国家自然科学基金(30471628)
- 作品数:5 被引量:16H指数:3
- 相关作者:王群刘愉郭卫刚赵德平薛亮更多>>
- 相关机构:复旦大学上海市肺科医院中国人民解放军总医院更多>>
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- 相关领域:医药卫生更多>>
- “非内皮化袖套”建立大鼠左单肺移植模型应用于短期观察被引量:8
- 2005年
- 目的:建立非内皮化袖套大鼠左单肺移植模型,以期应用于短期观察。方法:选用纯种雄性 SD 大鼠,体重250~350g,呼吸机 支持和显微外科技术下利用套管完成了20只大鼠左单肺移植。结果:20只移植鼠至实验结束存活17只,成功率为85%,套管成功 率为100%。3只失败大鼠中2只为移植再灌注后分别于75min 与90min 左右后心跳停止死亡,1只为大鼠仍存活,但开胸取肺时见 肺动脉和静脉内血栓形成,移植肺没有灌注。结论:非内皮化袖套大鼠左单肺移植手术较传统袖套技术更易掌握,手术时间缩短,成 功率较高,此动物模型应用于观察时间较短的再灌注损伤的研究是合乎要求的。
- 郭卫刚谭黎杰刘愉王群郑如恒赵德平薛亮葛棣
- 关键词:肺移植动物模型袖套
- 乌司他丁和氮脱硫酸肝素对大鼠肺移植缺血再灌注损伤保护的比较被引量:4
- 2005年
- 目的:建立大鼠的原位异体左单肺移植模型。比较乌司他丁(ulinastatin,UTI)和非抗凝肝素氮脱硫酸肝素(non-anticoagulant N-desulfated heparin,NNH)在该模型中对移植肺缺血再灌注损伤的保护作用。方法:纯种雄性SD大鼠24只,随机分成分为三组, 再灌注时给予生理盐水对照组(n=8):1.2 ml/kg;UTI治疗组(n=8):10,000 U/kg;NNH治疗组(n=8):12 mg/kg,在显微技术和机械通气下完成左单肺移植。再灌注2 h后测量移植肺肺静脉血气,肺干湿重比W/D,髓过氧化物酶(MPO)浓度,TNF-α和IL-8浓度, 细胞间粘附分子-1(ICAM-1)的mRNA表达,肺组织病理切片。结果:24只移植鼠至实验结束存活21只,存活率为87.5%,套管成功率为100%。3只失败大鼠中2只为移植再灌注后分别于75与90 min左右死亡,1只大鼠仍存活,但开胸取肺时见肺动脉和静脉内血栓形成,移植肺无灌注。供肺肺静脉血气PaO2 UTI组(289.68±5.65 mmHg)及NNH组(315.26±14.91 mmHg)与对照组(236.80 ±13.90 mmHg)均有显著差异(P<0.0001),NNH组和UTI组PaO2也有显著差异(P<0.0001);UTI组干湿重比W/D(4.74± 0.28)、NNH组(4.87±0.34)和对照组(5.00±0.12)无显著差异(P=0.18);UTI组MPO活性(0.52±0.25)低于对照组(0.84±0.22,P <0.05),NNH组MPO活性(0.64±0.24)和对照组(P=0.12)、UTI组(P=0.29)均无显著差异;肺组织中TNF-α浓度UTI组(138.61 ±15.30)显著高于对照组(77.54±10.14,P<0.0001),NNH组(52.85±6.55)显著低于对照组(P<0.0001);肺组织IL-8浓度UTI组 (173.45±27.63)显著高于对照组(76.22±12.42,P<0.0001)和NNH组(61.34±9.86,P<0.0001),NNH组和对照组无显著差异(P =0.12)。ICAM-1 mRNA表达UTI组(0.37±0.14)、NNH组(0.38±0.11)显著低于对照组(1.74±0.39,P<0.0001),UTI组和NNH 组无显著差异(P=0.94);光镜下病理示UTI和NNH组肺组织损伤轻于对照组。结论:非内皮化袖套大鼠左单肺移植动物模型用于观察�
- 郭卫刚谭黎杰刘愉王群赵德平薛亮葛棣
- 关键词:肺移植缺血再灌注袖套
- 深低温冷冻保存降低大鼠气管移植物免疫原性的机制被引量:3
- 2008年
- 目的探讨大鼠气管移植物经深低温冷冻保存后免疫原性降低的机制。方法Sprgue Dawley大鼠30只,取其气管冷冻保存于-85℃的冰箱。在新鲜和冷冻后1周、1个月、3个月、6个月共5个观察点上,采用苏木精-伊红染色来观察冷冻保存后气管黏膜上皮的形态改变,在透射电镜下观察DCs(dendritic cells,树突状细胞)的形态学改变,用免疫组化的方法分析冷冻保存后各个时间点气管上皮内的MHC-Ⅱ类分子的表达情况。结果随着冷冻保存时间的延长,大鼠气管黏膜上皮细胞脱落增多,MHC-Ⅱ类分子表达下调,同时黏膜上皮内DCs发生形态和功能方面的改变,表现为突起减少、线粒体基质深染及胞质内出现空泡变性等改变。结论大鼠气管冷冻后免疫原性降低可能有多种因素的参与,包括随着冷冻保存时间的延长出现的黏膜上皮脱落、MHC-Ⅱ类分子表达下调以及DCs发生形态和功能上的改变。
- 丁建勇郑如恒乔玉磊杨煜刘愉王群
- 关键词:电子显微镜树突状细胞
- 结核菌抗原基因Rv3881c在大肠杆菌中的高效表达分析被引量:1
- 2007年
- 目的:从结核分枝杆菌基因组克隆Rv3881c基因并重组入pET24b载体,在大肠杆菌中进行融合表达,重组蛋白经纯化后通过Western blot分析初步鉴定其抗原性和特异性。方法:提取H37Rv标准株的基因组DNA,以基因组DNA为模板PCR扩增出Rv3881c基因,连接到pGEMT上,经过筛选鉴定后,将重组子测序;将测序正确的基因双酶切后连接到pET24b载体上,筛选得到重组载体pET24b-48;在BL21菌株中优化表达并采用金属鏊合层析方法纯化蛋白;选取6例结核病阳性临床血清标本和6例健康人血清标本进行Western blot分析。结果:发现从保存的H37Rv菌株克隆得到了读码框完全正确的Rv3881c基因,它在大肠杆菌中可以高效表达,表达量约占细菌总蛋白的20/以上。重组蛋白不与健康人血清反应,可与结核标本血清有较强的免疫印迹反应。结论:重组Rv3881c具有较好的特异性,该抗原有潜力成为检测结核的有效抗原组分之一。
- 李邦印李大伟王臻吴雪琼王仲元
- 关键词:大肠杆菌重组融合蛋白质类H37RV
- 不用免疫抑制剂的短期冷冻保存气管同种移植的实验研究
- 2010年
- 目的:探讨不用免疫抑制剂的短期冷冻保存气管同种移植的可能性。方法:将7-8个环的犬气管移植物置于冷冻保存液中,置于-85℃冰箱中冷冻保存。在保存1个月~7个月后,行长度为5个环的胸部气管同种移植(n=7),大网膜瓣包被吻合口及移植物。术后不用免疫抑制剂,定期行纤维支气管镜检查。结果:随着冷冻保存时间的延长,气管黏膜上皮细胞有逐渐脱落的趋势,纤毛稀疏。但是,在冷冻保存7个月的气管移植物上,仍确认有纤毛上皮的存在。主要组织相容性复合体-Ⅱ免疫组织化学染色呈阳性。6条犬气管移植物出现致死性狭窄,在术后2个月内死亡。1条犬气管移植物轻度狭窄,观察时长为38个月。结论:置于-85℃深低温冷冻保存1个月-7个月后,犬气管移植物仍具有免疫原性,有必要进一步延长保存时间,并同时对冷冻保存降低气管免疫原性的机制进行深入研究。
- 乔玉磊刘愉王群
- 关键词:气管冷冻保存免疫抑制剂免疫原性