国家自然科学基金(30872202)
- 作品数:3 被引量:93H指数:2
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- 一种获得高纯度包涵体蛋白的简便方法被引量:5
- 2011年
- 以日本血吸虫SjBMP基因部分编码序列构建SjBMP-pET-28a(+)重组原核表达质粒,并转化至大肠埃希菌(E.coli)BL21(DE3)进行原核表达。将经过鉴定的目的蛋白rSjBMP以包涵体形式表达的诱导菌样通过Ni2+-NTA Agarose亲和纯化和十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)切胶再纯化。用该纯化蛋白制备免疫血清,用蛋白质印迹(Western blotting)检测其免疫反应性。结果显示,经Ni2+-NTA Agarose亲和纯化和SDS-PAGE切胶再纯化,获得高纯度的目的蛋白,回收率>11.0%。用该纯化蛋白免疫家兔制备免疫血清,获得的血清效价高于1∶1 280;Western blotting检测结果表明,用该免疫血清去识别表达的重组蛋白,出现特异的单一条带,表明该纯化蛋白仍保持其抗原性,可用于免疫学相关实验研究。因此,SDS-PAGE切胶纯化后电渗、透析回收是纯化重组包涵体蛋白有效、简便的方法。
- 刘镕钟沁萍蒋明森董惠芬
- 关键词:重组蛋白原核表达包涵体纯化
- TGF-β信号传导通路及其生物学功能被引量:88
- 2014年
- TGF-β信号传导通路是一个包含众多成员的多功能细胞因子大家族,根据配体分子激活的不同的下游特异性通路可以分为TGF-β/Activin/Nodal和BMP/GDF/MIS两个亚家族通路。该信号通路的激活首先是TGF-βs配体分子与受体结合,从而使受体TβRs磷酸化,磷酸化的TβR-I直接作用于底物Smads蛋白,活化的Smads就将配体与受体作用的信号从细胞膜、胞浆传递到细胞核内,再与其他核内因子协同激活或者抑制靶基因的转录。TGF-β信号通路就是通过调节细胞的生长、增殖、分化、迁移和凋亡等过程,在组织与器官的发生和形成(胚胎发育、骨骼等器官形成)、机体的免疫反应等生物过程发挥重要的功能。
- 刘镕赵琴平董惠芬蒋明森
- 关键词:生物学功能生殖发育胚胎发育
- B细胞免疫调节血吸虫感染的研究进展
- 2014年
- 近年的研究发现,B细胞亚群及其相关因子在抗血吸虫感染和促进感染方面发挥了双重作用。本文综述了血吸虫感染过程中,B细胞及其产生的抗体和调节性B细胞相关细胞因子——IL-10、IL-7、TGF-β进行正负免疫调控的研究进展。
- 汤宏斌董惠芬蒋明森
- 关键词:血吸虫感染B淋巴细胞免疫调控