国家自然科学基金(81160120)
- 作品数：9 被引量：37H指数：4
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- 去整合素echistatin对人晶状体上皮细胞增生、黏附、移行的影响被引量：4
- 2013年
- 背景随着白内障手术的广泛开展，后发性白内障（PCO）的发病率逐渐升高，近年来的研究证实，去整合素类药物对PCO有抑制作用。目的探讨去整合素echistatin（Ecs）对人晶状体上皮细胞（LECs）株SRA01／04增生、黏附和移行的影响。方法取对数生长期的SRAOI／04细胞，培养液中加入不同质量浓度的去整合素Ecs（0、2．5、5．0、7．5、10．0、15．0、20．0mg／L）共培养细胞24、48、72h，用MTT法检测药物对细胞增生的影响及药物作用90rain后对细胞黏附的影响；对融合的细胞进行划痕试验，在倒置显微镜下观察并测量划痕宽度，干预培养24h、48h后测量记录划痕愈合情况。结果不同质量浓度去整合素Ecs（2．5、5．0、7．5、10．0、15．0、20．0mg／L）作用24、48、72h后对SRA01／04细胞增生的抑制率分别为2．6％、15．4％、21．2％、34．7％和46．1％、58．2％，6．6％、21．9％、38．2％、50．0％、60．7％、76．9％以及9．8％、29．0％、46．6％、63．4％、69．1％、92．4％。除2．5mg／L组外，各质量浓度组吸光度（A490）值与0mg／L组比较差异均有统计学意义（P〈0．05），且随Ecs作用时间的延长，细胞的A490值逐渐下降，差异有统计学意义（P〈0．05）；Ecs对各质量浓度组SRA01／04细胞的黏附抑制率分别为2．6％、15．0％、26．1％、35．3％、45．2％、54．5％，除2．5mg／L组外，各质量浓度组A490值与0mg／L组比较差异均有统计学意义（P〈O．05）；Ecs作用24h、48h后各质量浓度组SRA01／04细胞的移行距离与0mg／L组相比有不同程度的缩短，差异有统计学意义（P〈0．05），且随Ecs作用时间的延长，细胞移行距离缩短，差异有统计学意义（P〈0．05）。结论去整合素Ecs可抑制人LECs的增生、黏附和移行，其作用呈剂量和时间依赖性，Ecs对PCO的防治可起到积极作用。
- 周星谭少健粱皓陈迎迎李霞
- 关键词：后发性白内障去整合素晶状体上皮细胞ECHISTATIN
- 去整合素Echistatin抑制糖尿病兔远期后发性白内障被引量：2
- 2014年
- 目的观察并探讨不同浓度去整合素(Echistatin,Ecs)对糖尿病兔远期后发性白内障(posterior capsular opacification,PCO)发生过程中晶状体上皮细胞(lens epithelial cells,LEC)增殖的抑制作用,以及其在眼内的安全性。方法建立糖尿病兔模型,随机分为对照组(A组,术毕前房注入蒸馏水0.2 mL);实验组:B组、C组、D组(术毕前房分别注入5.0×10-3μg·L-1、7.5×10-3μg·L-1、10.0×10-3μg·L-1Ecs),术后裂隙灯下观察角膜、前房及PCO情况。术后6周取材,常规石蜡切片,HE染色。用免疫组织化学法检测PCO发生过程中LEC增殖细胞核抗原(proliferating cell nuclear antigen,PCNA)的表达,TUNEL法检测角膜内皮细胞、视网膜神经节细胞层及内核层细胞的凋亡情况。结果 HE染色结果显示,术后6周各组角膜内皮细胞排列整齐、未见水肿,视网膜内界膜与各层组织结构完整,未见药物引起明显的组织损伤反应。各组间PCO分级差异有统计学意义(P=0.011)。免疫组织化学法检测各组后囊膜PCNA表达结果显示,A组、B组、C组、D组的平均光密度值分别为0.499±0.043、0.484±0.055、0.422±0.012、0.340±0.031,B组后囊膜上PCNA表达与A组差异无统计学意义(P>0.05),余组间两两比较差异均有统计学意义(均为P<0.05)。TUNEL法检测各组角膜内皮细胞、视网膜神经节细胞层及内核层细胞凋亡发现,各组间细胞凋亡比较均未见明显差异(均为P>0.05)。结论 10.0×10-3μg·L-1Ecs对糖尿病兔远期PCO具有明显抑制作用,且对眼内相邻及重要组织无明显毒性作用,因此可选用此浓度进行后续研究。
- 钱光霞谭少健梁皓陈迎迎
- 关键词：去整合素后发性白内障增殖细胞核抗原糖尿病兔
- 去整合素echistatin对糖尿病兔后发性白内障形成中信号通路PI3-K/Akt和ERK1/2的影响被引量：1
- 2016年
- 目的观察去整合素echistatin对糖尿病兔后发性白内障形成中信号通路PI3-K/Akt和ERK1/2的影响,从分子水平上探讨echistatin的作用。方法建立糖尿病兔模型(n=24),随机分组并行透明晶状体囊外摘出术,术毕前房分别注入0.2 m L灭菌蒸馏水(对照组,n=12)或0.2 m L 10.0 mg·L^(-1)echistatin溶液(echistatin干预组,n=12)。术后10 d及6周(每个时间点6眼),裂隙灯显微镜观察两组术眼PCO分级情况,同时摘取术眼应用RT-PCR法检测后囊膜上信号因子Akt和ERK1/2 mRNA表达情况。结果术后10 d对照组和echistatin干预组PCO分级比较差异无统计学意义(P=0.093),但echistatin干预组PCO1级眼数少于对照组;术后6周echistatin干预组PCO级别明显低于对照组(P=0.006)。对照组和echistatin干预组Akt mRNA相对表达量术后10 d分别为0.981 7±0.380 4、0.481 7±0.166 5,术后6周分别为0.651 7±0.204 7、0.401 7±0.151 3,echistatin干预组均明显低于对照组(P=0.015,0.037)。对照组和echistatin干预组ERK1/2 mRNA相对表达量术后10 d分别为0.948 3±0.227 5、0.610 0±0.280 6,术后6周分别为0.921 7±0.299 4、0.465 0±0.180 0,echistatin干预组均明显低于对照组(P=0.045,0.009)。结论去整合素echistatin对糖尿病兔后发性白内障的发生和发展有一定的抑制作用,其发生的机制可能与抑制信号因子Akt和ERK1/2表达,进而阻断信号通路PI3-K/Akt和ERK1/2的转导有关。
- 林凤彬谭少健梁皓陈迎迎
- 关键词：去整合素ERK1/2
- 重视高度近视并发白内障的治疗被引量：23
- 2014年
- 中国是一个近视大国,不仅近视发病率高,而且高度近视所占比例也高。高度近视可出现白内障、青光眼等一系列并发症,其中白内障发生早,且多数为核性,严重影响患者视觉质量。由于高度近视患者解剖结构的特殊性,增加了白内障手术的难度。本文就此类患者手术时机、术前检查、手术技巧、并发症等方面进行述评。
- 谭少健蔡洁
- 关键词：高度近视白内障白内障手术
- 去整合素Echistatin对糖尿病兔早期后发性白内障的抑制作用及眼内安全性
- 2014年
- 背景 后囊膜混浊（PCO）是影响白内障术后视力的主要原因,糖尿病患者白内障术后更容易发生PCO.研究证实,去整合素Echistatin（Ecs）能抑制体外晶状体上皮细胞（LECs）的增生,从而抑制PCO的形成,但其机制和安全剂量有待证实.目的 研究不同质量浓度Ecs对糖尿病兔早期PCO发生过程中LECs增生的抑制作用及Ecs在眼内应用的安全剂量.方法 用随机数字表法将15只新西兰大白兔分为5个组,用四氧嘧啶兔耳缘静脉注射法建立兔糖尿病模型,然后兔右眼行常规晶状体囊外摘出术,术后单纯糖尿病兔前房注入蒸馏水0.2 ml作为对照组,术后按照分组前房内分别注入5.0、7.5、10.0和15.0 μg/ml的Ecs0.2 ml.术后裂隙灯生物显微镜下观察眼前段炎症反应及PCO形成和分级情况.术后10d取出兔右眼,制备常规石蜡切片,采用免疫组织化学法检测PCO发生过程中LECs中增生细胞核抗原（PCNA）的表达以确定Ecs对PCO抑制的有效剂量;采用常规组织病理学方法检查角膜和视网膜结构的形态学改变,并采用TUNEL法检测角膜内皮细胞及视网膜内核层细胞的凋亡情况,以确定Ecs对眼内组织的安全剂量.结果 各组兔实验眼晶状体囊外摘出术后出现不同程度的角膜水肿及前房渗出,对照组和5.0 μg/ml Ecs组术后3～5 d炎症反应消失,≥7.5 μg/ml Ecs组术眼均于术后7d恢复正常.术后对照组和5.0 μg/ml Ecs组PCO均为1～2级,≥7.5 μg/ml Ecs组术眼PCO均为0级.对照组、5.0 μg/ml Ecs组、7.5 μg/ml Ecs组和10.0 μg/ml Ecs组LECs中PCNA阳性细胞表达值（A值）的总体比较差异有统计学意义（F=18.006,P=0.001）,与对照组比较,7.5和10.0 μg/ml Ecs组LECs中PCNA阳性细胞表达值明显下降,差异均有统计学意义（P=0.010、0.001）.各组兔眼角膜内皮细胞排列整齐,视网膜内界膜与各层组织结构完整.TUNEL法检测可见≤10.0 μg/ml Ecs各组与对照组间角膜内皮细胞及视网膜内核层�
- 钱光霞谭少健梁皓陈迎迎
- 关键词：去整合素后发性白内障增生细胞核抗原糖尿病动物模型
- 去整合素Echistatin对糖尿病兔后发性白内障模型中晶状体上皮细胞间质转分化及胶原合成的影响被引量：5
- 2014年
- 目的观察去整合素Echistatin对糖尿病兔晶状体摘出术后后囊膜混浊(posterior capsular opacification,PCO)的影响,探讨Echistatin对晶状体上皮细胞(lens epithelial cells,LEC)间质转分化及胶原合成的抑制作用。方法应用四氧嘧啶耳缘静脉注射建立糖尿病兔模型,随机分组并行晶状体摘出术,术毕前房分别注入0.2 mL高压灭菌蒸馏水(对照组),7.5 mg·L-1Echistatin(7.5 mg·L-1组)、10.0 mg·L-1Echistatin(10.0 mg·L-1组),每组又分为10 d和6周2个时间点(n=4)。裂隙灯显微镜观察各组糖尿病兔术后10 d和6周PCO分级情况,同时摘取术眼应用RT-PCR法检测晶状体后囊膜上α-平滑肌肌动蛋白(α-smooth muscle actin,α-SMA)和Ⅳ型胶原mRNA表达情况。结果术后10 d,各组间α-SMA mRNA和IV型胶原mRNA表达差异均无统计学意义(均为P>0.05)。术后6周,Echistatin干预组PCO分级均明显低于对照组(P=0.024);7.5 mg·L-1Echistation组α-SMA mRNA表达为3.97±0.76,对照组为9.06±3.40,10.0 mg·L-1组为6.80±3.15,7.5 mg·L-1组明显低于其余两组(P=0.002、0.024);Ⅳ型胶原mRNA表达对照组为30.88±20.13,7.5 mg·L-1组为8.62±6.99,10.0 mg·L-1组为5.76±6.73,Echistatin干预组Ⅳ型胶原mRNA表达均低于对照组(P=0.005、0.002)。结论去整合素Echistatin对糖尿病兔晶状体摘出术后PCO的发生和发展有一定的抑制作用,可能与其抑制晶状体后囊膜上α-SMA和Ⅳ型胶原的mRNA表达有关。
- 陈迎迎谭少健梁皓钱光霞
- 关键词：后囊膜混浊糖尿病去整合素胶原合成
- 糖尿病兔后发性白内障发生过程中晶状体上皮细胞增殖的变化被引量：6
- 2012年
- 目的观察糖尿病兔后囊膜混浊(posterior capsular opacification,PCO)发生过程中晶状体上皮细胞(lens epithelial cells,LEC)的增殖情况,以探讨高血糖下LEC增殖的变化规律。方法 24只12～16周龄雄性新西兰大白兔建立1型糖尿病模型后行右眼晶状体囊外摘出术,术后选取1d、7d、10d、12d及2周、4周、6周、8周8个时间点在裂隙灯显微镜下观察PCO程度,并用Odrich法对PCO进行分级,每个时间点取3只兔眼,检测增殖细胞核抗原在后囊膜LEC中的表达,并换算成增殖指数(proliferative index,PI)值。结果糖尿病兔术后10d时可观察到部分标本出现后囊膜轻度混浊;6周时可观察到完全PCO,差异有统计学意义(P<0.05)。术后1d、7d PI值均为0,10d、12d及2周、4周、6周、8周时的PI值分别为0.320±0.020、0.520±0.020、0.753±0.306、0.907±0.012、1.000±0.000、0.947±0.012,术后10d到6周每个时间点PI值与上一时间点比较差异均有统计学意义(均为P<0.05),术后6周PI值达到高峰,8周时开始下降。结论糖尿病兔晶状体摘出术后随着时间的推移PCO形成逐渐加重,术后10d LEC开始发生增殖,6周时达到高峰。
- 丁文君韦琦梁皓陈金卯李霞谭少健
- 关键词：糖尿病后囊膜混浊增殖细胞核抗原晶状体上皮细胞
- 糖尿病兔后囊膜混浊发生过程中血清及房水中AGE和IGF-1的变化及去整合素echistatin对二者的影响被引量：1
- 2014年
- 目的观察糖尿病兔后囊膜混浊(posterior capsule opacification,PCO)发生过程中血清及房水中晚期糖基化终末产物(advanced glycation end products,AGE)和胰岛素样生长因子-1(insulin-like growth factor 1,IGF-1)的含量变化,同时观察去整合素echistatin(Ecs)对二者的干预作用。方法将24只兔随机分为对照组、糖尿病组及Ecs组,后2组应用四氧嘧啶建立糖尿病模型,所有兔行晶状体摘出术,Ecs组术中晶状体囊袋内注入10 mg·L-1Ecs,其余2组注入等量高压灭菌蒸馏水。分别于术后10 d、6周提取3组血清及房水,应用ELISA法检测AGE和IGF-1含量。结果术后10 d房水中AGE浓度在三组中分别为(0.189±0.200)μg·L-1、(0.467±0.190)μg·L-1、(0.527±0.130)μg·L-1;6周为(0.255±0.640)μg·L-1、(0.716±0.340)μg·L-1、(0.830±0.330)μg·L-1。术后10 d血清中AGE浓度在对照组、糖尿病组和Ecs组中分别为(0.074±0.013)μg·L-1、(0.270±0.120)μg·L-1、(0.213±0.690)μg·L-1;6周为(0.054±0.010)μg·L-1、(0.166±0.460)μg·L-1、(0.149±0.200)μg·L-1。术后10 d房水中IGF-1浓度在3组中分别为(0.279±0.080)μg·L-1、(0.914±0.130)μg·L-1、(0.556±0.290)μg·L-1;6周为(0.176±0.030)μg·L-1、(0.508±0.040)μg·L-1、(0.367±0.090)μg·L-1。术后10 d血清中IGF-1浓度在对照组、糖尿病组和Ecs组中分别为(0.075±0.030)μg·L-1、(0.293±0.160)μg·L-1、(0.305±0.160)μg·L-1;6周为(0.032±0.020)μg·L-1、(0.833±0.570)μg·L-1、(0.788±0.530)μg·L-1。术后10 d及6周对照组血清及房水中AGE和IGF-1含量均低于糖尿病组及Ecs组(均为P<0.05)。糖尿病组及Ecs组中AGE含量比较,差异均无统计学意义(均为P>0.05),糖尿病组及Ecs组中IGF-1含量在血清中差异均无统计学意义(均为P>0.05),但在房水中Ecs组IGF-1含量明显低于糖尿病组(P=0.003、0.031)。结论 AGE和IGF-1可能促进了糖尿病兔PCO的发生和发展,降低房水中IGF-1的含量可能是去整合素Ecs抑制PCO发展的机制之一。
- 陈迎迎谭少健梁皓钱光霞
- 关键词：后囊膜混浊糖尿病晚期糖基化终末产物胰岛素样生长因子-1去整合素
- 整合素信号通路与后发性白内障的研究现状被引量：1
- 2016年
- 后发性白内障（after cataract）又称后囊膜混浊（posterior capsule opacification,PCO）是白内障超声乳化或囊外摘除联合人工晶状体植入术后最常见的并发症,也是导致术后视力再次下降的主要原因。据统计,PCO在成年人白内障手术后2-5年的发生率为20%-50%,而儿童由于晶状体上皮细胞（lens epithelial cells,LECs）的增殖能力较强,PCO发生率可达100％。
- 林凤彬谭少健
- 关键词：后发性白内障后囊膜混浊OPACIFICATION术后视力CATARACT整合素家族
