国家自然科学基金(30671527)
- 作品数：10 被引量：48H指数：4
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- 相关机构：东北农业大学更多>>
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- 相关领域：农业科学生物学轻工技术与工程医药卫生更多>>
- 组成型雄烷受体与公猪膻味物质代谢关系的研究进展被引量：1
- 2010年
- 饲养不去势公猪较去势公猪而言具有很多优势,但导致公猪膻味物质雄烯酮和粪臭素一直是限制其饲养的主要瓶颈。作者综述了组成型雄烷受体对膻味物质雄烯酮和粪臭素代谢关系的研究,为寻求一种较合适的方法减少公猪膻味提供参。
- 刘化伟娄蕾石宝明
- 关键词：雄烯酮粪臭素
- AA肉鸡IFN-γ的表达及蛋白结构的初步预测被引量：1
- 2009年
- 为了进一步研究肉鸡Ⅱ型干扰素(ChIFN-γ)蛋白的结构与功能,将新城疫Ⅳ系苗接种于9～11日龄SPF鸡胚尿囊腔中,诱生ChIFN-γ,提取脾脏总RNA,经过RT-PCR扩增出ChIFN-γ基因cDNA,测序后亚克隆至原核表达载体pProEXTMHTb中,转化大肠杆菌DH5α,用IPTG诱导表达后,进行SDS-PAGE及Westen Blot检测,利用DNAStar软件包中的Editseq将ChIFN-γ核苷酸序列翻译成氨基酸序列,然后利用Protean软件进行氨基酸序列分析,对蛋白的二级结构进行初步预测,利用自动比较蛋白同源建模的服务器Swiss-Model对ChIFN-γ的氨基酸序列进行三级结构预测。结果显示,所克隆的ChIFN-γ序列大小为495bp,与Digby和Lowenthal首次克隆的鸡Ⅱ型干扰素的同源性为99.8%。表达出预期大小(18ku左右)的融合蛋白,可以与His单克隆抗体发生特异性反应,蛋白质结构预测表明,ChIFN-γ蛋白具有丰富的二级结构和多处抗原指数较高的区段,其解螺旋最低能量值为-4245.698kJ·mol-1,有6个α螺旋结构。
- 孙进华徐良梅姜文博代丽单安山
- 关键词：肉鸡蛋白蛋白质结构
- 牛乳铁蛋白素(1-15)-蜂毒素(5-12)杂合肽基因的合成及在大肠杆菌中的表达被引量：5
- 2009年
- 为了构建新型的杂合肽,设计了一种新型杂合抗菌肽牛乳铁蛋白素（1-15）-蜂毒素（5-12）,由牛乳铁蛋白素（LfcinB）N端第1~15个氨基酸残基和蜂毒素（Melittin）N端第5~12个氨基酸残基组成。根据大肠杆菌密码子的偏爱性,设计合成了杂合肽LfcinB（1-15）-Melittin（5-12）的基因片段,插入到表达载体pET-32a的NcoI和SalI的酶切位点之间,构建重组表达质粒。重组表达质粒转化到Escherichia coli BL21（DE3）中,经异丙基-β-D-硫代半乳糖苷（IPTG）诱导表达,融合蛋白以可溶形式在Escherichia coli BL21（DE3）中获得成功表达,表达量占菌体总蛋白的35%以上,每升培养物可获得35mg融合蛋白。带His标签的融合蛋白经His-Bind纯化试剂盒纯化、肠激酶切割和抑菌实验表明,杂合肽具有明显的抑菌效果。这为利用基因工程方法生产抗菌肽奠定了理论基础。
- 毕重朋冯兴军单安山郭佳音
- 关键词：蜂毒素
- 鸡γ-干扰素的可溶性表达及纯化产物的抗NDV活性被引量：5
- 2011年
- 将鸡γ-干扰素(chIFN-γ)基因先克隆,接着通过大肠杆菌表达后进行产物纯化与活性检测。通过PCR方法以带有信号肽的重组质粒PMD-18T-preIFN-γ为模板,扩增无信号肽chIFN-γ基因片段,克隆至原核表达载体pProEXTM HTa,构建重组表达质粒pProEXTM HTa-chIFN-γ,在大肠杆菌BL21(DE3)中经IPTG诱导表达,然后利用Novagen蛋白纯化试剂盒进行天然纯化可溶性蛋白,并进行SDS-PAGE、Western blot鉴定,同时利用CEF-NDV系统测定抗病毒活性。结果表明,459 bp的chIFN-γ成熟蛋白编码基因被成功克隆,同时chIFN-γ蛋白在大肠杆菌中也获得了成功表达,分子质量约为20 ku,能与抗His的单克隆抗体发生特异性反应。表达蛋白一部分形成包涵体,另一部分以可溶形式存在,可溶性蛋白经镍柱在天然条件下的纯化得率约为1.9 mg·mL-1。生物学活性试验表明,1 54稀释纯化的重组chIFN-γ(rchIFN-γ)孵育CEF细胞后能抵抗100TCID50的NDV(新城疫Ⅳ系弱毒苗)攻击。研究纯化获得的rchIFN-γ具有较好的抗病毒活性,为研制新型抗病毒干扰素制剂奠定基础。
- 代丽单安山孙进华尹佳佳李远见
- 关键词：克隆可溶性表达病毒活性
- 白细胞介素-2的研究进展与应用被引量：15
- 2009年
- 白细胞介素-2又称T淋巴细胞生长因子,是T淋巴淋巴细胞受抗原刺激后所分泌的具有免疫调节作用的淋巴因子。白细胞介素-2除了能在体外维持T淋巴细胞长期增殖与分化外,还具有增强自然杀伤细胞的杀伤活性及促进B细胞分化与增殖的能力,以及诱导淋巴因子激活的杀伤细胞(LAK)产生等重要生物学作用。研究发现,白细胞介素-2在抗肿瘤、抗毒素、免疫调节及感染性疾病的治疗等方面具有重要作用。
- 刘佳单安山孙进华
- 关键词：细胞因子免疫抗肿瘤抗病毒
- 鸡白细胞介素18基因的克隆及表达
- 白细胞介素18(Interleukin18,IL-18)是近年来新发现的一种重要的细胞免疫调节因子。IL-18具有广泛的生物学活性,能够促进 IFN-γ的产生,刺激淋巴细胞转化,增强 NK 细胞的杀伤活性等方面具有重要的...
- 姜文博单安山孙进华
- 关键词：鸡白细胞介素18克隆原核表达
- 文献传递
- 营养性抗免疫应激添加剂的研究进展被引量：1
- 2010年
- 免疫应激是指动物接种疫苗后少数动物体温升高、采食量下降及日粮中的营养物质南维持生长和骨骼肌沉积转向用于维持免疫反应引起的代谢改变。广义的“免疫应激”又称免疫激发，包括亚健康状态下动物受到饲养环境中病原体，如：细菌、病毒和内毒素等的影响打破了畜禽的内环境，需要畜禽以适应性的反应达到新的动态平衡而引起的免疫应激。免疫应激对动物免疫系统的作用是通过糖皮质激素介导的。在免疫应激过程中，
- 陈鹏徐丽兰单安山
- 关键词：免疫应激营养性饲养环境亚健康状态动物体
- 鸡IL-18基因的克隆表达及对新城疫疫苗诱导的HI抗体变化的研究被引量：2
- 2009年
- 通过RT-PCR方法从新城疫Ⅰ系疫苗诱导的11日龄鸡胚脾脏细胞中扩增出鸡白细胞介素18(Chicken interleukin-18,ChIL-18)成熟蛋白基因的cDNA,并将其克隆到pMD18-T载体上。DNA序列测定表明,克隆得到ChIL-18全基因,其编码区大小为597bp,编码198个氨基酸多肽。将该基因片段克隆到原核表达载体pProEXTMHTb构建重组质粒pProEXTMHTb-ChIL-18转化大肠杆菌DH5α中,并用IPTG诱导。重组菌菌体裂解物SDS-PAGE可检测到相对分子量为28.6ku的重组蛋白。观察ChIL-18蛋白对新城疫疫苗诱导的HI抗体动态变化。结果表明,同时接种ChIL-18蛋白和活疫苗的免疫鸡在接种后,所产生的HI抗体效价高于PBS和活疫苗免疫组,并且,HI抗体效价在15d及热应激24h时表现差异显著(P<0.05)。表明ChIL-18蛋白对新城疫疫苗诱导的HI抗体有增强作用。
- 姜文博孙进华单安山
- 关键词：鸡白细胞介素18新城疫疫苗
- 重组鸡细胞因子的克隆表达及表达产物抗热应激活性
- 本实验旨在讨论重组鸡γ-干扰素的克隆与表达,同时研究其表达产物对肉仔鸡热应激条件下热应激蛋白70的影响。γ-干扰素是细胞因子中常见的一种,在抗病毒、细菌和寄生虫等方面发挥着重要的作用。近几年来,它作为一种有效的免疫佐剂相...
- 代丽单安山孙进华尹佳佳李远见
- 关键词：生物学活性
- 文献传递
- 鸡γ-干扰素的功能及临床应用被引量：14
- 2009年
- γ-干扰素(interferon gamma,IFN-γ)是干扰素的一种,是一类具有多种调节效应的细胞因子,主要由活化的T细胞和NK细胞产生,IFN-γ是动物机体最重要的细胞因子之一,是主要的巨噬细胞活化因子。由于其具有广谱高效抗病毒、抗肿瘤活性及其强大的免疫调节作用,IFN-γ已成为当今免疫学、病毒学、细胞学、分子生物学、临床医学、肿瘤学等相关领域的研究热点,被广泛应用于人类疾病临床治疗和动物疾病防控研究。文章就鸡IFN-γ的分子结构、作用机理、生物学功能、存在问题及临床应用等方面做简要综述。
- 孙进华徐良梅李建平单安山
- 关键词：免疫
