国家自然科学基金(30671536)
- 作品数：7 被引量：21H指数：2
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- 相关机构：吉林农业大学吉林大学更多>>
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- 相关领域：生物学轻工技术与工程更多>>
- 林蛙输卵管总RNA提取方法的优化及RT-PCR验证
- 2014年
- 分别使用改良的十六烷基三甲基溴化铵(CTAB)法、TRIzol法和RNAiso Plus法对林蛙的输卵管组织进行总RNA提取,考察不同方法对总RNA提取量的影响.结果表明:利用改良的RNAiso Plus法并经进一步纯化,获得总RNA的A260/A280平均值为1.96,平均得率为56.1μg/g;通过反式多聚酶链式反应(RT-PCR)获得了林蛙GAPDH基因和EF-1-α基因的部分序列.
- 李稼晖刘回民陈文超刘景圣
- 关键词：RNA提取RT-PCR
- 长白山林蛙输卵管糖蛋白的分离鉴定被引量：2
- 2011年
- 以长白山林蛙为研究对象,对其输卵管糖蛋白进行提取分离及鉴定.长白山林蛙输卵管冲洗液经饱和硫酸铵沉淀,DEAE-Cellulose 52离子交换柱,Sephadex G-100凝胶柱层析纯化,得到蛋白质和糖的重合峰,经透析、冷冻干燥得长白山林蛙输卵管糖蛋白纯品OGP-Ⅰ.SDS-PAGE电泳实验结果表明,OGP-Ⅰ是分子量为116 000的均一带.对其分别进行蛋白和糖染色,同一位置都出现单一条带;紫外全扫描OGP-Ⅰ有多糖特征峰和蛋白吸收峰,表明OGP-Ⅰ是糖蛋白纯品.
- 郑明珠方丽吕萍陈亮刘景圣
- 关键词：纯化
- 长白山林蛙输卵管糖蛋白多抗制备及应用研究
- 2010年
- 针对长白山林蛙输卵管糖蛋白制备特异性多克隆抗体。将新鲜林蛙输卵管蛋白粗提液经SepharoseFastFlow阴离子交换柱和SephadexG-100凝胶层析柱获得纯化的输卵管糖蛋白组分。以纯化输卵管糖蛋白免疫新西兰大白兔,制备多抗血清,采用辛酸-饱和硫酸铵法对多抗进行纯化并鉴定。结果表明:纯化后的多抗ELISA效价为1:64000,纯化多抗具有较高的敏感性和特异性,效价较高。利用制备的多抗对长白山林蛙输卵管分泌细胞进行免疫组织化学定位,为分泌细胞培养产物中输卵管糖蛋白进行检测提供研究条件。
- 陈亮兰海楠郑鑫刘景圣
- 关键词：抗体免疫组化
- 自分泌运动因子(ATX)抑制剂结合位点的预测及其与rPAI-1的分子对接
- 2014年
- 利用复合物指纹的虚拟筛选预测自分泌运动因子(ATX)抑制剂的结合位点,并通过与24个抑制剂(10个脂质和脂基抑制剂,14个小分子抑制剂)分子对接和动力学模拟表明,Thr209,Asp172,Tyr306,Phe210,Leu243,Leu213和Phe274是抑制剂结合位点的重要残基,且这些残基均通过侧链与抑制剂作用.利用3D-partner预测出与ATX结合的蛋白为纤溶酶原激活物抑制剂1(rPAI-1),并通过同源模拟,得到rPAI-1的分子结构.利用软件GRAMM将ATX与rPAI-1分子结构相结合,并通过分子动力学模拟确定与大分子抑制剂rPAI-1作用的ATX重要残基Glu155和Ala158.
- 詹冬玲郑明珠韩葳葳刘景圣
- 关键词：自分泌运动因子
- 长白山林蛙输卵管糖蛋白ROGP-Ⅲ的分离纯化及鉴定被引量：1
- 2014年
- 通过正交试验确定最佳的粗提工艺,并将林蛙输卵管水提液先后通过盐析,透析,阴离子交换层析、阳离子交换层析和葡聚糖凝胶过滤层析,获得了一种分子量大小约为66 kD的单一蛋白,高碘酸-Schiff试剂法鉴定其为糖蛋白。经HPLC分析,纯度为97.2%,将其命名为ROGP-Ⅲ,经PNGase F糖苷肽酶处理后推测其糖含量约为17%。
- 李稼晖刘回民赵宏宇刘景圣
- 关键词：林蛙油糖蛋白纯化
- 林蛙油保健功能及其蛋白分离纯化的研究进展被引量：8
- 2013年
- 林蛙油是我国传统的名贵滋补品,具有抗氧化、抗衰老、提高机体免疫力等多种保健功能。详述林蛙油的主要成分以及生理功能,阐述其蛋白的分离纯化的研究现状。
- 赵宏宇刘回民李稼晖刘景圣
- 关键词：林蛙油纯化
- 响应面法优化碱法提取林蛙卵团中粗多糖的工艺研究被引量：10
- 2010年
- 以林蛙卵团胶状物为原料,采用碱法对粗多糖进行提取,在单因素试验基础上,采用响应面法对NaOH溶液浓度、料液比、提取温度及提取时间进行优化。结果表明,碱法提取林蛙卵团胶状物粗多糖的最佳工艺条件为NaOH溶液浓度1.2mol/L、料液比1:8(g/mL)、浸提温度56℃、浸提时间73min。在此条件下林蛙卵团胶状物粗多糖含量可达24.01mg/g。
- 刘晓丹郑明珠刘景圣
- 关键词：林蛙多糖响应面
