国家自然科学基金(30371378)
- 作品数：4 被引量：43H指数：4
- 相关作者：叶青海钦伦秀任宁刘道永孙冰生更多>>
- 相关机构：复旦大学福建省肿瘤医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家杰出青年科学基金国家高技术研究发展计划更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- DNA载体介导的RNAi抑制肝癌细胞的骨桥蛋白表达及侵袭性被引量：11
- 2006年
- 目的探讨骨桥蛋白(OPN)对高转移潜能人肝癌细胞系HCCLM3侵袭性影响。方法构建两个针对人OPN mRNA干扰质粒pENTR^(TM)/U6-INF(pINF-1、2)及对照质粒pENTR^(TM)/ U6-CTR(pCTR),并将其转染HCCLM3细胞。逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)测定OPN的mR—NA表达量；Western印迹测定OPN蛋白的表达量；噻唑蓝(MTT)比色法实验检测HCCLM3的增殖力；Matrigel侵袭实验检测细胞侵袭力的改变；结果与仅加转染试剂的空白对照组(2．01±0．13)相比。转染24h后,plNF-1组OPN mRNA用RT-PCR无法检测到,pINF-2组mRNA(1．00±0．12)下降50%,而pCTR组mRNA(2．02±0．13)表达差异无统计学意义(P＞0．05)。转染48h后plNF-1组OPN蛋白表达(0．11±0．02)与空白对照组(1．02±0．11)相比下降90%；转染plNF-1后,HCC-LM3细胞的增殖力下降2%。但与对照组相比差异无统计学意义(P＞0．05)。Matrigel侵袭实验结果显示,与空白对照组(28．4±1．5)相比,转染plNF-1后HCCLM3细胞穿过人工基底膜的数量(10．2±0．8)明显减少,差异有统计学意义(P＜0．01)。结论pINF-1可以特异性抑制高转移肝癌细胞系HCCLM3中OPN的表达,并显著降低其侵袭力,但对细胞增殖力影响不大,此技术有望成为抑制肝癌侵袭转移的新途径。
- 孙冰生叶青海刘道永任宁逄锦忠雷科锋张巨波林国领武金才李国才钦伦秀
- 关键词：骨桥蛋白RNA干扰
- 特异性小干扰性RNA降低骨桥蛋白基因表达对肝癌细胞侵袭性的影响被引量：21
- 2006年
- 目的应用RNA干扰技术降低细胞内骨桥蛋白的表达水平,研究骨桥蛋白对人肝癌细胞侵袭性的影响。方法体外化学合成骨桥蛋白序列特异性双链RNA,转染高转移肝癌细胞株HCC-LM3,用实时定量PCR和Western blot检测骨桥蛋白的表达。通过生长曲线、克隆形成和Matrigel侵袭实验,观察肝癌细胞恶性生物学行为的改变。结果骨桥蛋白特异性小干扰性RNA (siRNA)转染组的HCC-LM3细胞,骨桥蛋白mRNA水平下降79%,蛋白水平下降81%。体外实验表明,与空白对照组及非特异性siRNA转染组相比,骨桥蛋白特异性siRNA转染组HCC-LM3细胞克隆形成数目下降,穿过人工基底膜的细胞数减少(P＜0．05)。结论降低骨桥蛋白的表达可显著抑制肝癌细胞的侵袭转移能力。
- 朱晓群叶青海雷科峰陈洁钦伦秀
- 关键词：骨桥蛋白SIRNA基因表达
- 肝细胞癌患者血浆骨桥蛋白表达水平与术后复发及预后的关系被引量：6
- 2007年
- 目的:分析肝细胞癌(HCC)患者血浆骨桥蛋白(osteopontin,OPN)表达水平和术后转移复发及生存预后之间的关系,评价OPN在预测肝癌术后复发及预后中的作用。方法:应用酶联免疫吸附(ELISA)法测定101例HCC患者的血浆OPN表达水平,统计分析血浆OPN表达水平和临床病理指标以及生存预后的关系。结果:101例HCC患者外周血中均有OPN表达,中位水平为176．90μg·L^(-1)(13．73μg·L^(-1)～780．00μg·L^(-1)),平均水平为(218．94±149．18)μg·L^(-1),血浆OPN水平和肿瘤数目(P=0．002)、分化(Edmondson分级)(P=0．015)以及TNM分期(P=0．016)有关。有术后复发的患者比无复发患者血浆OPN表达明显增高(213．55μg·L^(-1)和153．70μg·L^(-1),P=0．0013)。OPN低表达组患者(≤200μg·L^(-1))的总生存(OS)时间和无瘤生存(DFS)时间均明显高于OPN高表达组(＞200μg·L^(-1))(P=0．0001),OPN低表达组患者的OS和DFS时间分别为774d和571d;而OPN高表达组患者的OS和DFS时间分别为635d和398d。应用COX回归模型进行单因素和多因素分析均表明血浆OPN浓度是影响肝癌患者生存预后的一个独立危险因素。结论:血浆OPN表达水平与肝细胞癌患者术后复发和生存预后密切相关,有望成为临床有用的一个预测指标。
- 张辉应敏刚任宁叶青海汤钊猷钦伦秀
- 关键词：肝细胞癌血浆骨桥蛋白复发预后
- 比较基因组杂交芯片技术对肝癌组织中骨桥蛋白不同表达肿瘤细胞基因组的研究被引量：6
- 2008年
- 目的探讨肝癌组织中骨桥蛋白（osteopontin，OPN）不同表达肿瘤细胞基因组的差异及其表达与临床病理特征的关系。方法免疫组化染色分析7l例肝细胞肝癌（hepatocellular carcinoma，HCC）的OPN表达，激光捕获显微切割和比较基因组杂交芯片分析肝癌中不同OPN表达肿瘤细胞基因组的改变。结果71例HCC中，OPN阳性表达29例（42．9％），表现为不均匀分布，阳性表达多位于癌巢周边、特别近肿瘤血管处，亦可见小癌结节呈广泛颗粒状表达，另有14例（19．7％）癌巢外的肝硬化组织呈OPN阳性染色；OPN过表达与肿瘤分化、脉管侵犯、肝内转移有关；OPN阳性与OPN阴性肿瘤细胞基因组相比有4q13．1q13．3、4q21．23—22．1、13q32．1-q32．3等拷贝数增加，其中阳性细胞中肿瘤相关基因如SMR3B、MUC7、EPHA5、SPP1（OPN）、CLDNIO等拷贝数明显增加。结论OPN提高肝癌细胞侵袭性而促进转移，可能与肿瘤细胞增殖、肝硬化的恶性转化有关。OPN阳性、阴性表达的肿瘤细胞之间存在肿瘤异质性。
- 武金才孙冰生刘道永李国才史炯任宁叶青海钦伦秀
- 关键词：肝细胞骨桥蛋白肿瘤异质性
