广东省自然科学基金(04010451) 作品数:19 被引量:36 H指数:3 相关作者: 邢飞跃 李岩 于哲 刘静 陈玲 更多>> 相关机构: 暨南大学 四川大学 广东医学院 更多>> 发文基金: 国家自然科学基金 广东省自然科学基金 更多>> 相关领域: 医药卫生 生物学 更多>>
溶血磷脂酰胆碱诱导人血管eNOS基因表达的信号调控机制 被引量:2 2005年 邢飞跃 刘静关键词:溶血磷脂酰胆碱 信号调控机制 生物学活性 氯化钴对人eNOS基因启动子SP3替换改构体转录活性的影响 被引量:2 2010年 目的:构建改造的人血管内皮细胞一氧化氮合酶基因启动子,利用氯化钴诱导的人脐静脉血管内皮细胞-12缺氧模型研究其基因启动子活性变化。方法:含SP1替换SP3突变序列的引物通过PCR构建突变启动子pGL2-eNOS-repSP3载体,将已经构建好的pGL2-eNOS—repSP3载体和pGL2-eNOS分别转染HUVEC-12细胞,并以之前构建的SP1插入eNOS启动子改构体pGL2-eNOS—insSP1为阳性对照,通过双荧光素酶报告基因技术检测并比较不同浓度氯化钴刺激下eNOS启动子转录活性的变化。结果:成功构建了含SP1替换SP3突变序列的eNOS启动子改构体。氯化钴刺激后转染细胞,改构体eNOS启动子活性在一定范围内呈现随氯化钴剂量增加而升高的趋势;SP1替换SP3的eNOS启动子转录活性与SP1插入的eNOS启动子之间无显著差异。结论:pGL2-eNOS—rep—SP3和pGL2-eNOS—insSP1两种改造方法在转录活性上没有显著差别。 龙宇天 邢飞跃关键词:启动子 氯化钴 TLR9的特性及其介导CpG DNA的信号通路 被引量:2 2005年 李岩 邢飞跃关键词:CPG 信号通路 免疫应答 特异性配体 可溶性Jagged1/Fc嵌合蛋白对小鼠淋巴细胞活化、增殖和周期的影响 被引量:1 2008年 目的:研究可溶性Jagged 1/Fc嵌合蛋白在小鼠淋巴细胞活化、增殖和周期中的作用。方法:选择有效剂量为500μg/L Jagged 1/Fc嵌合蛋白(Jagged 1/Fc),以活体染料/羧基荧光素乙酰乙酸琥珀酰亚胺酯染色,建立在多克隆刺激剂刀豆蛋白A(ConA)或佛波醇酯(PDB)加离子霉素(Ion)刺激下评价淋巴细胞增殖的模型,通过流式细胞术分析Jagged 1/Fc对淋巴细胞增殖的作用;采用碘化丙锭染色检测Jagged 1/Fc对PDB加Ion刺激的淋巴细胞周期变化的影响;利用荧光标记的mAb双染技术观察Jagged 1/Fc对T细胞早期和中期活化标志CD69和CD25表达的影响。结果:Jagged1/Fc对ConA刺激或非刺激的CD3+细胞CD69和CD25的表达无明显影响,对ConA或PDB加Ion刺激或非刺激的淋巴细胞的增殖指数也无明显影响,导致非刺激的淋巴细胞sub-G0期细胞百分比增高,S期细胞百分比降低,但并不影响PDB加Ion诱导的淋巴细胞各期的变化。结论:这些结果提示500μg/L Jagged 1/Fc对小鼠淋巴细胞活化和增殖无明显作用,对PDB加Ion刺激的淋巴细胞周期也无明显影响,但能促进未受刺激的淋巴细胞凋亡,使细胞停滞于G0/G1期,阻止其进入S期。 邢飞跃 于哲 刘静 季煜华关键词:JAGGED 淋巴细胞 活化 增殖 细胞周期 Human TSLP-Educated DCs 被引量:4 2008年 Thymic stromal lymphopoietin (TSLP), an IL-7-related cytokine, is widely expressed by epithelial cells in many tissues with different biological effects. Human TSLP (hTSLP) has been shown to play an important role in promoting T cell homeostasis, developing nondeletional central tolerance, amplifying epithelium-induced class switching, inducing atopic diseases and maintaining intestinal noninflammatory environment. Among diverse cells responding to hTSLP, dendritic cells (DCs) are the most obviously characterized target cells. In this review, we attempt to outline an effect of the functional versatility of hTSLP-activated DCs (hTSLP-DCs) on T cells. Cellular & Molecular Immunology. Jiongkun Wang Feiyue XingJagged1(CD339)诱导调节性T细胞分化、成熟及介导免疫耐受 被引量:3 2005年 于哲 邢飞跃 曾耀英关键词:JAGGED1 调节性T细胞 分化 超抗原SEB和SEC诱导的树突状细胞对T细胞的影响 被引量:2 2005年 目的:阐明超抗原葡萄球菌肠毒素B(SEB)和葡萄球菌肠毒素C(SEC)诱导树突状细胞(dendriticcells,DC)促进T细胞活化、增殖、分泌及其对肝癌HcaF细胞的杀伤作用。方法:以SEB或SEC诱导DC刺激T细胞,免疫组化染色检测DC表达S-100蛋白;流式细胞术检测DC表达I-Eκ和CD80分子水平,检测T细胞受刺激后CD69的表达、IL-2和TNF-α的生成;用MTT法检测T细胞增殖及其对HcaF细胞的杀伤效应。结果:体外试验表明,DC高表达S-100蛋白,SEB或SEC诱导的DC高表达I-Eκ和CD80分子;SEB或SEC能诱导DC促进T细胞活化,其浓度以100μg/L时作用最强;SEB或SEC能诱导DC促进T细胞增殖、大量分泌IL-2和TNF-α,被激活的T细胞对HcaF细胞的杀伤率高达83.2%±12.8%,明显优于肿瘤抗原诱导的DC所激活的T细胞对HcaF细胞的杀伤作用;SEB与SEC的诱导作用无明显差异。结论:超抗原SEB或SEC能诱导DC显著增强T细胞活化、增殖、分泌和杀伤肿瘤细胞,并优于肿瘤抗原的诱导作用,SEB和SEC的作用相似,为超抗原SEB或SEC与DC联合应用于临床肿瘤的治疗提供了证据。 邢飞跃 李明 申志华 李岩关键词:树突状细胞 T淋巴细胞 可溶性Jagged-1/Fc嵌合蛋白诱导淋巴结细胞向CD4^+CD25^+T细胞分化 2008年 直接用可溶性Jagged-1/Fc嵌合蛋白(Jagged-1/Fc)在体外诱导小鼠淋巴结细胞向CD4+CD25+T细胞分化.通过荧光标记单克隆抗体染色结合流式细胞术,观察不同剂量Jagged-1/Fc在不同时间对淋巴结细胞向CD4+CD25+T细胞分化的影响,观察Jagged-1/Fc诱导T细胞内细胞因子的变化;藉ELISA法检测Jagged-1/Fc诱导分化的T细胞分泌TGF-β1、IL-4和IL-10的水平.结果显示,超过500.0μg/L剂量的Jagged-1/Fc使CD4+CD25+T细胞百分比明显增高,诱导时间需要4~6天,抗Jagged-1单抗能抵消Jagged-1/Fc的诱导作用,用DAPT阻断Notch信号通路的活化也能抑制Jagged-1/Fc的诱导作用,Jagged-1/Fc诱导分化的T细胞培养上清中IL-4和IL-10的水平明显增高,TGF-β1无明显变化,胞内IL-4,IL-10,IL-2和TNF-α的水平也呈增高趋势.上述结果表明,可溶性Jagged-1/Fc嵌合蛋白在体外可诱导小鼠淋巴结细胞向CD4+CD25+调节性T细胞分化. 邢飞跃 刘静 于哲 季煜华关键词:JAGGED-1 淋巴结细胞 分化 Jagged1在树突状细胞介导淋巴细胞诱导皮肤移植免疫耐受中的作用 2008年 目的:探讨Jagged1在树突状细胞(DC)介导淋巴细胞诱导同种异基因皮肤移植免疫耐受中的作用。方法:C57BL/6小鼠为供体,BALB/c小鼠为受体行皮肤移植术,受体小鼠分为对照组,Jagged1+DAPT处理组和Jagged1处理组。取供体小鼠淋巴细胞加入经rmIL-4和rmGM-CSF处理9 d的供体骨髓细胞中,当日和隔日分别加入Jagged1和DAPT。2 d后取淋巴细胞,于皮肤移植第0天、第2天和第4天,经尾静脉注入受体小鼠。观察皮肤移植物存活时间和移植物病理变化,并检测受体小鼠混合淋巴细胞反应和迟发型超敏反应。结果:Jagged1处理组的皮肤移植物平均存活83.6 d,显著长于其它各组(P<0.01);Jagged1处理组移植皮片内浸润的炎细胞数量明显减少;在混合淋巴细胞反应中,Jagged1处理组小鼠对供体小鼠呈现低反应性(P<0.01),而对第三方无关供体KM小鼠表现强烈的增殖反应,Jagged1处理组小鼠在迟发型超敏反应中也表现出显著的低反应性(P<0.01)。结论:输注Jagged1联合DC处理的淋巴细胞诱导受体获得供体抗原特异性的免疫耐受。 陈玲 邢飞跃 狄静芳 陈笛 廖继东关键词:JAGGED1 树突状细胞 骨髓细胞 皮肤移植 喜树碱诱导的HL-60细胞凋亡过程中线粒体的变化 被引量:2 2006年 目的:研究喜树碱(CPT)诱导的人早幼粒细胞性白血病细胞HL-60凋亡过程中线粒体的质量和膜电势的变化。方法:以CPT诱导HL-60细胞凋亡为模型,利用膜联蛋白V(annexinV)-FITC/PI双染流式细胞术,研究HL-60细胞的凋亡和坏死。用DiOC6(3)染色流式细胞术,检测线粒体的膜电势(△ψm)。用NAO染色流式细胞术,检测线粒体的质量。结果:在4×10-6mol/LCPT的诱导下,HL-60细胞(12h)早期的凋亡率为(12.75±4.61)%,对照组为(2.88±2.49)%,二者相比较差异显著(P<0.01);CPT组坏死比率为(3.48±1.67)%,对照组为(0.71±1.10)%(P<0.01)。PI染色的结果显示,HL-60细胞(12h)晚期凋亡细胞的百分率,CPT组为(3.52±1.07)%,对照组为(0.46±1.06)%(P<0.01)。同时观察到,G2/M期细胞出现阻滞,G2/M期细胞的百分率,对照组为(22.46±2.19)%,CPT组为(13.45±1.91)%(P<0.01)。在12h时间点,CPT组线粒体的质量显著低于对照组(P<0.01),低线粒体质量的细胞所占百分率,对照组为(4.53±1.26)%,CPT组为(25.74±2.09)%。同时,CPT组线粒体的膜电势显著下降(P<0.01),CPT组线粒体膜电势降低的比率为(17.71±5.23)%,对照组为(1.64±2.00)%。结论:CPT诱导HL-60细胞凋亡过程中,线粒体的质量和膜电势均有所下降,但其去极化作用增强。 贺芳 曾耀英 王通 邢飞跃 林羿 梁佩燕 肇静娴关键词:喜树碱 凋亡 线粒体