型，同时设立龟板组、模型组和正常对照组，用免疫组织化学显色方法观察PD大鼠中脑黑质NGF、TrkA和磷酸化的糖原合成酶激酶-3p（p-GSK-3p）阳性神经元数目。免疫印迹法检测NGF、TrkA、p-GSK-3β蛋白表达水平的变化。结果：免疫组织化学显色显示龟板组PD大鼠中脑黑质致密部NGF、TrkA的阳性细胞数明显多于模型组。免疫印迹法结果显示龟板组PD大鼠中脑黑质致密部NGF、TrkA的蛋白表达水平高于模型组。结论：龟板能上调6-OHDA诱导的PD大鼠中脑黑质NGF、TrkA和p-GSK-3β的表达，这可能是其抗PD大鼠多巴胺能神经元凋亡的分子机制。
- 吴静易香华侯秋科邓汝东李伊为周健洪伍艺灵陈东风
- 关键词：龟板帕金森病神经生长因子糖原合成酶激酶-3Β
- 龟板活性成分对骨髓间充质干细胞中Id1表达的影响被引量：7
- 2013年
- 目地观察龟板活性成分对骨髓间充质干细胞中分化抑制蛋白1(inhibitor of differentiation 1,Id1)的作用。方法将构建成功的PGL3-Id1启动子用磷酸钙共沉淀法转染大鼠骨髓间充质干细胞(BMSCs),龟板9种活性成分(S1-S9:十六酸甲酯(S1)、十六酸(S2)、十六酸乙酯(S3)、十八酸甲酯(S4)、十八酸(S5)、十八酸乙酯(S6)、甾醇(S7)、十四酸甾醇酯(S8)、4-甾酮(S9))30μg/mL分别作用于转染后的BMSCs 36 h,萤光素酶报告基因检测各活性成分对Id1表达的影响。选取对Id1作用明显的S2、S3、S6、S8、S9,RT-PCR检测对Id1表达的影响。将各活性成分按不同的方式配伍,30μg/mL的终浓度作用于转染后的BMSCs 36 h,萤光素酶报告基因检测各配伍对Id1表达的影响。结果 S6、S8、S9促进了BMSCs中Id1的表达;S2、S3抑制了BMSCs中Id1的表达;S6、S8、S9之间的配伍可以促进Id1的表达;S2、S3及其与其他成分之间的配伍降低了Id1的表达。结论 S6、S8、S9为龟板中促进BMSCs增殖的活性成分;S2、S3为抑制BMSCs增殖的活性成分。龟板对MSCs的作用是各成分相互作用的结果,既促进了BMSCs增殖,又避免了细胞的过度增殖。
- 张海玲陈金锋陈东风郑二来叶茂盛华子春
- 关键词：骨髓间充质干细胞
- 促进干细胞增殖的龟版浸膏气相色谱-质谱指纹图谱分析与应用被引量：1
- 2008年
- 目的运用生物活性指纹图谱预测其它中药能否促进骨髓间充质干细胞(bone marrow mesenchymal stem cells,bMMSCs)。方法龟版浸膏依次用石油醚、乙醚、二氯甲烷提取,得到溶剂提取物,用MTT比色法及流式细胞仪器研究了溶剂提取物干细胞活性,采用GC-MS技术研究每一个提取物,根据总离子流色谱图的相同保留时间和相应峰面积,获得龟版浸膏GC-MS生物活性指纹图谱。结果初步结果表明溶剂提取物均能促进鼠bMMSCs的体外增殖,用龟版浸膏GC-MS生物活性指纹图谱来预测中药"四物汤"的干细胞活性,预测准确率达83.3%。结论用这种方法来预测未知中药样品的干细胞活性,有一定的可靠性。
- 张越华曾和平陈东风
- 关键词：龟版干细胞增殖气相色谱-质谱联用分析指纹图谱
