四川省教育厅资助科研项目(08ZB043)
- 作品数：4 被引量：10H指数：2
- 相关作者：孟延发何义国赵兴秀邓静方春玉更多>>
- 相关机构：四川理工学院四川大学更多>>
- 发文基金：四川省教育厅资助科研项目更多>>
- 相关领域：轻工技术与工程化学工程生物学理学更多>>
- HPLC测定不同方法提取的山黧豆中β-ODAP被引量：3
- 2011年
- 利用2,4-二硝基氟苯(FDNB)为柱前衍生试剂,建立了测定山黧豆中毒素β-Ν-草酰基-α,β-二氨基丙酸(简称β-ODAP)及其无毒性的异构体α-N-草酰基α,β-二氨基丙酸(简称α-ODAP)的恒组分洗脱高效液相色谱方法。并优化了流动相的pH、乙腈含量以及柱温。得出最佳色谱条件为:C18,250 mm×46 mm,5μm;流动相∶乙腈/溶液A(17∶83,体积比;溶液A的配比是K2HPO4:二甲基甲酰胺:水为0.03 mol∶10 mL∶990 mL,并用冰醋酸调pH为5.5);流速1.0 mL/min;检测波长360 nm;柱温28℃。利用该方法比较了水提取法、30%乙醇提取法及0.2 mol/L高氯酸提取法的优缺点。结果发现:水提取法和0.2 mol/L高氯酸提取法效果相当,水提取法和30%乙醇提取法均耗时长,需要24 h,而耗时长会不可避免的导致β-ODAP向α-ODAP的转换,且30%乙醇提取法不如水提法和高氯酸提取法效果好。而0.2 mol/L高氯酸提取法耗时短,只需要在0℃～4℃下提取1 h。
- 赵兴秀何义国邓静方春玉孟延发
- 关键词：山黧豆高效液相色谱
- PEG-重组酵母尿酸酶结合物的基本特性研究被引量：4
- 2009年
- 重组Candida utilis尿酸酶由含PET-Uricase表达质粒的重组E.coli JM109(DE3)经乳糖诱导表达,菌体破碎后依次经过硫酸铵沉淀、阴离子交换层析和凝胶过滤层析可以获得纯度95%的重组尿酸酶。还原性SDS-PAGE和HPLC测得其亚基表观分子量和天然分子量分别约为33kDa和130kDa。获得的纯酶与20kDa(mPEG)2-Lys-NHS在特定的条件下反应合成PEG-重组酵母尿酸酶结合物,考察了重组酵母尿酸酶PEG化前后的基本性质,结果显示PEG化尿酸酶的最适pH为7.5,较修饰前下降了1个pH单位,酸碱稳定范围与修饰前类似,都在pH6～10范围内稳定;修饰前后最适温度均为40℃,重组酵母尿酸酶的热稳定性和抗蛋白酶水解能力较PEG修饰前有较大提高;PEG化尿酸酶可保留修饰前酶活力的87.5%;在最适条件下,PEG-尿酸酶结合物的Km为3.57×10-5mol/L,而修饰前测得的Km为3.91×10-5mol/L。研究结果为深入探讨PEG化尿酸酶的结构与功能奠定了基础。
- 赵兴秀何义国姚兴川杜林方孟延发
- 关键词：CANDIDA尿酸酶
- 皱褶假丝酵母产脂蛋白酯酶的发酵条件优化及性质研究被引量：1
- 2010年
- 皱褶假丝酵母经发酵培养可合成分泌脂蛋白酯酶,对该菌种进行了发酵条件的优化,其最适培养基条件为:pH值6.0,250mL三角瓶中装量25mL,所接菌种种龄为24h,接种量为10%,摇床转速为200r/min,28℃培养27h。酶学性质研究结果表明,该酶的最适温度为45℃,最适pH值为7.5。
- 赵兴秀何义国方春玉邓静孟延发
- 关键词：脂蛋白酯酶发酵
- 皱褶假丝酵母Candida rugosa产脂蛋白酯酶的发酵培养基优化被引量：2
- 2011年
- 将筛选得到的产脂蛋白酯酶的皱褶假丝酵母进行了底物诱导和发酵培养基的优化,确定了其最适培养基配方:橄榄油0.6%,蛋白胨0.5%,酵母膏0.3%,麦芽浸膏0.3%,Tween-80 0.1%,K2HPO4 0.05%,Na2HPO4 0.1%,MgSO4.7H2O 0.1%。在最适培养基中培养,脂蛋白酯酶的酶活力可达121.65U/L,比未优化前提高了80倍。
- 赵兴秀何义国邓静吴华昌孟延发
- 关键词：脂蛋白酯酶发酵培养基
