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水通道蛋白9表达水平影响HepG2肝癌细胞的生物学行为及对As_2O_3的敏感性被引量：4: 2015年; 目的研究水通道蛋白9(AQP9)表达水平对三氧化二砷(As2O3)诱导Hep G2肝癌细胞凋亡及对其生物学行为的影响。方法采用MTT法筛选As2O3对肝癌细胞Hep G2增殖抑制作用;将重组质粒p EGFP-N1-AQP9和pshRNA-AQP9转染肝癌细胞,反转录PCR检测AQP9 mRNA的表达,Western blot法检测AQP9蛋白表达;将As2O3加入转染后及未处理的Hep G2细胞,MTT法检测细胞增殖抑制率;流式细胞术分析周期和凋亡情况;TranswellTM实验验证迁移侵袭能力的改变;酶标仪检测caspase-3活性。结果重组质粒对AQP9有明显的过表达及抑制表达作用,转染p EGFP-N1-AQP9组肝癌细胞的增殖抑制作用明显大于单纯As2O3处理组,侵袭及迁移能力显著减弱,细胞周期停滞在G0/G1期,凋亡明显多于单纯As2O3处理组,活化的caspase-3活性最高。转染pshRNA-AQP9组细胞的增殖抑制作用及caspase-3活性小于单纯As2O3处理组,侵袭迁移能力强于单纯As2O3处理组,细胞周期停滞在G0/G1期的数量及凋亡率较少。结论调节AQP9的表达影响Hep G2肝癌细胞的生物学行为并影响As2O3对Hep G2肝癌细胞的敏感性。; 唐洁王川姜政; 关键词：AQP9 三氧化二砷肝癌

人水甘油通道蛋白9重组质粒的构建及表达被引量：3: 2013年; 目的:构建人水甘油通道蛋白9(aquaglyceroporin9,AQP9)重组质粒,并检测其融合蛋白在真核细胞COS-7中的表达,为阐明AQP9在非酒精性脂肪肝病(nonalcoholic fatty liver disease,NAFLD)中的作用奠定基础。方法:通过RT-PCR方法从人肝脏组织中获得AQP9基因,插入pEGFP-N1质粒,构建重组质粒pEGFP-N1-AQP9,转染COS-7细胞,通过荧光显微镜检测其转染情况,RT-PCR和Western blot检测AQP9在真核细胞中的表达。结果:PCR及酶切鉴定显示插入人AQP9大小正确。测序鉴定显示,1个碱基发生突变,45位:A→G,为无义突变。通过RT-PCR和Western blot检测到AQP9表达,说明AQP9基因在COS-7细胞中表达并与绿色荧光蛋白融合,且具有免疫原性。结论:成功构建了pEGFP-N1-AQP9重组质粒,并在COS-7细胞中表达,为进一步研究AQP9在NAFLD发生发展中的作用奠定基础。; 王川谭翠姜政王丕龙; 关键词：非酒精性脂肪肝病重组质粒

重组AQP9对L-02细胞脂质沉积的影响被引量：6: 2012年; 目的构建人水甘油通道蛋白9(aquaglyceroporin9,AQP9)重组质粒,验证其在L-02肝细胞中的表达,并检测其对非酒精性脂肪肝病(nonalcoholic fatty liver disease,NAFLD)细胞模型的作用。方法从人肝脏组织中提取总RNA,RT-PCR获得AQP9基因,克隆到载体pEGFP-N1上,构建重组质粒pEGFP-N1-AQP9。将其转染L-02细胞,通过荧光显微镜观察其转染情况,RT-PCR和Western blot检测AQP9基因在细胞中的表达。通过油红O染色,测定甘油三酯、游离脂肪酸及甘油含量,检测其对L-02细胞脂肪变性模型的作用。结果成功构建pEGFP-N1-AQP9重组质粒,并能在L-02细胞中表达,将其转染L-02细胞脂肪变性模型后,油红O染色可见油酸/pEGFP-N1-AQP9转染组较油酸组细胞内脂质含量明显升高,油酸/pEGFP-N1-AQP9转染组细胞内甘油三酯、游离脂肪酸及甘油含量分别为(5.435±0.337)、(2.016±0.144)、(1.485±0.113)mmol/L,而油酸组分别为(3.218±0.220)、(1.538±0.193)、(1.024±0.148)mmol/L,两者之间差异有统计学意义(P<0.01),说明上调AQP9表达量可使其脂肪变性程度加重。结论 AQP9异常升高能够引起或加重非酒精性脂肪肝病。; 王川袁媛姜政王丕龙; 关键词：非酒精性脂肪肝病重组质粒

黏膜切除治疗Barrett食管疗效及安全性的Meta分析: 2016年; 目的评价黏膜切除（EMR）对于Barrett食管（BE）治疗的有效性、持久性及不良事件发生率。方法计算机检索Embase、PubMed、维普、中国期刊全文数据库、万方数字化期刊全文数据库等。提取各病理类型的BE接受EMR治疗后根除肠上皮化生（CE-IM）、上皮内瘤变（CE-N）的比率,治疗随访期间肠上皮化（IM）或瘤变复发及不良事件发生率,应用R3.1.3软件合并数据进行统计学分析,计算其有效性、持久性及不良事件发生率。结果共纳入4篇研究,总病例130例。EMR治疗异型增生或黏膜内癌的BE患者中,达到CE-N为97%（95%CI：0.91~0.99）,达到CE-IM为91%（95%CI：0.83~0.95）,在随访过程中瘤变或IM复发率为8%,常见并发症食管狭窄与出血,其发生率分别为39%和6%。结论 EMR作为BE内镜治疗的推荐方式,其在治疗伴异型增生或黏膜内癌的BE上有确切的效果,但其并发症特别是食管狭窄发生率较高。; 程洁童婷婷胡丹姜政; 关键词：BARRETT食管 META分析

SL7207/pEGFP-N1-AQP9及SL7207/pshRNA-AQP9重组沙门菌的构建及表达被引量：2: 2012年; 目的将人水甘油通道蛋白9(AQP9)真核表达质粒pEGFP-N1-AQP9及干扰质粒pshRNA-AQP9通过电穿孔转化减毒沙门菌株SL7207,并验证其表达情况,为阐明AQP9在非酒精性脂肪肝病(NAFLD)中的作用奠定基础。方法从人肝脏组织中通过RT-PCR获得AQP9基因,克隆到载体pEGFP-N1上,构建真核表达质粒pEGFP-N1-AQP9,设计合成针对人AQP9的siRNA,退火形成双链shRNA,并插入pGenesil-1质粒中,构建干扰质粒pshRNA-AQP9,电穿孔转化减毒沙门菌株SL7207,通过PCR、Western blot验证其表达情况,并检测其稳定性。结果成功构建pEGFP-N1-AQP9及pshRNA-AQP9重组质粒,将其转化SL7207后,能在重组沙门菌中表达。结论成功构建SL7207/pEGFP-N1-AQP9及SL7207/pshRNA-AQP9重组沙门菌,为进一步研究AQP9对NAFLD的基因治疗奠定基础。; 王川亢渝俊姜政王丕龙; 关键词：非酒精性脂肪肝病重组质粒基因治疗

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国家自然科学基金(81070318)