公共文化服务平台

共 3 条记录，以下是 1-3

全选清除导出

排序方式：

小干预RNA对人乳头瘤病毒6bE6基因的沉默作用被引量：3: 2004年; 目的探讨小干预RNA(siRNA)对稳定表达人乳头瘤病毒(HPV)6bE6基因的细胞株中靶基因的干预作用。方法建立并筛选稳定表达靶基因HPV6bE6的阳性细胞株,分别设计同源于HPV6bE6基因的不同序列的4对siRNA,采用实时定量PCR技术检测siRNA转染前后细胞内靶mRNA的表达情况。结果转染细胞中HPV6bE6基因表达最低有90%以上被抑制,低浓度siRNA水平(1nmol/L^150nmol/L)即能有效抑制靶基因表达,靶mRNA的沉默于转染siRNA后24h达到最强,且至少可维持4d。结论siRNA-HPV6bE6可以高效、特异地沉默HPV6bE6基因,可能为治疗HPV6b型感染提供实验室依据。; 赵可佳程浩丁佳逸张行; 关键词：E6基因 RNA 干预靶基因表达转染细胞

小干扰RNA对人乳头状瘤病毒6bE7基因表达的沉默作用被引量：1: 2007年; 目的研究靶向人乳头状瘤病毒HPV-6b型E7基因的二聚体小干扰RNA（siRNA-HPV-66E7）对靶基因表达的沉默作用。方法建立并筛选稳定表达HPV-6bE7基因的B16和293T转染细胞株，用脂质体转染法将体外合成的siRNA-HPV-6bE7转染上述细胞株，采用实时荧光定量PCR分析靶基因HPV-6bE7的mRNA表达情况。结果用不同浓度的siRNA-HPV-6bE7转染细胞48h，50nmol／L浓度对B16细胞中靶基因表达的抑制作用最强（抑制率87．05％），1nmol／L抑制作用较低（9．14％）；而在293T细胞，10nmol／L的siRNA对靶基因表达的抑制效应最大（78．87％），1nmol／L仍有一定抑制作用（46．92％）。50nmol／LsiRNA-HPV-6bE7转染B16细胞后，靶基因的mRNA表达在24h内开始受抑制（32．47％），48h作用最强（74．72％），96h作用很低（8．91％）；25nmol／L和10nmol／L的siRNA转染293T细胞后，均在24h内起效（26．66％、20．31％），抑制作用至少能维持72h（65．93％、35．23％）。结论siRNA-HPV-6bE7对B16和293T细胞外源性靶基因表达均有较强的特异性沉默作用，在不同细胞株达到最大抑制效应的siRNA浓度不同，但时效曲线的变化趋势基本一致，siRNA均在24h内起效，48—72h达到高峰，抑制作用至少能维持72h。本研究结果为下一步在动物或临床进行siRNA干扰试验提供了实验依据。; 汤晓燕程浩陈贤祯张行丁佳逸叶俊朱可建岑建萍陈萍; 关键词：人乳头状瘤病毒基因沉默小干扰RNA 尖锐湿疣

不同RNA干预技术对人乳头瘤病毒11型E7基因的沉默作用: 2007年; 目的探讨RNA干预技术的两种形式在体外对人乳头瘤病毒（HPV）11型E7基因的沉默作用。方法化学合成1对小片段干扰RNA（siRNA-11E7）、同时构建3个短发夹状小RNA（shRNA）表达质粒（pRNAT-11E71^#、2^#、3^#），分别转染稳定表达HPV11E7的C57BL／6小鼠黑素瘤细胞系B16细胞株，采用实时荧光定量PCR技术检测细胞转染前后靶基因mRNA的表达水平。结果siRNA-11E7转染细胞后6、12、24、48、72、96、120h对靶基因表达的抑制率分别为12.60％、31.41％、41.93％、42.93％、74．35％、32.71％、29．00％；最佳作用浓度为25nmol／L（抑制率70.06％），最低作用浓度可至3.13nmol／L（抑制率47.00％）。以0．4μg pRNAT-11E71^#、2^#、3^#及上述3个质粒等量混合转染细胞72h后对靶基因表达的抑制率分别达44．52％、59．26％、89.62％、54.09％，阴性质粒无干预作用。pRNAT-11E73^#作用6、12、24、48、72、96、120h对靶基因表达抑制率分别为0、17．50％、40．90％、42．40％、61．90％、51．50％、0％；最佳作用剂量0．2μg。结论siRNA及shRNA表达载体均可在体外安全高效地沉默HPV11E7基因的表达，其干预作用存在一定的量效性和时效性，且可能存在最佳作用浓度（剂量）和最佳作用时间。; 陈贤祯程浩汤晓燕张行朱可建叶俊林爱华岑建萍金纳; 关键词：基因沉默乳头状瘤病毒

全选清除导出

共1页<1>

国家自然科学基金(30371289)

文献类型

领域

主题

机构

作者

传媒

年份

用户反馈

国家自然科学基金(30371289)

文献类型

领域

主题

机构

作者

传媒

年份

用户登录

用户反馈