国家自然科学基金(30960355)
- 作品数：23 被引量：97H指数：6
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- 相关机构：石河子大学石河子大学医学院第一附属医院新疆医科大学第五附属医院更多>>
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- 结核分枝杆菌感染中巨噬细胞凋亡的研究进展被引量：5
- 2012年
- 结核病（TB）是由结核分枝杆菌（Mycoba teriumtuberculosis，MTB）引起的一种世界性传染病，也是单一致病菌感染导致死亡率最高的感染性疾病。近年来随着人口流动增加、HIV与结核分枝杆菌伴发感染以及结核分枝杆菌多重耐药性菌株的出现等原因，使全球结核病疫情再度回升，全球每年新发现结核病患者1000万，年死亡300万。
- 庹清章张万江
- 关键词：结核分枝杆菌感染巨噬细胞凋亡结核病疫情致病菌感染耐药性菌株结核病患者
- 结核分枝杆菌国际标准强毒株H37Rv菌株Hsp16．3基因打靶载体的构建与鉴定
- 2012年
- 结核分枝杆菌感染人体后主要寄生在宿主巨噬细胞内，结核分枝杆菌小分子热休克蛋白（smallheatshockproteins，sHSPs）Hsp16．3是其在宿主巨噬细胞内生存繁殖所必需的蛋白质，已有研究表明Hsp16．3与结核分枝杆菌的潜伏感染关系密切，本研究利用基因敲除技术构建了结核分枝杆菌国际标准强毒株H37Rv菌株Hsp16．3基因打靶载体，
- 田玺择徐芳董江涛姚楠吴芳章乐曹旭东张万江
- 关键词：结核分枝杆菌感染HSP16.3基因敲除技术打靶载体强毒株小分子热休克蛋白
- 结核分枝杆菌感染小鼠动物模型的建立及研究进展被引量：7
- 2011年
- 小鼠动物模型是结核分枝杆菌(MTB)感染研究中应用最为广泛的动物模型,能不同程度地模拟人体结核病发展过程,并且可以较为准确地评价结核病的病理损伤、存活时间以及免疫学机制,为研究感染状态下MTB生理特性,抗原表达情况及解释MTB感染的发生、维持、活化提供病原体方面的信息。成功建立MTB感染的小鼠动物模型对MTB感染研究工作非常重要。
- 董江涛张万江
- 关键词：结核分枝杆菌小鼠动物模型急性感染
- 不同毒力结核分枝杆菌对感染宿主巨噬细胞应激的调控作用研究被引量：7
- 2013年
- 目的探讨不同毒力结核分枝杆菌对感染宿主巨噬细胞应激的调控作用。方法以结核分枝杆菌国际标准强毒株H37Rv菌株(简称H37Rv菌株)和卡介苗菌株(简称BCG)分别感染小鼠巨噬细胞RAW264.7,在感染1、6、12、24h后,分别采用化学比色法检测感染巨噬细胞超氧化物歧化酶(SOD)和一氧化氮合酶(NOS)的活性变化,并测定感染巨噬细胞的丙二醛(MDA)和一氧化氮(NO)含量变化。结果 RAW264.7感染BCG后细胞内SOD、NOS活性和NO含量逐渐升高,感染24h分别为(32.82±0.54)U/ml、(12.16±0.29)U/ml和(116.42±3.23)μmol/L,与对照组比较差异有统计学意义(P<0.05);MDA含量逐渐下降,感染24h时为(0.59±0.08)nmol/ml,与对照组比较差异有统计学意义(P<0.05);RAW264.7感染H37Rv菌株后细胞内SOD、NOS和NO含量逐渐下降,感染24h分别为(15.90±0.20)U/ml、(2.32±0.11U/ml)和(13.74±1.01μmol/L),与对照组比较差异有统计学意义(P<0.05):MDA含量逐渐增加,感染24h时为(5.21±0.39)nmol/ml,与对照组比较差异有统计学意义(P<0.05)。结论低毒力和高毒力结核分枝杆菌分别对感染宿主巨噬细胞的应激发挥诱导和抑制等不同作用。
- 刘丹霞董伟杰庹清章刘云霞李微章乐吴芳张万江
- 关键词：结核分枝杆菌巨噬细胞应激
- 结核分枝杆菌热休克蛋白Hsp16.3的表达、纯化及鉴定被引量：5
- 2012年
- 目的构建结核分枝杆菌小分子热休克蛋白Hsp16.3原核表达载体,获得Hsp16.3蛋白,并进行纯化及鉴定。方法以结核分枝杆菌H37Rv株基因组DNA为模板,应用PCR方法扩增Hsp16.3基因,以pET28a为载体,构建重组质粒pET28a-Hsp16.3,测序正确后,转入宿主菌BL21(DE3)进行诱导表达。融合蛋白经SDS-PAGE,Western blot分析鉴定,并通过镍柱进行亲和层析纯化,表达蛋白分子质量约17ku,能被结核杆菌16ku单抗和小鼠抗His Tag单抗识别。结果成功构建了Hsp16.3原核表达载体pET28a-Hsp16.3,并在宿主菌BL21(DE3)中表达,表达蛋白分子质量单位约17ku,能被结核杆菌16ku单抗和小鼠抗His Tag单抗识别。结论 Hsp16.3基因克隆入宿主菌中并成功表达,纯化Hsp16.3蛋白具有生物学活性,为Hsp16.3的进一步研究奠定了基础。
- 徐芳姚楠田玺泽董江涛吴芳章乐张万江
- 关键词：结核分枝杆菌HSP16.3蛋白表达纯化
- 结核分枝杆菌的休眠机制研究进展被引量：6
- 2011年
- 结核病是长期危害人类健康的严重传染病之一，全球每年因肺结核死亡的患者超出300万例之多。我国是世界一k22个结核病高负担国家之一，现有结核病患者约500万例，仅次于印度，居世界第2位。
- 姚楠张万江
- 关键词：结核分枝杆菌结核病患者休眠传染病肺结核
- 结核分枝杆菌小分子热休克蛋白Hsp16.3基因缺失突变菌株对感染小鼠肺泡巨噬细胞凋亡率的影响及其时相性变化被引量：3
- 2013年
- 探讨结核分枝杆菌小分子热休克蛋白Hsp16.3基因缺失突变菌株对感染小鼠肺泡巨噬细胞凋亡率的影响及其时相性变化。用激光共聚焦显微镜技术检测及鉴定结核分枝杆菌感染小鼠肺泡巨噬细胞,流式细胞术检测不同时期感染小鼠肺泡巨噬细胞凋亡率,比较结核分枝杆菌Hsp16.3基因缺失突变株与正常株感染小鼠肺泡巨噬细胞凋亡率的时相性变化。激光共聚焦显微镜检测结果显示:结核分枝杆菌国际标准强毒株H37Rv株、结核分枝杆菌国际标准强毒株H37Rv株Hsp16.3基因缺失突变株(△H37Rv)、卡介苗菌株(BCG)以及卡介苗株Hsp16.3基因缺失突变株(△BCG)均被小鼠肺泡巨噬细胞大量吞噬。流式细胞技术检测结果显示:小鼠感染△H37Rv菌株后,巨噬细胞的凋亡率逐渐上升,至感染7d时达到高峰,随后逐渐降低,1～7d内,各时间段△H37Rv感染组巨噬细胞凋亡率均显著高于H37Rv感染组,9～11d内,△H37Rv感染组巨噬细胞凋亡率反而低于H37Rv菌株组,但13～15d内,△H37Rv感染组巨噬细胞凋亡率又呈现出比H37Rv感染组高的现象,差异均有统计学意义(P<0.05)。△BCG组凋亡率1～7d内呈现明显下降趋势,7d后巨噬细胞凋亡率变化趋于平稳,且1～5d内,△BCG组凋亡率显著高于BCG组(P<0.05),7～15d内,△BCG组与BCG组巨噬细胞凋亡率无明显差异。结果表明:与结核分枝杆菌H37Rv株野生株相比,结核分枝杆菌H37Rv株Hsp16.3基因缺失突变株在感染的早期和晚期对小鼠肺泡巨噬细胞有更强的致凋亡作用,而这种致凋亡作用与结核分枝杆菌小分子热休克蛋白Hsp16.3基因的缺失相关,说明在结核分枝杆菌感染的早期和晚期,结核分枝杆菌小分子热休克蛋白Hsp16.3的表达能够抑制宿主巨噬细胞的凋亡。
- 赵小杰黄晓艳庹清章董江涛田玺择刘云霞董伟杰刘丹霞李微吴芳章乐张万江
- 关键词：结核分枝杆菌缺失突变凋亡
- 结核分枝杆菌对感染宿主细胞凋亡的调控作用研究被引量：4
- 2012年
- 巨噬细胞是结核分枝杆菌(MTB)在体内的主要宿主细胞,其发生凋亡后,可杀灭胞内感染的MTB,使其不在体内的扩散。不同毒力MTB感染可诱导巨噬细胞产生不同水平的凋亡;同时,MTB毒力株可通过一系列机制抑制巨噬细胞凋亡,以逃避巨噬细胞的杀伤。MTB对宿主细胞凋亡的调控呈现出复杂性和多面性。进一步了解MTB对感染宿主巨噬细胞凋亡调控作用,有助于人们更好地预防和控制结核病。
- 董伟杰张万江
- 关键词：结核分枝杆菌巨噬细胞凋亡
- 结核分枝杆菌对异烟肼和利福平耐药的研究进展被引量：6
- 2011年
- 结核病（Tuberculosis,TB）是由结核分枝杆菌（Mycobac-terium Tuberculosis）引起的世界性传染病,尽管药物等抗结核的有效治疗已经有50多年,结核病仍然是单一致病菌感染导致死亡率最高的感染性疾病。据WHO统计,全世界约每3个人中就有1个人感染了结核分枝杆菌,在某些发展中国家成人中结核分枝杆菌携带率高达80%,其中约5%～10%携带者可发展为活动性结核病。
- 周江张万江
- 关键词：结核分枝杆菌利福平耐药异烟肼活动性结核病感染性疾病致病菌感染
- 结核杆菌PhoPR双组分系统与广泛流行的耐药结核杆菌耐药性的相关性研究
- 2013年
- 目的：通过比较分析不同耐药的结核杆菌临床分离株PhoP基因和PhoR基因的表达水平差异，探讨研究结核杆菌PhoPR双组分系统与新疆地区广泛流行的耐药结核杆菌耐药性是否具有相关性。方法以新疆地区广泛流行的耐药结核杆菌临床分离株为研究对象，分别提取结核分枝杆菌临床分离药物敏感菌株、单纯耐异烟肼的结核杆菌临床分离株（ INH-MTB）、单纯耐利福平的结核杆菌临床分离株（ RFP-MTB）、单纯耐链霉素的结核杆菌临床分离株（ SM-MTB）、单纯耐乙胺丁醇的结核杆菌临床分离株（ EB-MTB）、耐多药结核杆菌临床分离株（ MDR）总RNA，并进行纯度鉴定，运用SYBR GreenⅠ实时荧光定量PCR的方法，分别检测各组结核杆菌菌株的PhoP基因和PhoR基因的表达，比较分析不同耐药的结核杆菌临床分离株PhoP基因和PhoR基因的表达水平的差异。结果与结核分枝杆菌临床分离药物敏感菌株相比，PhoP基因在RFP-MTB中的表达上调1．48倍，在MDR中的表达上调2．74倍，差异有统计学意义（P＜0．05）；与MDR相比，PhoP基因在INH-MTB、RFP-MTB、SM-MTB和EB-MTB中的表达下调0．70、0．50、0．25和0．21倍，差异有统计学意义（P＜0．05）。与结核分枝杆菌临床分离药物敏感菌株相比，PhoR基因在INH-MTB、RFP-MTB、SM-MTB和EB-MTB中的表达分别上调6．33、4．56、2．34和1．85倍，在MDR中的表达上调9．06倍，差异有统计学意义（ P＜0．05）；与 MDR相比，PhoR基因在INH-MTB、RFP-MTB、SM-MTB 和EB-MTB 中的表达下调0．36、0．54、0．35和0．19倍，差异有统计学意义（P＜0．05）。结论在结核分枝杆菌临床分离药物敏感菌株、INH-MTB、RFP-MTB、SM-MTB、EB-MTB和MDR中，结核杆菌PhoP和PhoR基因的表达有差异，结核杆菌PhoPR双组分系统与新疆地区广泛流行的耐药结核杆菌的耐药性具有相关性。
- 李文娟宝音王霞张峰梁晨庄睿樊超庹清章张春军张辉吴芳吴江东章乐张万江
- 关键词：结核分枝杆菌耐药性
