国家自然科学基金(81370846)
- 作品数：5 被引量：14H指数：3
- 相关作者：张克勤唐铭韩起李鹏李由更多>>
- 相关机构：第三军医大学西南医院第三军医大学徐州医科大学更多>>
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- 补体C5a／C5aR通路对小鼠肾缺血再灌注损伤引发自噬的影响
- 2016年
- 【摘要】目的探讨肾缺血再灌注中肾组织的自噬水平及补体C5a／CSaR通路对小鼠肾组织自噬的影响。方法选择雄性BALB／C小鼠和CSa受体（C5aR）基因敲除（BALB／C背景）小鼠，通过微动脉夹夹闭小鼠双侧肾蒂的方法建立小鼠肾脏缺血再灌注损伤动物模型，设野生型BALB／C（Wild Type，WT）对照小鼠组和C5aR基因敲除（Knock Out，KO）小鼠组。HE染色观察比较两组小鼠肾脏病变；测定再灌注24h后肾功能（血清尿素氮值）和肾损伤分子-1（KIM-1）的mRNA水平；免疫荧光和western-blot检测自噬相关蛋白（LC3Ⅱ／LC3I、P62）的表达情况。体外培养人肾小管上皮细胞系（Human kidney tubular epithelial cell sline，HK2）细胞，加入重组人C5a或C5a联合C5aR阻断剂（C5aR Antagonist，C5aRA）刺激培养24h，免疫荧光和western-blot检测细胞LC3的水平。结果与野生型对照小鼠组相比，C5aR基因敲除小鼠肾损伤程度显著减轻；缺血再灌注后，野生型小鼠肾组织自噬相关蛋白LC3的表达随时间逐渐升高；C5aR基因敲除可使缺血再灌注引发的自噬水平明显降低（P〈0．05）；体外实验中，加入重组人C5a后，HK2细胞中自噬相关蛋白LC3Ⅱ的表达随C5a刺激浓度升高而逐渐增加；加入C5aRA后，自噬水平显著下调（P〈0．05）。结论补体C5a／CSaR通路可促进肾缺血再灌注引发的自噬。
- 张坤李由唐铭郑权友张克勤
- 关键词：肾缺血再灌注损伤自噬
- FGL2在肾透明细胞癌中的表达及其临床意义被引量：1
- 2017年
- 目的探讨纤维蛋白原样蛋白2(FGL2)在肾透明细胞癌(ccRCC)中的表达及临床意义。方法采用免疫组织化学法检测103例ccRCC患者肿瘤组织及40例癌旁组织中FGL2的表达,分析FGL2的表达与患者临床病理参数及预后的关系。结果FGL2在肾癌组织中呈阳性表达,高表达率明显高于癌旁组织,差异具有统计学意义(62.1%vs.0.0%,χ~2=44.990,P<0.01);FGL2的表达与肿瘤大小(P=0.039)、T分期(P=0.049)、TNM临床分期(P=0.043)显著相关;高表达FGL2患者的总体生存期(OS)及无病生存期(DFS)短于低表达患者(P<0.05);在早期患者(Ⅰ~Ⅱ期)中同样观察到高表达FGL2者的OS及DFS短于低表达患者(P<0.05)。单因素及多因素COX回归分析显示FGL2是患者预后的独立危险因素。结论 FGL2与肾癌的发生发展密切相关,癌组织中FGL2高水平表达提示不良预后,有可能作为肾癌患者判断预后的一种生物标记物,对肾癌提供新的治疗靶点。
- 曹溆唐铭张克勤
- 关键词：肾透明细胞癌预后
- 抑制肾癌细胞自噬可增强癌细胞对舒尼替尼的敏感性被引量：6
- 2017年
- 目的检测肾癌中自噬的表达水平及其对舒尼替尼耐药性的影响。方法采用免疫组织化学法检测自噬相关基因5(ATG5)与微管相关蛋白1轻链3(LC3)在99例肾透明细胞癌组织中的表达,并进行临床病理及生存分析;通过慢病毒感染技术构建ATG5低表达的A-498肾癌细胞株,Western blot法检测干扰效果;流式细胞术检测ATG5正常表达与低表达的A-498细胞增殖的变化;经舒尼替尼刺激后,MTT法检测A-498细胞存活率。结果 ATG5与LC3在肾癌组织中的表达显著高于癌旁组织,且ATG5与LC3的表达与肾癌的分型、分化程度、TNM分期、术后生存率具有相关性,而与性别、年龄、部位、大小无关;与对照组相比,ATG5低表达的A-498细胞ATG5与LC3蛋白表达明显降低、细胞增殖率(G2/M期百分比)明显降低;且对舒尼替尼敏感性增加,与舒尼替尼呈剂量依赖性。结论肾癌组织中自噬活跃,抑制自噬ATG5表达后,明显增强人肾癌细胞对舒尼替尼的敏感性。
- 李鹏韩起唐铭张克勤
- 关键词：自噬肾癌舒尼替尼
- Fgl2在顺铂诱导的小鼠急性肾损伤中的作用及机制研究被引量：5
- 2021年
- 目的研究纤维蛋白原样蛋白2(fibrinogen-like protein 2,Fgl2)在顺铂诱导的小鼠急性肾损伤(cisplatin-induced acute kidney injury,Cis-AKI)中的作用及其机制。方法选取8~10周,雄性,体质量(20±2)g,C57BL/6背景的野生型的Fgl2^+/+和Fgl2基因敲除的Fgl2^-/-小鼠为研究对象。实验分为4组:Fgl2^+/+(Saline组)、Fgl2^-/-(Saline组)、Fgl2^+/+(Cis-AKI组)、Fgl2^-/-(Cis-AKI组)。Saline(0.9%生理盐水)组每组4只,Cis-AKI组每组6只。Cis-AKI组予以单次腹腔注射顺铂(20 mg/kg,200μl),Saline组予以相同体积及相同给药方式的0.9%生理盐水。72h后各组小鼠取眼球血,收集血清,断颈处死小鼠,获取肾脏组织。全自动生化分析仪检测血清肌酐(serum creatinine,Scr)及尿素氮(blood urea nitrogen,BUN);石蜡切片HE染色检测小鼠肾组织病理改变,实时定量PCR(qRT-PCR)检测小鼠肾组织中Fgl2、肾损伤分子1(kidney injury molecule-1,KIM-1)、中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白(neutrophil gelatinase-associated lipocalin,NGAL)、白细胞介素6(interleukin-6,IL-6)、单核细胞趋化蛋白1(monocyte chemoattractant protein-1,MCP-1)、肿瘤坏死因子α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)、白细胞介素1β(interleukin-1β,IL-1β)及白细胞介素10(interleukin-10,IL-10)的mRNA水平;免疫组织化学染色法(immunohistochemistry,IHC)检测小鼠肾组织中Fgl2、CD45的表达;免疫印迹(Western blot)检测肾组织中Fgl2、p38、p-p38、p65、p-p65、裂解的半胱天冬酶-3(cleaved-caspase3)、裂解的半胱天冬酶-9(cleaved-caspase9)的蛋白水平;原位末端转移酶标记技术(terminal deoxynucleotidyl transferase-mediated dUTP nick end-labelling,TUNEL)检测小鼠肾小管上皮细胞凋亡;免疫荧光(immunofluorescence,IF)检测p-p65蛋白表达。结果Fgl2^+/+(Cis-AKI)组小鼠肾组织Fgl2表达较Fgl2^+/+(Saline)组显著升高。Cis-AKI组中,与Fgl2^+/+组相比,Fgl2^-/-组小鼠血清BUN、Scr显著升高;肾组织中KIM-1、NGAL的表达显著增加,肾脏组织病�
- 孟利杨雁吴舜张克勤彭侃夫
- 关键词：急性肾损伤顺铂炎症凋亡
- Fgl2在小鼠肾纤维化中的作用及机制研究被引量：3
- 2020年
- 目的研究纤维蛋白原样蛋白2(Fgl2)对小鼠肾纤维化病理改变的影响及其机制。方法选取野生型小鼠(Fgl2^+/+)和相同背景的Fgl2基因敲除小鼠(Fgl2^-/-),通过单侧输尿管结扎(UUO)建立肾纤维化模型,将小鼠随机分为3组:1)假手术(sham)组;2)Fgl2^+/+UUO组;3)Fgl2^-/-UUO组。术后第7天收集小鼠肾组织。qRT-PCR检测Fgl2、α平滑肌动蛋白、胶原蛋白Ⅰ、转化生长因子β1、诱导型一氧化氮合酶、IL-12、肿瘤坏死因子α、IL-1β、精氨酸酶1、类几丁质酶3样分子、炎症区分子1和甘露糖受体的mRNA水平;IHC检测胶原蛋白Ⅰ和纤连蛋白的表达;Masson染色观察胶原纤维沉积情况;流式细胞术检测纤维化肾组织中巨噬细胞、M1型巨噬细胞、M2型巨噬细胞的比例。结果UUO手术7 d后,与Sham组小鼠相比,UUO诱导的纤维化肾组织中Fgl2的表达显著升高;Fgl2基因敲除显著促进小鼠肾组织纤维化,并且M2型巨噬细胞的极化明显增强。结论Fgl2基因敲除可通过促进M2型巨噬细胞极化加剧肾纤维化病理改变。
- 吴舜唐铭张克勤
- 关键词：肾纤维化
- Fgl2在肾纤维化中的作用及机制探讨
- 研究背景慢性肾脏病(Chronic kidney disease,CKD)是指各种原因导致的慢性肾脏结构的改变或者功能障碍超过三个月的一类慢性疾病。随着我国人口的老龄化及代谢性疾病的增多,CKD的发病率逐年升高,给家庭和...
- 吴舜
- 关键词：肾纤维化
