广西医学科学实验中心开放基金(KFJJ2010-3)
- 作品数：4 被引量：16H指数：3
- 相关作者：王琪李力石丽君于红静张玮更多>>
- 相关机构：广西医科大学附属肿瘤医院广西医科大学教育部更多>>
- 发文基金：广西医学科学实验中心开放基金广西壮族自治区科学研究与技术开发计划广西科技基础条件平台建设项目更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 铂类耐药相关基因在卵巢癌顺铂耐药形成过程中表达量的动态变化被引量：9
- 2013年
- 目的了解卵巢癌患者在铂类治疗过程中产生获得性耐药相关基因表达动态变化的情况,为临床预后的预测及个体化治疗奠定理论基础。方法采用Benjamini-Hochberg(BH)法对源于TCGA数据库(The Cancer Genome Atlas)的256例敏感和耐药患者的卵巢癌全基因表达谱数据进行差异表达基因筛选。采用DAVID软件中的KEGG模块对筛选出的差异基因进行通路富集,筛选出P<0.05的通路,对筛选出的通路所包含的基因采用成组t检验找出差异显著的基因(P<0.05)。对筛选出的基因采用COREMINE工具进行文本挖掘,找出与多药耐药及肿瘤耐药存在线性相关的基因,将其与患者预后进行分析,确定存在差异显著的基因。采用实时荧光定量PCR法检测所筛选出的基因在裸鼠诱导耐药模型不同给药阶段的表达变化情况。结果 BH法共筛选出306个差异表达基因,其中上调基因110个,下调基因196个。DAVID软件的KEGG模块分别筛选出5条上调及4条下调通路,成组t检验筛选出有差异的基因共37个,其中上调基因18个,下调基因19个。COREMINE工具检索出与多药耐药及肿瘤耐药存在线性相关的上调基因为ITPA、IMPDH2、RPS7、PDE5A和PDE4D,下调基因为GNAS、CFTR、BUB3、PRKDC、RBL2、SMC1A、CALR、CCNE2及CHEK1。生存分析结果提示CALR及PRKDC基因的表达与患者生存时间有关,CALR和PRKDC基因高表达组的患者生存时间长于低表达组。qRT-PCR检测发现,CALR和PRKDC基因随顺铂注射次数增多,在SKOV3-GFP及SKOV3/DDPⅱ肿瘤组织中的表达量逐渐降低。结论 CALR与PRKDC基因可能与卵巢癌铂类耐药及患者的预后密切相关,且随着耐药的产生,CALR和PRKDC基因的表达量逐渐降低。
- 石丽君于红静李力王琪
- 关键词：卵巢肿瘤卵巢上皮性癌耐药相关基因顺铂
- 顺铂作用于耐顺铂卵巢上皮癌细胞后其细胞生物学特性的改变被引量：5
- 2013年
- 目的:探讨耐顺铂卵巢癌SKOV3/DDPⅡ细胞对于顺铂作用后其细胞周期、凋亡、增殖及铂类耐药相关基因ARHGDIB和CCND1表达量的变化。方法:采用流式细胞术检测不同浓度和时间顺铂作用后SKOV3/DDPⅡ细胞周期和凋亡率的变化,并与标记GFP的上皮性卵巢癌细胞株SKOV3-GFP(敏感株)相比较;通过3-(4,5-二甲基噻唑-2)-2,5-二苯基四氮唑溴盐(MTT)法检测不同浓度和时间顺铂作用后细胞增殖的变化;实时荧光定量PCR(QRT-PCR)检测裸鼠体内瘤块耐药基因CC-ND1和ARHGDIB基因的表达情况。结果:半抑制浓度的顺铂作用48h后,SKOV3-GFP和SKOV3/DDPⅡ两株细胞分布于G0/G1期的比例相对于无顺铂处理组明显下降(P<0.01,P<0.05),SKOV3/DDPⅡ细胞分布于G2/M期的比例则相对于无顺铂处理组明显升高(P<0.01);而顺铂作用48h内SKOV3-GFP和SKOV3/DDPⅡ两株细胞凋亡率随时间和浓度的增大而增大;以9.9,19.8,29.7μmol/L浓度的顺铂处理6d以后,SKOV3/DDPⅡ的增殖抑制得到解除,并继续生长,而SK-OV3-GFP细胞则随顺铂作用时间延长增殖持续受到抑制。顺铂作用体内移植瘤5次后,CCND1在SKOV3/DDPⅡ-5的相对表达比SKOV3/DDPⅡ-0增高92.98倍,作用第8次后,ARHGDIB在SKOV3/DDPⅡ-8的相对表达比SKOV3/DDPⅡ-0增高2.51倍。结论:具有耐药表型的卵巢上皮癌细胞在顺铂作用下降低分布于G0/G1期细胞数使细胞生长受到一定程度的抑制,但在顺铂刺激后肿瘤细胞过度表达CCND1基因使细胞顺利通过G1/S检查点促进肿瘤细胞增殖,同时上调表达ARHG-DIB基因抵抗顺铂诱导的肿瘤细胞凋亡。
- 石丽君于红静李力王琪
- 关键词：顺铂增殖凋亡
- DNA-PKcs在铂类耐药形成过程中的动态表达及临床因素的相关性分析被引量：1
- 2014年
- 目的动态检测裸鼠铂类耐药模型DNA依赖蛋白激酶催化亚单位(DNA-PKcs)在铂类耐药形成过程的变化,分析卵巢癌患者DNA-PKcs的表达水平与临床因素的相关性,为肿瘤患者的个体化治疗提供实验依据。方法以实时荧光定量PCR技术检测DNA-PKcs mRNA的表达;Pearson相关分析卵巢癌患者DNA-PKcs的表达量与卵巢癌患者临床因素的相关性,Kaplan-Meier法分析临床因素及DNA-PKcs的表达对患者无疾病进展生存时间和总生存时间的影响;Cox回归模型分析卵巢癌预后相关因素对患者生存的影响。结果裸鼠体内铂类耐药移植瘤DNA-PKcs的表达显著低于铂类敏感对照(P=0.003),铂类敏感细胞在获得性耐药形成过程中DNA-PKcs的表达逐渐下降,耐药细胞产生以后,DNAPKcs基因的表达始终在较低的水平。Pearson分析表明DNA-PKcs的表达与患者对铂类药物初始治疗的反应和铂类耐药的产生呈显著负相关(P=0.000)。Kaplan-Meier法分析显示,FIGO分期越早、无术后残余病灶、对铂类初次治疗有效、铂类治疗敏感、DNA-PKcs高表达的患者的生存时间显著延长(P<0.05)。Cox回归模型分析发现纳入影响卵巢癌患者总生存时间的危险因素为铂类初始治疗反应(P=0.047)和铂类耐药产生(P=0.047),铂类药物治疗完全有效和部分有效患者的DNA-PKcs表达量显著高于肿瘤无消退和肿瘤增长的两组患者(P=0.000),铂类敏感患者DNA-PKcs平均表达量显著高于铂类耐药患者(P=0.000)。结论 DNA-PKcs的表达下降与铂类耐药形成相关,可能作为判断卵巢癌铂类耐药产生的潜在标志分子。
- 石丽君李梦迪李力王琪
- 关键词：卵巢肿瘤
- 顺铂耐药卵巢上皮性癌细胞株及其裸鼠移植瘤模型的建立及耐药特性探讨被引量：4
- 2014年
- 目的：建立顺铂耐药性稳定的卵巢上皮性癌（卵巢癌）细胞株及其裸鼠移植瘤模型并探讨其耐药特性，为研究体内微环境耐药机制及逆转靶基因筛选奠定基础。方法采用体内外交叉诱导和连续体内诱导两种方法，以绿色荧光蛋白（GFP）标记的卵巢癌细胞株SKOV3/GFP分别建立两株顺铂耐药的卵巢癌细胞株SKOV3/DDPⅠ（为耐药细胞的对照）和SKOV3/DDPⅡ及其裸鼠移植瘤模型。采用四甲基偶氮唑蓝（MTT）比色法和流式细胞仪检测细胞耐药指数，流式细胞仪检测细胞凋亡率和细胞周期比例，高效液相色谱仪检测细胞内顺铂积量；透射电镜观察移植瘤组织的超微结构，实时荧光定量PCR技术检测移植瘤组织中铂类耐药相关基因——PTEN、STAT5、XIAP、BRCA1和MDR1 mRNA的表达水平。结果成功构建顺铂耐药卵巢癌细胞株SKOV3/DDPⅠ和SKOV3/DDPⅡ及其裸鼠移植瘤模型。MTT比色法和流式细胞仪检测显示，SKOV3/DDPⅡ细胞的耐药指数分别为2.83±0.12和3.82±0.19，SKOV3/DDPⅠ细胞的耐药指数分别为2.20±0.16和3.40±0.20，两种检测方法分别比较，差异均有统计学意义（P〈0.05）。流式细胞仪检测显示，29.7和39.6μmol/L顺铂处理36 h后， SKOV3/DDPⅠ、SKOV3/DDPⅡ细胞的凋亡率[分别为（57.0±1.4）%、（74.4±2.3）%和（37.6±4.4）%、（50.5±3.4）%]均显著低于SKOV3/GFP细胞[（83.1±2.7）%和（87.4±4.0）%；P=0.024，P=0.001]，且SKOV3/DDPⅡ细胞的凋亡率明显低于SKOV3/DDPⅠ细胞（P=0.020）；SKOV3/DDPⅠ、SKOV3/DDPⅡ细胞G2/M期比例与顺铂处理时间（为0、12、24、36和48 h）呈正相关（R=0.800，P=0.104；R=0.915，P=0.029）。高效液相色谱仪检测显示，以9.9、19.8、29.7和39.6μmol/L的顺铂分别处理12、24、36和48 h后，SKOV3/DDPⅠ、SKOV3/DDPⅡ细胞内顺铂积量均显著低于SKOV3/GFP细胞（P〈0.05）。透射电镜观察，接种SKOV3/GFP细胞的裸鼠移植瘤组织中，在
- 石丽君于红静张玮李力王琪
- 关键词：卵巢肿瘤顺铂
